A finalidade do presente trabalho foi estudar algumas das proteínas fibrilares da matriz extracelular de 54 neoplasias mamárias benignas e malignas na espécie canina, utilizando métodos histoquímicos: Picrosirius associado à polarização para fibras colágenas , método de Gordon - Sweats para fibras reticulares e método de Weigert com e sem oxidação para fibras elásticas. Evidenciou-se na matriz uma grande variabilidade na quantidade, distribuição e características dos componentes matriciais presentes nos diferentes tipos de neoplasias. Detectou-se, assim, colágeno I, III e elementos do sistema elástico, distribuídos diferentemente nas neoplasias benignas e malignas. O método Picrosirius simples e associado à polarização permitiu a visualização do colágeno sob a forma de fibras espessas distribuídas irregularmente no estroma dos carcinomas e de modo mais ordenado e regular nas neoplasias benignas e, fibras mais finas, em menor quantidade, irregularmente e aleatoriamente dispostas nos carcinomas e regularmente nas neoplasias benigna. Sob luz polarizada os feixes de fibras colágenas , apresentaram diferentes comprimentos, avermelhados ou amarelados e fortemente birrefringentes, sugerindo serem colágeno tipo I e, entremeando as fibras, algumas mais finas ,pálidas, esverdeadas e fracamente birrefringentes, presumivelmente colágeno tipo III. Em áreas condrometaplásicas, tanto nos carcinomas como nas neoplasias benignas notou-se que os feixes colágenos apresentavam-se com fibras finas, paralelas, limitando regiões estreitas onde os condrócitos se aninhavam, e, rodeando esta área, feixes de fibras espessas, anastomosadas, dispostas irregularmente nos carcinomas e ordenadamente e paralelas nas neoplasias benignas. Sob luz polarizada, essa população entre condrócitos era formada por fibras pálidas e amareladas, sugerindo padrão tipo II e na faixa circundante, feixes fortemente birrefringentes, sugerindo o padrão do colágeno tipo I.. O uso do método - Gordon & Sweats, permitiu a visualização do colágeno sob a forma de fibras finas, dispostas tanto nos estromas densos como nos frouxos, com densidade variada mas, principalmente , margeando os ácinos e túbulos. Quanto à presença do sistema elástico em tumores benignos e malignos, verificou-se que há predomínio dessas fibras nos malignos, principalmente na pseudocápsula e ao redor de ácinos e túbulos. Elementos do sistema elástico não foram observados em espécimes submetidos à coloração de Weigert sem oxidação. Neste mesmo material, com oxidação, as fibras oxitalâmicas foram mais evidentes principalmente ao redor de ácinos, túbulos e pseudocápsula. Elementos do sistema elástico na (MEC) foram raros, tanto em amostras com e sem oxidação. Isto pode ser observado de maneira semelhante tanto em tumores benignos e malignos. Os resultados deste estudo enfatizam as profundas alterações estruturais dos componentes colagenosos e fibras do sistema elástico na matriz extracelular de neoplasias mamárias da espécie canina.

The aim of the present study was to study some of the proteins that form the extracellular matrix of 54 benign and malignant mammary neoplasms in dogs, using histochemical methods: Picrosirius and polarization microscopy for collagenous fibers, Gordon -Sweats's method for reticular fibers and Weigert's fucsine-resorcine method for elastic fibers. A large variability in quantity, distribution and characteristics of the matrix components was observed in the different types of neoplasms. Collagen type I, III and elements of the elastic system had different distribution in benign and malignant neoplasms. The simple Picrossirius method and under polarization enabled visualization of collagen as thick fibers irregularly distributed in the stroma of carcinomas and in a more orderly and regular fashion in benign neoplasms. A smaller amount of thin fibers was observed in an irregular and random disposition in carcinomas and in a regular disposition in benign neoplasms . Under polarization, the fibers present different lengths, were yellowish or reddish and strongly birefringent, what suggested that they were collagen type I and in the middle of these fibers, other ones, pale, greenish and weakly birefringent, some of them thinner, possibly collagen type III were observed. In the stroma of carcinoma, fibers were mostly thick, strongly birefringent, yellowish or reddish, disposed in an irregular and random fashion, mainly in the central areas. In condrometaplasic areas, both in malignant and benign neoplasms, there was a collagen population composed by thin fibers in a parallel disposition, limiting narrow regions where condrocytes were aligned. Around this area, there was a collagen population formed by bundles of thick anastomosed fibers, irregularly disposed in carcinomas and orderly, in a parallel fashion in benign neoplasms. Under polarization demonstrated that this population, among condrocytes, was formed by weakly birefringent fibers, pale and yellowish, what suggested a collagen type II pattern. The use of reticular fibers staining by Gordon & Sweats, enabled a visualization of collagen as thin fibers disposed not only in the dense stromas but also in the loose ones. These fibers presented variable density, but were found mainly around acini and tubules. In relation to the presence elements of the elastic system in benign and malignant tumors, it may be observed that they predominate in the malignant ones, mainly in the pseudocapsule and around acini and tubules. Elements of the elastic system were not observed in the specimens when they were submitted to Weigert's staining without oxidation. When the same material was submitted to Weigert's staining with oxidation , oxytalan fibers were more evidently around acini and tubules, as well as in the pseudocapsule. Elements of the elastic system were in the ECM, both in samples submitted to staining with oxidation and without it and this was similar for benign and malignant tumors. Results of this study emphasize the profound structural changes in collagenous and fibrous components of the extracellular matrix elastic system of mammary neoplasms in dogs. | A finalidade do presente trabalho foi estudar algumas das proteínas fibrilares da matriz extracelular de 54 neoplasias mamárias benignas e malignas na espécie canina, utilizando métodos histoquímicos: Picrosirius associado à polarização para fibras colágenas , método de Gordon - Sweats para fibras reticulares e método de Weigert com e sem oxidação para fibras elásticas. Evidenciou-se na matriz uma grande variabilidade na quantidade, distribuição e características dos componentes matriciais presentes nos diferentes tipos de neoplasias. Detectou-se, assim, colágeno I, III e elementos do sistema elástico, distribuídos diferentemente nas neoplasias benignas e malignas. O método Picrosirius simples e associado à polarização permitiu a visualização do colágeno sob a forma de fibras espessas distribuídas irregularmente no estroma dos carcinomas e de modo mais ordenado e regular nas neoplasias benignas e, fibras mais finas, em menor quantidade, irregularmente e aleatoriamente dispostas nos carcinomas e regularmente nas neoplasias benigna. Sob luz polarizada os feixes de fibras colágenas , apresentaram diferentes comprimentos, avermelhados ou amarelados e fortemente birrefringentes, sugerindo serem colágeno tipo I e, entremeando as fibras, algumas mais finas ,pálidas, esverdeadas e fracamente birrefringentes, presumivelmente colágeno tipo III. Em áreas condrometaplásicas, tanto nos carcinomas como nas neoplasias benignas notou-se que os feixes colágenos apresentavam-se com fibras finas, paralelas, limitando regiões estreitas onde os condrócitos se aninhavam, e, rodeando esta área, feixes de fibras espessas, anastomosadas, dispostas irregularmente nos carcinomas e ordenadamente e paralelas nas neoplasias benignas. Sob luz polarizada, essa população entre condrócitos era formada por fibras pálidas e amareladas, sugerindo padrão tipo II e na faixa circundante, feixes fortemente birrefringentes, sugerindo o padrão do colágeno tipo I.. O uso do método - Gordon & Sweats, permitiu a visualização do colágeno sob a forma de fibras finas, dispostas tanto nos estromas densos como nos frouxos, com densidade variada mas, principalmente , margeando os ácinos e túbulos. Quanto à presença do sistema elástico em tumores benignos e malignos, verificou-se que há predomínio dessas fibras nos malignos, principalmente na pseudocápsula e ao redor de ácinos e túbulos. Elementos do sistema elástico não foram observados em espécimes submetidos à coloração de Weigert sem oxidação. Neste mesmo material, com oxidação, as fibras oxitalâmicas foram mais evidentes principalmente ao redor de ácinos, túbulos e pseudocápsula. Elementos do sistema elástico na (MEC) foram raros, tanto em amostras com e sem oxidação. Isto pode ser observado de maneira semelhante tanto em tumores benignos e malignos. Os resultados deste estudo enfatizam as profundas alterações estruturais dos componentes colagenosos e fibras do sistema elástico na matriz extracelular de neoplasias mamárias da espécie canina.

Recentemente, foco de leishmaniose visceral canina (CVL) foi descrito na região noroeste do Estado de São Paulo - Brasil. O Hospital Veterinário - UNESP - Araçatuba, no ano de 2.000, desenvolveu 60 testes citopatológicos de casos suspeitos de leishmaniose usando aspirado por agulha fina (FNA). Os esfregaços de linfonodo foram corados pelo método de Romanowsky (Diff-Quik®) e observados em microscopia de luz. Os casos positivos mostraram formas amastigotas típicas de Leishmania livres ou em vacúolos de macrófagos. Sinais citopatológicos de reatividade do sistema linfo-histiocitário com ausência de parasitos foram também observados. Com o objetivo de implementar o diagnóstico da CVL, detectando parasitos e material antigênico nos esfregaços, aplicou-se a reação de imunofluorescência direta (IFD) usando anticorpo policlonal anti-Leishmania produzido em camundongo. Comparamos o método de IFD com a pesquisa direta do parasito em esfregaços corados pelo método de Romanowsky. Dos 60 cães com sinais clínicos da doença, o exame direto foi positivo em 50% (n=30), duvidoso em 36,7% (n=22) e negativo com reatividade do linfonodo em 13,3% (n=8). Quando os linfonodos foram submetidos a reação de IFD observamos reação positiva em 93,3% (n=56) e reação negativa em 6,7% (n=4). Nossos resultados mostraram que a reação de IFD apresentou alta sensibilidade quando comparada a pesquisa direta do parasito pela coloração de Romanowsky. A reação de IFD pode ser um método útil para confirmar os casos duvidosos da doença, onde as formas amastigotas não são identificadas com facilidade.

Recentemente, foco de leishmaniose visceral canina (CVL) foi descrito na região noroeste do Estado de São Paulo - Brasil. O Hospital Veterinário - UNESP - Araçatuba, no ano de 2.000, desenvolveu 60 testes citopatológicos de casos suspeitos de leishmaniose usando aspirado por agulha fina (FNA). Os esfregaços de linfonodo foram corados pelo método de Romanowsky (Diff-Quik®) e observados em microscopia de luz. Os casos positivos mostraram formas amastigotas típicas de Leishmania livres ou em vacúolos de macrófagos. Sinais citopatológicos de reatividade do sistema linfo-histiocitário com ausência de parasitos foram também observados. Com o objetivo de implementar o diagnóstico da CVL, detectando parasitos e material antigênico nos esfregaços, aplicou-se a reação de imunofluorescência direta (IFD) usando anticorpo policlonal anti-Leishmania produzido em camundongo. Comparamos o método de IFD com a pesquisa direta do parasito em esfregaços corados pelo método de Romanowsky. Dos 60 cães com sinais clínicos da doença, o exame direto foi positivo em 50% (n=30), duvidoso em 36,7% (n=22) e negativo com reatividade do linfonodo em 13,3% (n=8). Quando os linfonodos foram submetidos a reação de IFD observamos reação positiva em 93,3% (n=56) e reação negativa em 6,7% (n=4). Nossos resultados mostraram que a reação de IFD apresentou alta sensibilidade quando comparada a pesquisa direta do parasito pela coloração de Romanowsky. A reação de IFD pode ser um método útil para confirmar os casos duvidosos da doença, onde as formas amastigotas não são identificadas com facilidade. | Recently, canine visceral leishmaniasis (CVL) was detected in the northwest of São Paulo State - Brazil. The Veterinary Hospital - UNESP - Araçatuba, in 2.000, carried out 60 cytopathological test of suspected cases of leishmaniasis using the fine-needle aspiration (FNA). The smears of the FNA popliteal lymph nodes were stained by the Romanowsky stain (Diff-Quik®) and observed using a light microscope. The positive cases showed typical amastigotes forms of Leishmania either free or in macrophage vacuoles. Cytopathological signs of reactivity of the lymph-hystiocitary system with the absence of parasites were also detected. In order to improve the diagnosis of CVL, looking for parasites and antigenic material detection in smears, we standardized the direct immunofluorescence assay (IFD) using mouse anti-Leishmania policlonal antibodies. We compared the IFD assay with the direct search of parasites in smears stained by Romanowsky stain. From the 60 dogs with clinical signs of the disease, the direct exam was positive in 50% (n=30), uncertain in 36,7% (n=22) and negative with lymph node reativity in 13,3% (n=8). When the lymph node smears were submitted to IFD assay we observed positive reaction in 93,3% (n=56) and negative reaction in 6,7% (n=4). Our results showed that IFD assay presented a high sensibility compared to parasite direct search by Romanowsky stain. The IFD assay could be useful method to confirm the uncertain cases of the disease, where amastigotes forms were not clearly identified.

Para investigar o efeito da idade sobre o equilíbrio ácido-básico de bovinos neonatos, colheram-se amostras de sangue venoso de 300 bezerras sadias da raça Holandesa distribuídas por 15 grupos etários: do nascimento até 8 h; de 8 a 16 h; de 16 a 24 h; 2 d; 3 d; 4 d; 5 d; 6 e 7 d; 8 e 9 d; 10 e 11 d; 12 e 13 d; 14 e 15 d; 16 a 20 d; 21 a 25 d; e 26 a 30 d. Determinaram-se os valores de pH, pCO2, pO2, HCO3-, TCO2, BE, StB e SatO2, testando-se o efeito da idade por meio da Análise de Variâncias. Nas bezerras em seu primeiro dia de idade, estudaram-se as correlações das variáveis com o tempo de vida em horas; e a influência da condição de parto (espontâneos contra auxiliados ou distócicos). O pH e a pCO2 foram menor e maior, respectivamente, no primeiro grupo; e o BE e o StB mais reduzidos até 16 horas de vida, com uma tendência a aumentarem até o quinto dia. Ao longo do primeiro dia de vida o pH, o BE e o StB se elevaram e a pCO2 diminuiu. A condição do parto não atuou, em geral, como um fator adicional de variação. Tais resultados reforçam as evidências de que o estado de acidose mista exibido ao nascimento tende a se reverter nos primeiros dias de vida; e comprovam que os valores das variáveis hemogasométricas mantêm-se estabilizados ao longo de todo o período neonatal restante.

Para investigar o efeito da idade sobre o equilíbrio ácido-básico de bovinos neonatos, colheram-se amostras de sangue venoso de 300 bezerras sadias da raça Holandesa distribuídas por 15 grupos etários: do nascimento até 8 h; de 8 a 16 h; de 16 a 24 h; 2 d; 3 d; 4 d; 5 d; 6 e 7 d; 8 e 9 d; 10 e 11 d; 12 e 13 d; 14 e 15 d; 16 a 20 d; 21 a 25 d; e 26 a 30 d. Determinaram-se os valores de pH, pCO2, pO2, HCO3-, TCO2, BE, StB e SatO2, testando-se o efeito da idade por meio da Análise de Variâncias. Nas bezerras em seu primeiro dia de idade, estudaram-se as correlações das variáveis com o tempo de vida em horas; e a influência da condição de parto (espontâneos contra auxiliados ou distócicos). O pH e a pCO2 foram menor e maior, respectivamente, no primeiro grupo; e o BE e o StB mais reduzidos até 16 horas de vida, com uma tendência a aumentarem até o quinto dia. Ao longo do primeiro dia de vida o pH, o BE e o StB se elevaram e a pCO2 diminuiu. A condição do parto não atuou, em geral, como um fator adicional de variação. Tais resultados reforçam as evidências de que o estado de acidose mista exibido ao nascimento tende a se reverter nos primeiros dias de vida; e comprovam que os valores das variáveis hemogasométricas mantêm-se estabilizados ao longo de todo o período neonatal restante. | Venous blood samples of 300 healthy female Holstein calves were used to study the effect of the age on the acid-base balance in the neonatal period. The calves were divided in 15 age groups: from birth to 8 h; 8 to 16 h; 16 to 24 h; 2 d; 3 d; 4 d; 5 d; 6 and 7 d; 8 and 9 d; 10 and 11 d; 12 and 13 d; 14 and 15 d; 16 to 20 d; 21 to 25 d; and 26 to 30 d. Blood pH, pCO2, pO2, HCO3-, TCO2, BE, StB and SatO2 values were measured and the results were analysed through ANOVA. The correlation between the variables and age in the first day of life was studied. The influence of the type of parturition (normal versus assisted or dystocic) on the acid-base status was compared. Blood pH and pCO2 values were respectivelly lower and higher in the first age group; BE and StB were reduced in the first 16 h of life, showing a trend to increase up to the 5th day of life. The older the calf, in the first day of life, the higher the blood pH, BE, and StB; the lower the blood pCO2. Few changes occurred in the acid-base status of calves born from different types of parturition. These results reforced the evidence that mixed acidosis presented at birth tend to be reverted during the first days of life. The acid-base vriables remained stable along the rest of the neonatal period.

Observações histológicas em moluscos da espécie Lymnaea columella foram realizadas para determinar a existência ou não de alterações provocadas pelo uso do látex de Euphorbia splendens var. hislopii. O experimento foi realizado de acordo com os métodos padronizados pela OMS. Cinqüenta exemplares de L. columella, com comprimento de concha de 6±1mm, foram submetidos a 200ml das soluções nas concentrações de 0,47µl/L; 0,76µl/L; 0,94µl/L e 1,51µl/L, durante 24 horas. Após o evento experimental, os moluscos foram colocados em solução de Raillet & Henry, para sacrifício e fixação. Os resultados demonstraram lesões caracterizadas por degeneração, necrose e acúmulo de líquido na glândula digestiva e no rim, em exemplares submetidos a concentrações a partir de 0,47 mil/L.

Observações histológicas em moluscos da espécie Lymnaea columella foram realizadas para determinar a existência ou não de alterações provocadas pelo uso do látex de Euphorbia splendens var. hislopii. O experimento foi realizado de acordo com os métodos padronizados pela OMS. Cinqüenta exemplares de L. columella, com comprimento de concha de 6±1mm, foram submetidos a 200ml das soluções nas concentrações de 0,47µl/L; 0,76µl/L; 0,94µl/L e 1,51µl/L, durante 24 horas. Após o evento experimental, os moluscos foram colocados em solução de Raillet & Henry, para sacrifício e fixação. Os resultados demonstraram lesões caracterizadas por degeneração, necrose e acúmulo de líquido na glândula digestiva e no rim, em exemplares submetidos a concentrações a partir de 0,47 mil/L. | Histological observations in Lymnaea columella snails to determine the existence or not of changes caused by the use of the Euphorbia splendens's latex were realized. The experiment was realized in agreement with the methods standardized by WHO. Fifty samples of L. columella, with shell 6±1mm long, were submitted at 200ml of the solutions in concentrations of 0,47µl/L; 0,76µl/L; 0,94µl/L and 1,51µl/L, during 24 hours. After the experimental event, the snails were placed in solution of Raillet & Henry, for sacrifice and fixation. The results demonstrated lesions characterized by degeneration, necrosis and liquid accumulation in the digestive gland and in the kidney, in samples maintained in concentrations from 0,47 mul/L on.