The causative agent of bovine tuberculosis (BTB) is Mycobacterium bovis, a bacteria belonging to M. tuberculosis complex (MTC). The definitive diagnosis is realized by isolation and identification of the M. bovis from clinical samples, using a combination of traditional culture and biochemical methods, which is considered the “gold standard”. This procedure is cumbersome and time-consuming. We evaluated a PCR assay for the direct detection of MTC DNA in naturally contaminated milk, using primers that were previously tested and proven reliable to target the IS6110 element. Milk previously seeded with M. bovis was used as the starting material, for padronization of the technique. The procedure involved extracting the DNA by enzymatic lysis (proteinase K and lysozyme), phenol, chloroform, isoamyl alcohol, followed by ethanol precipitation and PCR. The PCR assay allowed us to detect BTB in artificially contaminated milk, with a detection limit of 100 CFU/mL, and was also able to detect the bacillus in 50% (75/150) of samples from naturally infected animals. This procedure could be used to assist the in vivo diagnosis for BTB, complementing the sorological or microbiological tests and becomes an alternative option for implementation in epidemiological studies of BTB transmission and to prevent contaminated milk from entering the food supply.

Oito ovinos adultos da raça Santa Inês receberam dieta controle (C) (80 % de feno de coast-cross e 20 % de ração comercial) e em seguida foram submetidos a quadrado latino com dietas contendo 30% desse feno e 70% dos concentrados: polpa cítrica peletizada (PCP); polpa cítrica farelada (PCF); fubá de milho (FM) e farelo de trigo (FT). Após 21 d de adaptação às dietas foi realizada monitoração visual por 24 h. No dia subseqüente à observação, na 3ª hora após a alimentação foram coletadas amostras de conteúdo ruminal, urina e sangue. No conteúdo ruminal foram determinados o pH, nas amostras de urina foram feitas análises de pH, uréia, fósforo, creatinina e exame de sedimento, enquanto que no sangue foram feitas análises hemogasométricas, e determinações séricas de uréia, fósforo e creatinina e calculado o índice de excreção urinária [IEUP] e a taxa de excreção fracional [TEFP] do fósforo. Os dados foram avaliados por análise de variância e Teste Tukey ou Mann-Whitney. Tanto a PCP como a PCF estimularam significativamente a ruminação, semelhante ao grupo controle, e com maior tempo que o FM. Maiores concentrações de P sérico, IEUP e TEFP foram encontrados na dieta FT. Quanto maiores os teores de P sérico maior a excreção de P na urina (R2 = 0,61). Quanto maior o tempo devotado à ruminação menor foi o fósforo sanguíneo (R2 = 0,39; P < 0,001). A maior ruminação diminuiu os teores de P sérico e sua excreção urinária, diminuindo a predisposição à urolitíase em ovinos.

Objetivando estudar a relação do escore de condição corporal (ECC) com medidas de espessura de gordura e músculo em três raças distintas, foram utilizados 31 animais divididos conforme a raça, sendo 14 da raça Puro Sangue Inglês (PSI), oito machos e seis fêmeas, com idade média de 3,5 anos e peso médio de 462,70 kg; sete da raça Quarto de Milha (QM), dois machos e cinco fêmeas, com idade média de 2,5 anos e peso médio de 510,40 kg; e 10 da raça Puro Sangue Árabe (PSA), machos, com idade média de 3,5 anos e peso médio de 357,50 kg. Os animais foram avaliados através de ultrassonografia em três regiões paralelas à coluna vertebral, onde foram mensuradas: espessura da gordura lombar, espessura do músculo glúteo e espessura da gordura na base da cauda. Foram realizadas três mensurações ultrassonográficas a cada 30 dias (D0, D30 e D60), durante 60 dias. Os resultados indicaram comportamento diferente entre as raças, porém foi observada maior correlação do escore corporal com a espessura de gordura na base da cauda. A avaliação ultrassonográfica pode ser uma metodologia utilizada como ferramenta de avaliação de ECC de raças de cavalos de esporte.

Foi realizado o estudo retrospectivo das afecções do sistema locomotor de ruminantes atendidos no Serviço de Clínica de Bovinos e Pequenos Ruminantes da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo (FMVZ-USP), no período de 2000 a 2012. Nesse período, foram atendidos 209 casos de animais com problemas locomotores, dos quais 62,7% localizados na região distal dos membros e 37,3% na região proximal. Na espécie bovina, com 121 (57,9%) casos atendidos, o comprometimento da região distal dos membros foi observado em 86 (71,07%) e da região proximal em 35 (28,93%) dos casos, respectivamente. A afecção mais frequente observada em bovinos foi a hiperplasia interdigital com 26,74% (23) dos casos atendidos. Entre as afecções na região proximal, houve maior ocorrência de fraturas, com 48,6% (17) dos casos. Foram atendidos 88 (42,1%) pequenos ruminantes, apresentando lesões na região distal em 51,1% (45) dos casos e 48,9% (43) com lesões na região proximal. Nessas espécies, as lesões de maior ocorrência nas regiões distais e proximais foram, respectivamente, o foot-rot (60%) e as fraturas (77,4%). As afecções do sistema locomotor dos ruminantes foram pouco frequentes entre os animais atendidos no período estudado. Quanto ao prognóstico, foi bom nos animais acometidos com doenças podais, diferentemente das afecções proximais dos bovinos, principalmente fraturas, que apresentaram prognóstico mau. | This study aimed to perform a retrospective study of ruminants attended at the Clinic for Cattle and Small Ruminants (CBPR) of the Faculty of Veterinary Medicine (FMVZ), University of São Paulo (USP) with locomotor diseases from 2000 to 2012. During this period 209 cases were treated. It was found that cases located in the distal limb and in the proximal region were 62.7% and 33.7%, respectively. In bovines, 121 (57.9%) cases were treated, with 86 (71.07%) cases presented in the distal limb and 35 (28.93%) cases in the proximal region. The most common disease was interdigital hyperplasia with 23 (26.74%) cases treated. Fractures were the most frequent disease related to the proximal region corresponding to 17 (48.6%) occurrences. In small ruminants, 88 animals (42.1%) were treated with 45 (51.1%) cases in the distal region and the other 43 (48.9%) in the proximal region. In these species, the foot-rot (60%) and fractures (77.4%) was the most common diseases found in the distal and the proximal region, respectively. The disorders of the locomotor system of ruminants were uncommon in the CBPR. While the affected animals with claw diseases have a good prognosis, disorders affecting the upper limb in cattle, mainly fracture, have a poor prognosis.

O objetivo deste estudo foi determinar variações em parâmetros metabólicos e endócrinos de suínos machos durante o primeiro ano de vida e sua relação com a puberdade. Foram utilizados seis suínos acompanhados, de 22 a 360 dias de idade, com pesagens corporais e coletas de sangue a cada sete dias para avaliação dos níveis séricos de glicose, insulina, colesterol, albumina, ureia, cálcio, fósforo, aspartato aminotransferase (AST), gama glutariltransferase (GGT), ácidos graxos não esterificados (NEFA) e testosterona. A partir do ganho de peso e níveis de testosterona foram estabelecidos três períodos: pré-puberdade (1-5 meses de idade); puberdade (6-9 meses de idade); pós-puberdade (10-12 meses de idade), em que os níveis de testosterona foram de 0,6 ± 0,1 ng/mL, 1,8 ± 0,2 ng/mL e 1,8 ± 0,2 ng/mL, respectivamente (P < 0,0001). Foi observada correlação positiva entre a testosterona e níveis de albumina, idade e peso corporal, e correlação negativa entre testosterona e os níveis de cálcio, GGT e glicose. Os níveis de glicose diminuíram ao longo do desenvolvimento (P < 0,0001), e os níveis de NEFA foram maiores em pré-púberes (P = 0,01). A enzima GGT teve diminuição dos seus níveis a partir da puberdade (P < 0,0001), e a AST teve seus menores níveis na puberdade (P = 0,0003). A albumina apresentou maiores níveis durante a puberdade (P < 0,0001) e a ureia no período pós-puberdade (P < 0,0001). Os níveis de cálcio e fósforo apresentaram menores níveis no período pós-puberdade (P<0,0001). Assim, a puberdade representa um período de flutuação nos níveis de marcadores metabólicos de suínos machos híbridos, devido ao efeito da testosterona sobre o metabolismo energético, proteico e mineral. | The present study aimed to determine changes in endocrine and metabolic parameters in male pigs during the first year of life and its relation with the puberty. Six male pigs of 22 at 360 days of age were used in this study. Body weights and blood collection were performed every seven days for evaluation of serum glucose, insulin, cholesterol, albumin, urea, calcium, phosphorus, aspartate aminotransferase (AST), gamma glutamyltransferase (GGT), non-esterified fatty acids (NEFA) and testosterone. From the weight gain and testosterone levels were established three periods: prior to puberty (1-5 months old); puberty (6-9 months old); postpubertal (10-12 months old). During these periods testosterone levels were 0.6 ± 0.1 ng/mL, 1.8 ± 0.2 ng/mL and 1.8 ± 0.2 ng/mL, respectively (P < 0.0001). Positive correlation was observed between testosterone levels and albumin levels, age and body weight, and a negative correlation between testosterone levels and calcium, glucose and GGT. Glucose levels decreased throughout development (P < 0.0001) whereas NEFA levels were higher in pre-pubertal (P = 0.01). The enzyme GGT levels had decreased from puberty (P < 0.0001), and AST had their lowest levels at puberty (P = 0.0003). Albumin showed higher levels during puberty (P < 0.0001). The urea values were stable until puberty, and increased post-puberty (P < 0.0001). The levels of calcium and phosphorus levels had lower post-puberty (P < 0.0001). Thus, puberty is a period of fluctuation in the levels of metabolic markers of hybrid male pigs due to the effect of testosterone on energy, protein and mineral metabolism.

Condições ambientais adversas, tais como altas temperaturas e umidade relativa, causam aumento da temperatura corporal interna (hipertermia) de vacas lactantes, que resultam em estresse térmico e diminuição dos índices de gestação. A susceptibilidade embrionária à temperatura elevada já foi bem caracterizada tanto em experimentos in vivo quanto in vitro. A exposição de embriões bovinos em estágios de zigoto e duas células à temperatura elevada diminui o desenvolvimento embrionário até o estágio de blastocisto. No entanto, o embrião torna-se mais resistente aos efeitos deletérios da temperatura elevada à medida que progride no desenvolvimento. A redução na competência de desenvolvimento embrionária causada pelo estresse térmico deve-se, em parte, às inúmeras alterações citoplasmáticas e nucleares induzidas pela temperatura elevada. No citoplasma embrionário, o choque térmico aumenta o número de mitocôndrias edemaciadas, desorganiza os microtúbulos e os filamentos de actina. No compartimento nuclear, a temperatura elevada induz a fragmentação de DNA característica de apoptose. Essa forma de morte celular é um fenômeno regulado ao longo do desenvolvimento embrionário pré-implantacional, visto que altas temperaturas não ativam a cascata de apoptose em embriões de duas ou quatro células. A apoptose embrionária induzida pelo choque térmico em embriões ≥ 16 células pode ser considerada um mecanismo de controle de qualidade para remoção dos blastômeros danificados, já que o bloqueio da apoptose nestes embriões aumenta ainda mais a susceptibilidade ao choque térmico. Além disso, o estresse térmico também pode afetar o estado redox do embrião, levando a um consequente estresse oxidativo. | Adverse environmental conditions such as high temperature and humidity increase internal body temperature (hyperthermia) of lactating dairy cows resulting in heat stress and decreased pregnancy rates. Embryonic susceptibility to elevated temperature has been well characterized both in vivo and in vitro. Exposure of zygote and two cells stage bovine embryos to elevated temperature decreases embryonic development to the blastocyst stage. However, the bovine embryo becomes more resistant to the deleterious effects of heat stress as it proceeds in its development. The heat-induced reduction in embryonic developmental competence is due, at least in part, to the numerous cytoplasmic and nuclear changes induced by high temperature. In the embryo cytoplasm heat shock increases the number of swollen mitochondria, disrupts microtubules and microfilaments. In the nuclear compartment, elevate temperature induces DNA fragmentation characteristic of apoptosis. This form of cell death is a phenomenon regulated throughout the preimplantation embryonic development, since high temperatures do not trigger apoptosis in embryos of two or four cells. Heat-induced apoptosis in embryos ≥ 16 cells can be seen as a quality control mechanism for removing damaged blastomeres, since block apoptosis in these embryos increase its susceptibility to heat shock. Furthermore, heat stress can also affect the redox status of the embryo inducing a consequent oxidative stress.

A estimulação do estro por gonadotrofinas exógenas (GE) associada ao flushing alimentar é uma ferramenta importante na melhoria do desempenho reprodutivo de marrãs. Contudo, há evidência da associação do flushing com GE levando ao desequilíbrio no sistema endócrino que poderia levar ao aumento de cistos ovarianos. O objetivo deste estudo foi avaliar se o flushing ou GE pode afetar a taxa de ovulação e a incidência de cistos ovarianos. Setenta e uma marrãs foram distribuídas aleatoriamente em arranjo fatorial 2x2 com quatro tratamentos: flushing e hormônio (cFcH); sem flushing e com hormônio (sFcH); com flushing e sem hormônio (cFsH) e sem flushing e hormônio (sFsH). Marrãs foram abatidas para exame macroscópico e histopatológico dos ovários, aproximadamente cinco dias após IA. A caracterização desses cistos foi realizada por microscopia óptica: cistos foliculares (CF), cistos luteinizados (CL) ou corpos lúteos císticos (CCL). O número de ovulações não diferiu entre os tratamentos. Não houve interação entre os fatores em qualquer variável analisada. A frequência de leitoas com CCL e CL não foi afetada pelo flushing e GE. Não houve diferença na incidência de CF, com 12,5% e 5,88 % em leitoas dos tratamentos cFcH e sFcH, respectivamente. Não foram obtidas diferenças na proporção de CCL entre CF e CL (9,85 vs. 4,22 e 4,22%, respectivamente). Em conclusão, a utilização de gonadotrofinas exógenas para sincronização do segundo estro de marrãs, isoladamente ou em associação com o flushing, não aumenta a incidência de cistos ovarianos e não diminui a taxa de ovulação. | Estrus stimulation by exogenous gonadotropins (EG) in association with dietary flushing is an important tool for the improvement of gilt reproductive performance. However, there is evidence associating both flushing and EG with a disturbance in the endocrine balance that could lead to increased ovarian cysts. The aim of this study was to evaluate whether flushing or EG might affect the ovulation rate and the incidence of ovarian cysts. Seventy-one gilts were randomly distributed into 2x2 factorial design with four treatments: flushing and hormone (wFwH); no flushing and hormone (nFwH); flushing without hormone (wFnH); and neither flushing nor hormone (nFnH). Gilts were slaughtered for macroscopic and histopathological ovary examination approximately five days after AI. The characterization of these cysts was performed by optical microscopy in the following: follicular cysts (FC), luteinized cysts (LC) or cystic corpora lutea (CCL). The number of ovulations did not differ between treatments. There was no interaction between the factors in any analyzed variable. The frequency of gilts with CCL and LC was not affected by flushing and EG. No difference was found in the incidence of FC, with 12.5% and 5.88% in gilts from wFwH and nFwH treatments, respectively. There were no differences in the proportion of CCL between FC and LC (9.85 vs. 4.22 and 4.22%, respectively). In conclusion, the use of exogenous gonadotropins for second estrus synchronization in gilts, either alone or in association with dietary flushing, does not increase the incidence of ovarian cysts, nor does it decrease the ovulation rate.

Protaminas (PRM) são as principais proteínas ligantes do DNA espermático e podem compactar o núcleo do espermatozoide em menos de 5% do volume de uma célula somática. Já se sabe que o touro produz apenas a PRM1 em espermatozoide maduro, enquanto a maioria dos mamíferos também produz a PRM2. As proteínas nucleares de transição (Tnps) e as PRMs são fundamentais para a integridade do DNA. Já foi descrita a influência das protaminas na estrutura da cromatina e a associação destas com a fertilidade. Entretanto, os mecanismos moleculares que geram mudanças na cromatina espermática são desconhecidos. A expressão relativa da PRM1, PRM2, PRM3, Tnp1 e Tnp2 foi determinada para dez testículos de touros oriundos de matadouros comerciais, utilizando a técnica de RT-PCR em tempo real, com primers específicos para bovinos e a β-actina como controle endógeno. Ao quantificar a expressão relativa do RNAm, detectou-se alta expressão relativa da PRM1, em comparação aos outros genes. A expressão relativa da PRM3 foi a menor de todos os genes. Foram encontradas correlações positivas e significantes (p < 0,05) entre PRM1 e PRM2 (r = 0,518), PRM2 e Tnp1 (r = 0,750), PRM2 e Tnp2 (r = 0,706), PRM3 e Tnp1 (r = 0,542), PRM3 e Tnp2 (r = 0,731) e entre Tnp1 e Tnp2 (r = 0,820). Visto que a maioria dos conhecimentos sobre a PRM2 estão baseados em um trabalho de 1990 e, de acordo com recentes estudos se sabe que a PRM1 e a PRM2 são importantes para a fertilidade do touro, mais estudos são necessários para determinar a real função das protaminas em touros. | Protamines (PRM) are the major DNA-binding proteins in the sperm nucleus and can pack the DNA into less than 5% of the volume of a somatic cell nucleus. It is already known that bulls only have the PRM1 protein on mature spermatozoa while most mammals also have the PRM2. Transition nuclear proteins (Tnps) and PRMs are fundamental to DNA integrity. It has already been reported the influence of PRM on chromatin structures, generating low fertility. However, molecular mechanisms underlying these effects are not known. The relative expression of PRM1, PRM2, PRM3, Tnp1 and Tnp2 was determined by real time RT-PCR, using bovine specific primers and β-actin as endogenous control. Quantification of mRNA relative expression showed a higher expression of PRM1 compared to the other genes. The PRM3 mRNA had the lowest relative expression. A significant (p < 0.05) and positive correlation was found between PRM1 and PRM2 (r = 0.518), PRM2 and Tnp1 (r = 0.750), PRM2 and Tnp2 (r = 0.706), PRM3 and Tnp1 (r = 0.542), PRM3 and Tnp2 (r = 0.731) and between Tnp1 and Tnp2 (r = 0.820). Since most of the knowledge about protamine 2 in bovine is based on a work from 1990 and according to new studies we know that PRM1 and PRM2 are important to bull fertility, more research is needed to elucidate the real function of protamines on bovines.

<p class="western" lang="en-US">Objetivou-se criar pacote em ambiente R, denominado “easyanova”, a fim de disponibilizar funções para realizar análise de variância de tratamentos qualitativos, com várias opções de testes de contrastes de médias e análise de resíduos. O pacote dispõe das funções “ea1()”, “ea2()” e “ec()” e 19 conjuntos de dados. A função “ea1()” realiza análises em 13 delineamentos e também os testes de Kruskal-Wallis e Friedman. A função “ea2()” realiza análises em esquemas experimentais com interação (13 esquemas). A função “ec()” testa contrastes de grupos de médias. Os dados e exemplos disponíveis no pacote são voltados principalmente à experimentação animal. Entre delineamentos possíveis de serem analisados têm-se alguns muito utilizados na experimentação animal, como os quadrados latinos e parcelas subdivididas no tempo. As funções do pacote também são de fácil utilização e fazem ajustes necessários nos casos de experimentos desbalanceados. | The objective was to create a package in the R environment, called “easyanova” to provide functions for performing analysis of variance of qualitative treatments with several test options for mean contrasts and residual analysis. The package comprises the functions “ea1()”,”ea2()” and “ec ()” and 19 data sets. The “ea1()” performs analyses in 13 designs and also the tests of Kruskal-Wallis and Friedman. The “ea2()” function performs analyses in experimental schemes with interaction (13 schemes). The “ec()” function tests mean group contrasts. The data and examples available in the package are associated mainly with animal research. Some of the possible analyzable designs are widely used in animal experimentation, such as Latin squares and split plot in time. In addition, the functions of the package are easy to use and make the necessary adjustments in cases of unbalanced experiments.

Solar radiation is responsible for bull body temperature elevation. An alternative to minimize heat stress is to use artificial shade. Thus, this study aimed to evaluate the effect of thermal stress reduction, through shade availability, on reproductive characteristics of Nellore bulls (Bos indicus). For this, ten bulls were divided in: Available artificial shade (AS, n = 5) and Unavailable shade (US, n = 5). Each group was kept in two hectare paddocks, in which shade availability for group AS was artificially created. Animals were submitted to a clinical-reproductive evaluation and seminal analyses. No interaction was observed between treatments (AS and US) and time (8 collections) for all analyzed variables (P>0.05). No significant effect (P > 0.05) of treatment was observed for all parameters analyzed. So, it can be concluded that the absence of shaded areas during summer does not negatively affect reproductive characteristics such as: scrotal circumference, testicular consistency, progressive motility, percentage of rapidly moving cells (Computer Assisted Semen Analysis - CASA), morphology or sperm viability in Nellore bulls raised in southeastern Brazil, considering that results could be different in other regions of the country where average temperature is higher. | A radiação solar é responsável pelo aumento da temperatura corpórea em touros. Uma alternativa para minimizar o estresse térmico é usar sombreamento artificial. Assim, este estudo teve como objetivo avaliar o efeito da redução do estresse térmico através da disponibilização de sombra artificial, sobre características reprodutivas de touros da raça Nelore (Bos indicus). Para isso, dez touros foram divididos em: Disponibilidade de sombra artificial (AS, n = 5) e Não-disponibilidade de sombra artificial (US, n=5). Cada grupo foi mantido em piquete de dois hectares cada, no qual a sombra para o grupo AS foi criada artificialmente. Os animais foram submetidos a avaliações clínicas-reprodutivas e análise seminal. Nenhuma interação foi observada entre os tratamentos (AS e US) e o tempo (8 coletas), para todas as variáveis analisadas (P > 0.05). Nenhum efeito significativo (P>0.05) de tratamento foi observado para os parâmetros analisados. Dessa forma, concluiu-se que a ausência de áreas sombreadas, durante o verão, não afetou negativamente as características reprodutivas como: circunferência escrotal, consistência testicular, motilidade progressiva, percentagem de células com movimentos rápidos (Computer Assisted Semen Analisys - CASA), morfologia e viabilidade espermática em touros da raça Nelore criados na região sudeste do Brasil, considerando que esse resultado pode ser diferente em outras regiões do país, onde as temperaturas ambientais são mais elevadas.