Toxoplasmosis is a zoonotic infection caused by Toxoplasma gondii that affects a wide range of vertebrates. Rodents are intermediate hosts and serve as food for felids, the definitive hosts. However, because of the high variety of species in the order Rodentia, the serological diagnosis is difficult to perform, since the most used techniques require the use of specific antibody conjugated to fluorescein or enzymes. The aim of this study was to evaluate the use of a heterologous secondary antibody conjugate in Immunofluorescence Antibody Test (IFAT) for diagnosis of anti-T. gondii antibodies in two species of wild rodents: Euryoryzomys russatus (WAGNER, 1848) and Calomys callosus (RENGGER, 1830). The specie Mus musculus (Linnaeus, 1758) was used as control conjugate. The animals were experimentally infected with five cysts of T. gondii (strain ME 49) per animal. The Modified Agglutination Test (MAT), which does not require the use of conjugates, and the presence of T. gondii cysts in the rodents were used to confirm the infection. For each animal species, serum samples were collected weekly for five weeks and tested (50 samples per rodent specie, total of 150 samples). None of the samples from C. callosus and E. russatus were positive in the IFAT when anti-mouse heterologous conjugate was used. Brain cysts of T. gondii were microscopically observed in all animals, except in one of the E. russatus. Positive results were found in the MAT 14 days after T. gondii infection in all three species of rodents and IFAT of the control group (M. musculus) was also positive 14 days after infection using anti-mouse (homologous) conjugate. The use of heterologous secondary antibody conjugates should be used with caution and the MAT had a good agreement for serological diagnosis of T. gondii in the studied rodent species. | A toxoplasmose é uma zoonose causada pelo Toxoplasma gondii, que afeta uma grande variedade de vertebrados. Os roedores são hospedeiros intermediários e servem de alimento para felinos, os hospedeiros definitivos. No entanto, por causa da elevada variedade de espécies na ordem Rodentia, o diagnóstico serológico é difícil de ser realizado, uma vez que as técnicas mais empregadas requerem a utilização de um anticorpo específico conjugado com fluoresceína ou enzimas. O objetivo deste estudo foi avaliar o uso de um conjugado secundário heterólogo na Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para diagnóstico de anticorpos anti-T. gondii em duas espécies de roedores silvestres: Euryoryzomys russatus (WAGNER, 1848) e Calomys callosus (RENGGER, 1830). A espécie Mus musculus (Linnaeus, 1758) foi utilizada como controle do conjugado. As três espécies de roedores foram experimentalmente infectadas com cinco cistos de T. gondii (cepas ME 49) por animal. O Teste de Aglutinação Modificado (MAT), que não requer o uso de conjugados, bem como, a presença de cistos de T. gondii nos roedores foram usados para confirmar a infecção. Para cada espécie de animal, amostras de soro foram coletadas durante cinco semanas e testadas (50 amostras por espécie de roedor, total de 150 amostras). Nenhuma das amostras de C. callosus e E. russatus foram positivas na RIFI, quando foi usado o conjugado heterólogo anti-camundongo. Cistos cerebrais de T. gondii foram microscopicamente observados em todos os animais, exceto em um dos E. russatus. Resultados positivos foram encontrados pelo MAT após 14 dias de inoculação em todas as três espécies estudadas e pela RIFI no grupo controle (M. musculus), também no dia 14 após a infecção utilizando conjugado anti-camundongo. O uso de conjugados secundários heterólogos deve ser empregado com cautela e o MAT apresentou uma boa concordância para o diagnóstico sorológico de T. gondii nas espécies de roedores estudadas.

O fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF) é um fator angiogênico com papel importante em processos patológicos e fisiológicos. O VEGF pode ser quantificado em diversos fluidos orgânicos, incluindo amostras de soro e plasma. O presente trabalho investigou a concentração do VEGF no soro e no plasma de cães saudáveis a fim de recomendar o manejo ótimo de amostras biológicas para a determinação dos níveis do VEGF. Amostras de sangue de 30 cães saudáveis foram coletadas em tubos estéreis contendo EDTA para análise do plasma e em tubos com ativador de coagulação para análise do soro. Os tubos foram centrifugados após 90 minutos da coleta a 1.400 x g por 10 minutos. A concentração do VEGF foi determinada com o método quantitativo de ELISA. O nível sérico médio de VEGF foi de 26,5+13,3pg/mL e o plasmático foi 11,7 + 16.4 pg/mL (p = 0,0003). Houve correlação positiva entre o VEGF do soro com as plaquetas (r = 0,37, p = 0,03) e correlação negativa entre o VEGF do soro com hemoglobina (r = -0,38, p = 0,03) e entre VEGF do plasma com hemoglobina (r = -0,34, p = 0,06). A comparação dos resultado obtidos nos exames de plasma e soro indicou que amostras de plasma podem ser utilizadas como ótimo fluido para quantificação do VEGF de cães. | Vascular endothelial growth factor (VEGF) is an angiogenic factor with a key role in physiological and pathological process. It can be measured in several organic fluids, including serum and plasma samples. The aim of this work was to investigate the concentration of serum and plasma VEGF of healthy dogs in order to recommend optimal handling of biological samples for accurate measurement of VEGF. Blood samples of thirty dogs were collected into sterile EDTA tube for plasma analysis and into clot activator tubes for serum analysis. The tubes were centrifuged within 90 minutes of collection at 1400 xg for 10 minutes. VEGF concentration was determined using the quantitative method (ELISA). Serum VEGF level was 26.5 + 13.3pg/mL and plasma VEGF was 11.7 + 16.4 pg/mL (p = 0.0003). There was a positive correlation between serum VEGF and platelets (r = 0.37, p = 0.03) and a negative correlation between serum VEGF and hemoglobin (r = -0.38, p = 0.03) and between plasma VEGF and  hemoglobin (r = -0.34, p = 0.06). When compared with serum samples it was concluded that plasma samples could be used as an optimal fluid for measuring VEGF in dogs.

The evaluation of the degree of attachment of owners to pets is an important resource to study the influence of the pets to different physical and psychosocial  factors to humans. The current study applied the LAPS (Lexington Attachment to Pets Scales) test to evaluate attachment degree of owners to their pets. The test was performed in 95 subjects, males and females from different age groups, in Minas Gerais and São Paulo state. Most of the questions were correlated to the total score (p < 0.0001). Women and elderly subjects had lower scores, demonstrating a greater degree of attachment when compared to males and  younger individuals, respectively. In conclusion, the age and gender differ to the degree of attachment. The use of negative questions in a test composed mostly by positive issues may inhibit the interviewer responses. | A avaliação do grau de apego de proprietários com os seus cães e gatos é um importante recurso para o estudo da influência dos animais em diferentes fatores físicos e psicossociais dos humanos. O presente trabalho empregou o teste LAPS (Lexington Attachment to Pets Scales) para a análise do grau de apego de proprietários com os seus cães e gatos. O teste foi aplicado em 95  indivíduos, dos sexos masculino e feminino de diferentes faixas etárias, dos estados de Minas Gerais e São Paulo. A maior parte das questões apresentou correlação com o escore total (p < 0,0001). As mulheres apresentaram menores escores quando  comparadas aos indivíduos do sexo masculino, assim como pessoas mais velhas em comparação aos indivíduos mais jovens. Concluiu-se que tanto o gênero como a faixa etária apresentam diferenças para o grau de apego. O emprego de questões negativas, em um teste composto em sua maior parte por questões positivas, pode inibir as respostas dos entrevistados.

Foi efetuada a comparação em hamsters da proteção conferida e dos níveis de anticorpos induzidos por duas bacterinas comerciais antileptospirose. Os ensaios empregados foram o teste oficial de potência com desafio (TP), o ensaio proposto, teste de inibição de crescimento de leptospiras in vitro (ICLIV) e a soroaglutinação microscópica (SAM). O protocolo de imunização foi representado por duas aplicações individuais de 0,25 mL das bacterinas, puras ou de suas diluições geométricas de razão dois variando de 200 a 51.200 para a bacterina A e de 200 a 3.200 para a bacterina B, por via subcutânea com o intervalo de 15 dias. Decorridos 15 dias da segunda aplicação de vacina, um grupo de animais foi desafiado com 0,2 mL de cultivos de leptospiras, por indivíduo, respectivamente dos sorovares Canicola (bacterinas A e B) ou Kennewicki (bacterina A). Os números de doses infectantes empregados nos desafios foram de 100 e 631 respectivamente, para os sorovares Canicola e Kennewicki. Decorridos 21 dias do desafio, os grupos de animais utilizados nos testes de ICLIV e SAM foram sangrados e os seus soros foram reunidos em pools (n = 5). No TP, adotando-se os critérios internacionais, as bacterinas foram aprovadas. A comparação do desempenho das bacterinas para os sorovares adotados, segundo sua concentração, por meio das proporções de animais sobreviventes ao TP e a média dos títulos de anticorpos identificados no teste de ICLIV, indicou que um título igual ou superior a 0,77 log corresponde ao nível de aprovação da bacterina no TP. | It was performed a comparison between the protection afforded in hamsters and the antibody levels induced by two commercial vaccines against leptospirosis. The assays used were the official challenge test (TP), the in vitro leptospires growth inhibition test (ICLIV) and microscopic agglutination test (MAT). The immunization protocol consisted of two single applications, 15 days from each other, of 0.25 mL of the bacterins, pure or its two-fold serial dilutions: 200 to 51,200 for bacterin A and 200 to 3.200 bacterin B, both of them administered subcutaneously. A group of animals was challenged, after 15 days from the second vaccine application, with 0.2 mL/animal of live leptospire cultures, with Canicola (bacterin A and B) or Kennewicki (bacterin A) serovars. The numbers of infective doses employed in the challenges were 100 and 631 for Canicola and Kennewicki serovars, respectively. After 15 days from the second vaccine dose the groups of animals used in ICLIV and SAM tests were bled and their sera were collected in pools (n = 5). In TP, adopting the criteria established by the Code Federal Regulation, both bacterins were approved. The comparison of the performance of the tested bacterins with the adopted serovars, according to its concentration, by the proportions of surviving animals to the challenge assay and the average of the neutralizing antibodies titers, established a neutralizing antibodies titer equal or higher than 0.77 log corresponding with the bacterin level of approval in the potency assay.

Chlamydophila felis is associated with upper respiratory tract infections. In the present study, 31 cats from a noncommercial shelter located in Osasco, SP, Brazil, were examined. The cats presented with clinical manifestations, which were classified from grade 1 to 4, with 4 indicating severe manifestations. In total, 16.13% of the cats presented with grade 1 severity of clinical manifestations, 25.81% presented with grade 2, 38.71% presented with grade 3, and 19.35% presented with grade 4. PCR was used to detect C. felis in samples taken from the oral mucosa and ocular conjunctiva of both eyes using sterile, dry cotton swabs. Overall, 58% of the samples were positive for C. felis. Of these animals, none showed clinical manifestations that were classified as grade 1, whereas 5.56% of cats were classified as grade 2, 61.11% were classified as grade 3, and 33.33% were classified as grade 4. The median clinical manifestation intensity score for the first group was 3 and ranged from 2 to 4. In the second group not positive for C. felis, 38.45% of the animals (5/13) presented with manifestations classified as grade 1, 53.85% (7/13) were classified as grade 2, 7.69% (1/13) were classified as grade 3, and no animals were classified as grade 4. The median clinical manifestation intensity score for the second group was 2 and ranged from 1 to 3. In this study, there was a high occurrence of C. felis in animals with clinical manifestations. | A Chlamydophila felis está associada à infecção de trato respiratório superior. No presente estudo, foram utilizados 31 felinos de um gatil não comercial, localizado em Osasco/SP. Os gatos apresentavam manifestações clínicas, classificadas de 1 a 4, sendo 4 atribuído àqueles que apresentavam pior manifestação clínica. Foi observada a intensidade de manifestação clínica grau 1 em 16,13% dos gatos, a 2 em 25,81%, a 3 em 38,71% e a 4 em 19,35%. A detecção de C. felis foi realizada por técnica de PCR em amostras obtidas com suabes de algodão, seco e estéril, de mucosa oral e de conjuntiva ocular de ambos os olhos. Verificou-se que 58% das amostras para C. felis foram positivas, entre esses animais, nenhum apresentou manifestação clínica classificada como grau 1, o grau 2 foi observado em 5,56% dos gatos, 61,11% para o 3 e 33,33% dos animais apresentava a intensidade 4. Verificou-se que para o primeiro grupo a mediana dos escores de intensidade das manifestações clínicas observadas foi de 3, variando de 2 a 4. No segundo grupo, foi observado 38,45% (5/13) dos animais para a intensidade 1, 53,85% (7/13) para a 2 e 7,69% (1/13) para a 3, nenhum animal deste grupo apresentou o grau 4. Verificou-se para o segundo grupo, a mediana dos escores de intensidade das manifestações clínicas observadas foi de 2, variando de 1 a 3. Neste trabalho foi observada uma elevada ocorrência de C. felis em animais com manifestação clínica.

Foi avaliada a diversidade genética de nove marcadores moleculares, dos quais seis do tipo short tandem repeats - STR (BM4325, BMS3004, ILSTS002, IDVGA51, HEL5, AFZ1) e três do tipo single nucleotide polymorphisms - SNPs (LepSau3A1 A-B, LepSau3A1 1-2 e FSHRAlu1), ligados a genes envolvidos na reprodução e seus efeitos na performance reprodutiva. Foram examinadas amostras de sangue de 81 vacas sem raça definida, os animais foram classificados em dois grupos (vacas férteis e subférteis) baseado nas taxas de prenhez de duas estações reprodutivas. Alto nível de diversidade genética foi observado, revelando alto conteúdo de informação polimórfica, variando de 0,23 a 0,87 e heterozigosidade esperada de 27 a 89% com 62% em média. Os alelos mais frequentes foram BM4325 103*, BMS3004 129*, ILSTS002 137*, IDVGA51 177*, LEPSau3A1 A, LEPSau3A1 1, HEL5 149*, AFZ1 119* e FSHRAlu1 G. Os marcadores IDVGA51 e ILSTS002, ligados aos genes da leptina e LHβ, respectivamente, foram associados a performance reprodutiva. Esses dados suportam achados prévios que sugerem o potencial uso desses marcadores na seleção de animais com maior performance reprodutiva. | The aim of this study was to evaluate genetic diversity of nine molecular markers, six short tandem repeats - STRs (BM4325, BMS3004, ILSTS002, IDVGA51, HEL5, AFZ1) and three single nucleotide polymorphisms (SNPs; LepSau3A1 A-B, LepSau3A1 1-2, and FSHRAlu1), linked to genes involved in reproductive function and their possible effect on reproductive performance. For this purpose, 81 crossbred beef cows were used in this study. The animals were classified into two groups (fertile and sub-fertile cows) based on their pregnancy status after two breeding seasons. High genetic diversity level was observed highlighted by the polymorphic content information ranging 0.23 to 0.87 and expected heterozygosity from 27 to 89%, with an average of 62%. Alleles BM4325 103, BMS3004 129, ILSTS002 137, IDVGA51 177, LEPSau3A1 A, LEPSau3A1 1, HEL5 149, AFZ1 119 and FSHRAlu1 G presented high frequencies. Two STRs (IDVGA51 and ILSTS002), linked to Leptin and LHβ genes, respectively, were associated to reproductive performance. These data support previous findings suggesting the potential use of IDVGA51 and ILSTS002 STRs for reproductive performance selection.

Foram determinados os valores médios dos indicadores bioquímicos sanguíneos: glicose, ureia, creatinina, aspartato aminotransferase (AST), alanina aminotransferase (ALT), amilase e lipase de jiboias (Boa constrictor) e comparados os valores das concentrações encontradas entre os grupos de machos e fêmeas. Foram utilizados 12 espécimes de Boa constrictor, dos quais sete machos e cinco fêmeas. A comparação das médias dos indicadores bioquímicos entre os grupos de machos e fêmeas indicou ausência de influência significativa de fatores sexuais. As técnicas bioquímicas tradicionais foram adequadas para a determinação desses indicadores para esta espécie. | It was determined the average values of the following blood biochemical indicators of boas (Boa constrictor): glucose, urea, creatinine, aspartate aminotransferase (AST), alanine transaminase (ALT), amylase and lipase, and compared the results obtained concerning sex. A total of 12 Boa constrictor specimens were used, seven males and five females. The average of the biochemical indicators between males and females had no significant difference. The traditional biochemical techniques have been useful to determine these indicators to this species.

Leptospirosis is a waterborne disease and, therefore, stands out for the possibility of environmental contamination, the cross transmission between domestic and wild animals and humans. Opossum species are important reservoirs of this disease making them potential pathogen spreaders. Aiming to verify the presence of Leptospira spp. and the antibodies against Leptospira spp. in the Campus of São Paulo State University, in Jaboticabal, São Paulo, Brazil, freeliving wild life opossum (Didelphis albiventris) were captured for blood and urine sampling. Serological analysis was performed Microscopic Agglutination Test (MAT). Aliquots of urine were seeded in media Ellinghausen-McCullough- Johnson-Harris (EMJH) and Fletcher without antibiotics. The samples in which there was growth of leptospires were forwarded to the Leptospirosis Laboratory of the Institute of Pathobiology in the National Institute of Agricultural Technology, Buenos Aires, Argentina and were genotyped using Multiple Locus Variable number tandem repeat Analysis (MLVA). Of the 15 analyzed animals, nine (60.0%) were reactant to Patoc serovar. The pathogenic specie Leptospira borgpetersenii was isolated and identified in three Didelphis albiventris. The isolation findings of pathogenic specie Leptopsira borgpetersenii in the urine culture of three Didelphis albiventris in a university campus are a major discovery in the area of preventive veterinary medicine and public health and open a discussion about the important role of free-living wild animals as reservoirs of this agent to domestic animals and humans, a condition that serves as a warning for the improvement of health practices. | A leptospirose é uma zoonose de veiculação hídrica e, portanto, se destaca pela possibilidade de contaminação ambiental, o que facilita a transmissão cruzada entre animais domésticos, selvagens e humanos. Espécies de gambás são importantes reservatórios dessa enfermidade, tornando-os potenciais disseminadores do agente. Com o objetivo de verificar a presença de Leptospira spp. e de anticorpos contra Leptospira spp. no Campus da Universidade Estadual Paulista, em Jaboticabal, foram capturados gambás (Didelphis albiventris) de vida livre para a colheita de amostras de sangue e de urina. As análises sorológicas foram efetuadas pela técnica de Soroaglutinação Microscópica (SAM). Alíquotas de urina foram semeadas nos meios Ellinghausen-McCullough-Johnson-Harris (EMJH) e Fletcher sem antibióticos. As amostras que apresentaram crescimento de espiroquetas foram levadas ao Laboratório de Leptospirose do Instituto de Patobiologia, no Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria, Buenos Aires, Argentina e foram genotipadas com a técnica de Múltiplos Locus de Números Variáveis de Repetição em Tandem (MLVA). Dos 15 animais examinados pela SAM, nove (60,0%) foram reagentes à sorovariedade Patoc. Foi isolada e identificada a espécie patogênica Leptospira bosrpetersenii de três Didelphis albiventris. Os achados de isolamento da espécie patogênica Leptospira borgpetersenii na cultura de urina de três Didelphis albiventris são um grande descobrimento para as áreas da medicina veterinária preventiva e da saúde pública e reforçam a discussão sobre o importante papel dos animais selvagens de vida livre como reservatórios desse agente para animais domésticos e seres humanos, situação que serve de alerta para melhorias nas práticas sanitárias.

<em>Gracilinanus </em><em>microtarsus</em> is one of the smallest marsupials on earth. Since it spreads seeds, it has great ecological relevance. However, its reproduction data, especially those related to the anatomy of its reproduction apparatus, are scarce in the literature. Current analysis describes the male genital organs of six adult specimens of <em>G. microtarsus</em>. Macroscopic studies were undertaken on dissected organs, whereas histological studies were performed by inclusion technique in paraffin and by hematoxylin and eosin and Masson trichrome staining. The male genital organs of <em>G. microtarsus</em> consist of a penis with bifid glans, two testicles within a pendular scrotum, placed cranially to the penis, featuring a histology consisting of seminiferous tubules with spermatogonic cells, spermatozoa and Sertoli cells, and a peritubular region with Leydig cells. Testicles are closely associated with epididymis with head, body and tail, with histological differences between the different regions. Deferent ducts, spermatic funicles and annexed glands were reported. The latter were composed of prostate glands divided into three distinct segments and bulbourethral glands. Results show that the male reproduction system of <em>G. Microtarsus</em> is anatomically similar to that of <em>Didelphis sp. </em>and other marsupials groups, with slight details such as the site of each organ.

Foi avaliado o efeito da restrição alimentar na fase pré-púbere associada ao emprego do “flushing” no ciclo precedente ao da inseminação artificial, sendo realizada no 2° ou 3° estro, sobre o desempenho produtivo, numero de corpos lúteos e de fetos, além da taxa de sobrevivência fetal. Um total de 96 fêmeas foi distribuído em delineamento inteiramente casualizado com arranjo fatorial 2x2x2, sendo considerados os fatores: estratégia nutricional, alimentação ad libitum ou restrita; utilização ou não de “flushing” no ciclo precedente a IA, e momento da IA, realizada no 2° ou 3° estro, constituindo oito tratamentos. A idade em que as marras manifestaram o 1° estro não foi influenciada pela estratégia nutricional, mas o peso e o ganho de peso foram maiores (P < 0,05) na alimentação ad libitum. Não foram observados interação e tão pouco efeito de tratamento no numero de corpos lúteos e a taxa de sobrevivência dos fetos. O numero de fetos em fêmeas mantidas em alimentação ad libitum não foi influenciado pelo momento da IA, contudo as fêmeas em restrição alimentar apresentaram aumento (P < 0,05) no numero de fetos quando inseminadas no 3° estro. Desse modo, conclui-se que o emprego da estratégia nutricional ad libitum possibilita adiantar a inseminação para o 2° estro sem redução no numero de fetos, diminuindo os dias não produtivos da marra. Porem, essa estratégia reduz a taxa de sobrevivência fetal ate 35° dia de gestação. | The study evaluated the effect of dietary restriction in prepubertal gilts associated with the use of flushing in the preceding cycle of artificial insemination, 2nd or 3rd estrus on productive performance, number of corpora lutea and fetus, besides the fetus survival rate. A total of 96 gilts were distributed to a completely randomized design with 2x2x2 factorial arrangement of treatments, consisting of: nutritional strategy, ad libitum or restricted feeding, use or not of flushing in the preceding cycle AI, and time of AI, held on the 2nd or 3rd estrus. The age at which gilts expressed the 1st estrus was not influenced by nutritional strategy, but the body weight and weight gain were higher (P < 0.05) in gilts submitted to ad libitum feeding. No interactions were observed as treatment effect on number of corpora lutea and fetus survival rate. The number of fetuses in females on ad libitum feeding was not influenced by time of AI, but the females feed restriction showed an increase (P < 0.05) in the number of fetuses when inseminated on 3rd estrus. Thus, it is concluded that the use of ad libitum nutritional strategy allows for insemination forward 2nd estrus without reducing the number of fetuses, reducing the non-productive days gilt. However, this strategy reduces the rate of fetal survival until day 35 of gestation.