O objetivo deste trabalho foi estudar a remoção do crioprotetor, em duas ou três etapas, em embriões bovinos produzidos in vitro após a congelação em vapor de Nirtogênio. Blastocistos expandidos (1329) foram mantidos em co-cultivo (controle) ou criopreservados em 3 protocolos de congelação em vapor de nitrogênio. Os embriões foram equilibrados na solução de 10% de EG por 10 minutos e em 17%, 22% ou 28% de EG por 30 segundos. Após o envase, as palhetas foram mantidas em vapor de nitrogênio por 2 minutos e armazenadas em nitrogênio líquido. Após a descongelação, os crioprotetores foram diluídos em duas etapas, usando 0,3M de sacarose e solução isotônica ou em três etapas usando 0,3M de sacarose + 10% de EG; 0,3M de sacarose e solução isotônica. Os embriões foram co-cultivados com células da granulosa, avaliando as taxas de re-expansão após 24 horas e de eclosão após 24, 48, 72 e 96 horas. Para os grupos congelados no vapor e diluição do crioprotetor em duas etapas, as taxas de eclosão foram de 1,94; 11,88 e 6,06% para EG17, EG22 e EG28, respectivamente. Já para os grupos com diluição do crioprotetor em três etapas, as taxas de eclosão foram de 4,67; 9,90 e 10,78% para EG17, EG22 e EG28, respectivamente.

Este estudo foi conduzido para analisar ao nível histopatológico, lesões produzidas por Acanthostomoides apophalliformis no peixe nativo Galaxias maculatus, e relacioná-las com os resultados do mortalidade induzida por parasitas na população dessa espécie, no lago Moreno, Parque Nacional Nahuel Huapi, Argentina. A ausência de inflamação na maioria das lesões, o fígado sem alterações em uma distância curta do foco das lesões e a aparência viável dos parasitas, sugerem uma boa relação parasita-hospedeiro. Esta hipótese é reforçada pelos dados que mostram a ausência de mortalidade induzida por A. apophalliformis na população dos peixes.

O objetivo do presente estudo foi purificar o hCG contido em uma preparação comercial (Pregnyl® Organon) por cromatografia de afinidade e avaliar a taxa de ovulação de vacas injetadas com o hormônio purificado. Uma coluna de cromatografia contendo matriz de Concanavalina-A Sepharose (Con-A) foi equilibrada e cem mil unidades internacionais (UI) de Pregnyl® foram aplicadas na coluna. Frações de 3,8µL foram colhidas (4ºC) a cada 5 minutos durante 12,5 horas, resultando em um total de 150 frações. Após a fração 76 adicionou-se à coluna solução tampão contendo 0,3M de ±-metilglicosidase. A concentração protéica das frações foi estimada por espectrofotometria (280nm). Foram observados dois picos de absorbância, um entre as frações 14 e 19 e outro entre as frações 90 e 100. As frações 14 a 19 e 90 a 150 foram reunidas seqüencialmente aos pares, concentradas por ultrafiltração e analisadas por SDS-PAGE. O primeiro pico resultou da eluição das proteínas não adsorvidas pela matriz de Con-A, enquanto o segundo representou as proteínas adsorvidas pela coluna, especialmente o hCG. As frações contendo hCG foram reunidas em uma única amostra cuja concentração protéica foi quantificada pelo método de Lowry. Vacas no 5º dia de um ciclo estral sincronizado, apresentando um folículo dominante maior que 8mm de diâmetro, foram injetadas com 0,1, 0,2 ou 0,3mg de proteína contida na amostra purificada. Após 48 horas, a taxa de ovulação observada foi de 0%, 50% e 75%, respectivamente. Foi demonstrado no presente estudo que a técnica de cromatografia por afinidade foi eficiente para aumentar a concentração relativa do hCG preservando sua atividade biológica.

Os peixes, por serem animais pecilotermos, estão sujeitos à influências da temperatura do ambiente. Vários trabalhos já descreveram que o sistema imune é influenciado pela temperatura, contudo não existem informações concernentes à influencia desta sobre os trombócitos. Trombócitos provenientes de trutas arco-íris (Oncorrhynchus mykiss) mantidas a 6°C, 10°C e 20°C foram testados quanto à sua capacidade de agregação. A porcentagem de trombócitos sofreu alteração dependendo da temperatura da água em que os animais foram mantidos, diminuindo de 19% (a 10°C), para 13% (a 6°C) e aumentando para 24% (a 20°C). Entretanto, a capacidade de agregação individual de cada célula não foi significativamente afetada por essas mudanças de temperatura, o que sugere a qualidade dessa célula em manter essa função indispensável independente da temperatura.

Com a finalidade de avaliar a variação na concentração sérica do fenobarbital durante um intervalo de 12 horas da sua administração, as concentrações séricas foram mensuradas a cada duas horas em 30 cães cronicamente medicados, durante no mínimo um mês. A determinação dos valores séricos de fenobarbital, por meio de Imunofluorescência polarizada. Os valores de meia-vida obtidos variaram de 13-131 horas, sendo que a maioria dos cães atingiram o estado de equilíbrio dinâmico por volta de 15 dias, e todos após quatro semanas, recomendando-se assim monitoração após quatro semanas do início da terapia ou após cada ajuste de dose. Houve diferença significante entre as médias das amostras coletadas duas e quatro horas (pico) com as das amostras coletadas imediatamente antes e oito, 10 e 12 horas após sua administração. Assim, para a monitoração, pode-se realizar a coleta sangüínea, imediatamente antes da administração do fenobarbital, ou em qualquer horário, entre oito a 12 horas após sua administração e nos casos suspeitos de intoxicação uma segunda amostra pode ser coletada dentro de duas a quatro horas após a sua administração. | In order to evaluate daily changes of concentration of phenobarbital during the interval of 12 hours of its administration, serum phenobarbital concentration were measured each two hours in 30 dogs submitted to the referred drug therapy for at least one month. All serum phenobarbital drug concentration were determined by use of a fluorecence polarization immunoassay. The values of half-lives obtained varied from 13 to 131 hours, most dogs reached steaty state serum concentrations by 15 days, and all dogs after four weeks. Therefore, clinicians should monitor serum phenobarbital concentrations four weeks after initiating treatment or after a change in dosage. There was significant difference among the averages of the samples two and four hours (peak) with the ones samples colected immediately before, and eight, 10 and 12 hours after its administration. In order to monitore serum phenobarbital concentrarions, its is suggest that blood collection is measured just before the dose or at any time between eight and 12 hours after its administration. If a concern arises regarding toxicity, a second sample should be colleted between two and four hours after phenobarbital administration.

Infecção das estruturas umbilicais pode resultar em bacteremia, septicemia e morte em neonatos com falha na imunidade passiva sendo os microrganismos usuais de onfalites isolados freqüentemente em animais com bacteremia. Um estudo foi desenvolvido entre setembro 2002 e setembro 2003 utilizando-se 44 bezerros, visando verificar a freqüência de bacteremia em bezerros neonatos e a correlação entre os agentes isolados a partir de amostras de sangue de estruturas umbilicais. Amostras de sangue foram obtidas por punção da jugular e submetidas à cultura para isolamento de agentes microbianos, sendo 24 obtidas entre 48 e 72 horas e 20 entre o terceiro e o quinto dia após o nascimento. Através de "Swabs" procedeu-se à coleta de material das estruturas umbilicais para a mesma finalidade. Obteve-se crescimento microbiano em 17 (38,67%) amostras de sangue e 100% das amostras de estruturas umbilicais. Os microorganismos mais freqüentes em amostras de sangue foram Staphylococcus sp., E. coli, Bacillus spp, Pseudomonas sp. e Streptococcus. Todos os animais com bacteremia apresentaram manifestações de enfermidade focal ou sistêmica. O sinal clínico mais freqüentemente relacionado com cultura de sangue positiva foi o espessamento das estruturas umbilicais. Bacillus spp, Enterobacter spp, Micrococcus spp. e E. coli foram os microrganismos isolados das estruturas umbilicais. Os dados confirmam uma flora bacteriana mista nos casos de onfalite e sugerem uma prevalência alta de bacteremia em bezerros neonatos, sobretudo aqueles com onfalite, evidenciando a importância de boa transmissão de imunoglobulinas através do colostro. | Umbilical structures infections can be followed by bacteremic, septicemic infections and death in newborns with passive immunity deficiency. Microorganisms isolated in omphalitis have been also isolated from animals with bacteremia. From september/2002 to september/2003, a research was developed using 44 calves, in order to evaluate bacteremia frequency in newborns and to correlate microorganisms isolated from blood samples and umbilical structures. Blood samples were collected from jugular vein for microorganisms isolation. Twenty four samples were collected in a period of 24 to 48 hours, the other 20 samples from thirty to fifty days after birth. Umbilical structures materials were collected though swabs. Microbial growth occurred in 17 (38,67%) blood samples and in 100% of umbilical samples. Staphylococcus spp., E. coli, Bacillus spp, Pseudomonas spp. and Streptococcus spp were the major isolated microorganisms from blood. All bacteremic animals presented systemic or localized clinical manifestations. The most reported clinical sign was thickness of umbilical structures. Bacillus spp, Enterobacter spp, Micrococcus spp. and E. coli were isolated from umbilical structures. Data confirm a mixed bacterial environment in omphalitis, and suggest a high prevalence of bacteremic infections in newborns calves, pointing out the need of passive immunity transfer through colostrum.

Este trabalho teve como objetivo fazer um estudo métrico dos segmentos corpóreos do sistema reprodutor das espécies Achatina fulica e Achatina monochromatica, estabelecendo parâmetros comparativos entre ambas, para melhor conhecimento dessas espécies. Foram usados 15 exemplares adultos de cada espécie. Após o processo seletivo, pesagem e tomada das medidas da concha, os espécimes foram sacrificados por congelamento em freezer, a -2ºC por aproximadamente 10min. Retirado o sistema reprodutor, com incisão longitudinal, procedeu-se as medidas de cada segmento. A análise estatística mostrou que, apesar dos espécimes serem mantidos sob as mesmas condições ambientais e alimentares e submetidos ao mesmo tipo de seleção, ocorreram variações no desenvolvimento e tamanho dos órgãos reprodutores. O aspecto morfológico do sistema reprodutor das duas espécies difere macroscopicamente em seus vários segmentos, porém, a disposição e a localização dos mesmos são idênticas. | The objective of this work was to perform a metric study of the reproductive system of the species Achantina fulica and Achatina monochromatica , establishing comparative parameters between both, to improve the knowledge of the species. After the selective process, weighting and measures of the shell, the specimens were frozen in freezer to -2(0)C for approximately 10min as a sacrificing form. For each segments the measures proceeded after the retrieval of the reproductive system through a longitudinal incision. The statistical analysis showed that, in spite of the specimens be maintained under the same environmental and alimentary conditions and submitted to the same selection type, variations happened in the development and size of the reproductive organs. The morphologic aspect of the reproductive system in both species differs macroscopically in several segments; however, the disposition and the location of those segments are identical.

Este estudo teve como objetivos padronizar o kit TF-Test para a quantificação de ovos de parasitas gastrintestinais de ovinos e compará-lo ao método de Gordon & Whitlock modificado (G&W). Vinte quatro cordeiros confinados foram infectados artificialmente com Haemonchus contortus, durante 12 semanas, até o abate, quando foram colhidas amostras fecais e realizada a identificação e contagem dos parasitas abomasais. Nestes animais, ovos de H. contortus foram detectados em 95,8% das amostras fecais por ambos os testes (P>;0,05). Os coeficientes de correlação (r) entre a carga parasitária (CP) e os valores de OPG obtidos pelos métodos de G&W e TF-Test foram, respectivamente, de r=0,52 e r=0,51 (dados não transformados) e r=0,85 e r=0,87 (dados transformados em log). Outras 100 amostras fecais foram colhidas de ovinos naturalmente infectados. Nas amostras destes animais, os testes G&W e TF-Test propiciaram o diagnóstico de ovos de estrongilídeos em 85% e 86% das amostras, respectivamente (P>;0,05). Pelo TF-Test e pelo G&W, oocistos de Eimeria foram detectados em 33% e em 12% das amostras (P<0,001) e ovos de Strongyloides spp. em 15% e 5% das amostras, respectivamente (P<0,05). Ambos os testes foram precisos para o diagnóstico de estrongilídeos gastrintestinais, porém, o TF-Test foi superior para o diagnóstico de oocistos de Eimeria spp. e de ovos de Strongyloides spp., mas, por outro lado, subestimou o número de ovos de estrongilídeos presente nas amostras. | This study was performed to standardize parasite egg counting in feces of sheep by TF-Test, in addition to compare this test to the Gordon & Whitlock technique (G&W). Twenty-four lambs were artificially infected with Haemonchus contortus throughout 12 weeks. At the end of this time, faecal samples were taken and animals were slaughtered for worm identification and counting. G&W and TF-Test methods were carried out on each fecal sample. Both tests showed Haemonchus eggs in 95.8% of the samples (P>;0.05). The correlation coefficients (r) between fecal egg counts (FEC) using G&W x Total Worm Count (TWC) were r=0.52 (not transformed data) and r=0.85 (transformed data); between FEC by TF-Test x TWC were r=0.51 (not transformed data) and r=0.87 (transformed data). Other 100 fecal samples were taken from naturally infected sheep. In these animals, the G&W and TF-Test methods showed 85% and 86% of fecal samples positive for Strongylidea eggs, respectively (P>;0.05). Also in those animals, Eimeria oocysts were found in 33% of fecal samples by TF-Test, whereas in the G&W only 12% were positive (P<0.001). For Strongyloides spp., TF-Test showed 15% of positive fecal samples, whereas G&W showed 5% (P<0.05). In conclusion, both methods were efficient to diagnose gastrointestinal nematodes and TF-Test was superior to diagnose oocysts of Eimeria spp. and eggs of Strongyloides spp; conversely, Strongylidea eggs counting using TF-Test was underestimated.

Twelve rumen canulated male sheep were used to evaluate ruminal effective degradability (EDG) and volatile fatty acids(VFA), ammonia nitrogen(N-NH3) and pH of rumen contents, and blood ureic nitrogen . They received six treatments in a factorial arrangement 2 x 3: sugar cane fresh (CAF) or as silage (CAS) x urea levels of 0%, 0.5% and 1.0% for both forages. Values of EDG of CAF and CAS dry matter(DM) were not significantly different. Addition of crescent levels of urea to the forages resulted in a linear decrease of DM EDG for CAF and CAS. Considering CAS, EDG of neutral detergent fiber was linearly lower with crescent levels of urea. Ruminal contents pH values were higher for CAF than for CAS but no differences were find among levels of urea addition. Ruminal contents levels of total VFA and propionic acid were higher for CAF than for CAS; inversely, acetic acid levels were higher for CAS. N-NH3 levels of ruminal contents were higher for CAS than for CAF. For both fresh and silage treatments, N-NH3 concentrations in ruminal contents, as well N-ureic blood concentrations increased linearly with higher levels of urea addition. It was concluded that 0.5% and 1.0% urea added to fresh or ensiled forages had no satisfactory results and that CAF indicated better nutritional value than CAS. | Doze ovinos com cânulas de rúmen foram empregados para comparar seis tratamentos, dispostos em um arranjo fatorial 2 x 3: cana de açúcar nas formas fresca (CAF) ou ensilada (CAS) x teores de uréia iguais a 0,0%, 0,5% e 1,0%. Foram estimadas: taxas de degradabilidade efetiva (DGE) dos alimentos volumosos, concentrações de ácidos graxos voláteis(AGV) e de nitrogênio amoniacal (N-NH3) e valores de pH do conteúdo do rúmen, além de concentrações de N-uréico no sangue. As taxas de DGE da matéria seca (MS) mostraram-se semelhantes para CAF e CAS. A adição de teores crescentes de uréia às forragens resultou em diminuição linear da DGE da MS tanto da CAF como da CAS. No caso da CAS, a DGE da fibra em detergente neutro diminuiu linearmente com concentrações crescentes de uréia. Os valores de pH do conteúdo ruminal foram maiores para CAS em relação a CAF, mas não ocorreram diferenças devidas à adição de uréia. Os teores do conteúdo ruminal em total de AGV e os de ácido propiônico foram maiores para a CAF em relação a CAS; os de ácido acético, ao contrário, foram maiores para a CAS. Os teores de N-NH3 do conteúdo ruminal foram maiores para a CAS que para a CAF. Nos tratamentos com CAF e nos com CAS, as concentrações de N-NH3 no conteúdo ruminal e de N-uréico no sangue aumentaram linearmente com maiores adições de uréia. Concluiu-se que a adição de 0,5% e 1,0% uréia às forragens frescas ou ensiladas de cana-de-açucar não mostrou resultados satisfatórios e que CAF apresentou indícios de melhor qualidade nutricional que CAS.

The transforming growth factor alpha (TGF±) is a molecule from the family of the transforming growth factors and has been pointed out as a probable regulator of testicular development. The hypotheses in the present study was that bulls from synthetic breeds with deficient seminal quality presented different TGF± expression and average number of Sertoli cells when compared to normal bulls. Testicles from six Braford and eight Brangus-Ibagé bulls with and without problems in semen quality were used. The immunohistochemical technique was employed to determine the TGF± expression in seminiferous epithelium and to mark the nucleus of the Sertoli cells with the use of respectively of monoclonal antibody anti-TGF± (Ab-2; Calbiochem) and anti-S100 protein polyclonal antibody (DAKO). The general average of spermatogonia marked by the antibody was different for each breed: 9.2±0.4 for Braford and 11.0±0.3 for Brangus-Ibagé. No difference regarding the expression of TGF± was found between sound and unsound bulls. The average number of Sertoli cells was similar between bull breeds. A smaller Sertoli cell population was found in the sound Brangus-Ibagé bulls, which may be an indication that the origin of the low seminal quality in synthetic bulls should be detached from the embryonic or the early newborn phase when the total number of such cells in adults is established. The understanding of cell interaction in the seminiferous epithelium, involving growth related factors, requires not only the identification of the expression site but also the in vivo meaning to spermiogenesis. The study of the growth factors in the testicle in adult bulls is worth further research in order to understand the regulation of spermiogenesis at the paracrine level in adult animals. | O fator de crescimento transformante alfa (TGF±) é uma molécula da família dos fatores de crescimento transformantes, que tem sido apontado como provável regulador do desenvolvimento testicular. A hipótese do presente estudo foi de que touros de raças sintéticas com deficiente qualidade seminal apresentam um padrão de expressão de TGF± e uma freqüência média de células de Sertoli, diferentes quando comparados aos touros com adequada qualidade seminal. Foram utilizados para o estudo, testículos de seis touros Braford e oito touros Brangus-Ibagé com e sem problemas na qualidade seminal. A técnica de imuno-histoquímica foi empregada para determinar a expressão de TGF± no epitélio seminífero e também para marcar o núcleo das células de Sertoli, com o uso do anticorpo monoclonal TGF± (Ab-2; Calbiochem) e anticorpo policlonal anti-proteína S100 (DAKO). A média geral de espermatogônias marcadas pelo anticorpo foi diferente para raça: 9.2±0.4 para Braford e 11.0±0.3 para Brangus-Ibagé (P<0.05), porém não houve diferença estatisticamente significativa entre as fases analisadas. A média de células de Sertoli foi similar entre as raças de touros. Porém houve uma interação significativa (P<0.05) entre raça e condição reprodutiva, representada por uma menor freqüência de células Sertoli nos touros Brangus-Ibagé considerados aptos à reprodução. Este achado que pode ser um indicador de que a origem da menor qualidade de sêmen nestes animais de raças sintéticas deve estar desvinculada da fase embrionária ou neonatal, já que é nesta fase que o número de células de Sertoli é estabelecido para o indivíduo adulto. O entendimento das interações celulares do epitélio seminífero, envolvendo os fatores de crescimento no controle parácrino da espermatogênese, requer não somente a identificação do local de expressão destes fatores, como também o seu significado in vivo.