Aiming to design a biologic model of acute intra-abdominal sepsis for experimental studies, conventional, isogenic rats F344 were infected with the bacteria Escherichia coli (E.coli), strain 11775, serotype H7:01:K1. Six hours after inoculation with E. coli, the animals - males and females - showed the following symptoms: piloerection, hyperpnea and decreased motor activity. The lethal dosis (LD50), was 6 x 10(5) CFU/ml, analyzed in 32 males and 32 females. The highest mortality rate was observed on the first 24 hours. Liver dysfunction, common in intra-abdominal sepsis, was evaluated at 0, 24, 48 and 168 hours after inoculation, by means of serum enzyme activities. Study of the migration of polymorphonuclear-neutrophil cells (PMN) and mononuclear-macrophage ones (MN) showed a significant increase of PMN in E. coli inoculated males (z >; 4.7; P; 6.2; P < 0.0003), when compared to control groups. As for MN cells, there were no differences between inoculated and control groups, in males (z = 2.3; P = 0.0107) and in females (z = 1.8; P = 0.0359) as well. In conclusion, these results show that inbred F344 rats are adequate biologic models for studies of acute, intra-abdominal sepsis. | Com o objetivo de estudar um modelo biológico de sepsis intra-abdominal aguda para estudos experimentais, foram infectados ratos isogênicos F344, convencionais, com a bactéria Escherichia coli (E.coli), cepa ATCC 11775, sorotipo H7:O1:K1. Os animais inoculados, machos e fêmeas, apresentaram 6 horas após a inoculação por E.coli os seguintes sintomas: arqueamento do dorso, piloereção, hiperpnéia e diminuição das atividades motoras. A dose que produziu 50% de mortalidade (DL50) após 7 dias, determinada pelo método Reed & Muench, foi de 6 x 10(5) CFU/ml (analisado em 32 machos e 32 fêmeas). A maior concentração de mortalidade foi observada nas primeiras 24 horas. A disfunção hepática, comum em sepsis intra-abdominal, foi avaliada por provas enzimáticas, em 0, 24, 48 e 168 horas após a inoculação. O estudo da migração de células polimorfonucleares-neutrófilos (PMN) e mononucleares-macrófagos (MN) apontou um aumento significante de PMN entre o grupos de machos (z ³ 4,7; p < 0,003) e de fêmeas (z ³ 6,2; p < 0,0003) inoculados E.coli, quando comparados ao grupos controles. Quanto às células MN, não houve diferença entre os grupos inoculados e os controles, tanto para os machos (z=2,3; p = 0,0107), como para as fêmeas (z=1,8; p =0,0359). Em conclusão, estes resultados demonstram que os ratos isogênicos F344 são modelos biológicos adequados para estudos de sepsis intra-abdominal aguda.

Two experiments were carried out to study the changes in the nematode faecal egg counts (EPG) in cows, during the periparturient period. In the first experiment, faeces from Holstein (dairy) and Zebu (beef) cows, were examined from the 6th week before birth up to the 6th week after birth. It was observed a significant difference (p<0,05) with a higher number of cows, from the Holstein group, with nematode eggs in faeces. In the dairy animals a significant rise in the EPG was observed at the moment of birth and on week four post parturition, when compared to pre parturition period. A negative association was found between the time of parturition and EPG, with the younger cows presenting higher EPG (p<0.05). Based on these results a second experiment was conducted to compare the EPG variations from the 4th week before birth up to the 10th week post parturition, in Holsteins cows, including primary and second gestation (group 1), and 3rd or more gestation (group 2). It was observed a significant difference with cows from the 1st and 2nd gestation showing higher EPG than group 2, at week 2, 3 and 4 after birth (p<0,05). The EPG from group 1 ranged from 0 to 1800, and from group 2 from 0 to 150 EPG. The results suggest that an anthelminthic treatment around the 2nd week before birth, in cows at the 1st and 2nd gestation, will decrease pasture contamination and nematode infection. | Dois experimentos foram conduzidos com o objetivo de se observar as alterações do número de ovos de nematódeos por grama de fezes (OPG) eliminados por vacas no período do peri-parto. No primeiro foram utilizadas vacas de raças européia (leiteiras) e zebuínas (de corte), da 6ª semana pré-parto à 6ª semana pós-parto. Observou-se diferença significativa (p<0,05) com maior número de animais leiteiros apresentando ovos de nematódeos nas fezes durante o peri-parto. Na categoria de animais leiteiros, houve um aumento significativo no OPG no momento do parto e na semana quatro pós-parto, em relação ao pré-parto. Também nesta categoria, observou-se uma associação negativa entre o número de partos e a positividade em relação ao OPG (p<0,05). Devido ao comportamento diferenciado dos animais leiteiros um segundo experimento foi feito para se comparar, nessa categoria animal, as alterações de OPG da quarta semana pré-parto à décima pós-parto, em vacas de primeira e segunda crias e três ou mais crias. Observou-se diferença significativa, com os animais de primeira e segunda crias apresentando maiores valores de OPG nas semanas dois, três e quatro pós-parto (p<0,05). Os valores de OPG para os animais de primeira e segunda crias foram de 0 - 1800, enquanto nos animais mais velhos a variação foi de 0 - 150 OPG. Os resultados de ambos os estudos sugerem que um esquema de controle contra nematódeos gastrintestinais deva ser implantado em vacas de primeira e segunda crias com o uso de anti-helmínticos no pré-parto, ao redor da segunda semana antes dos nascimentos.

The aim of the present study was to study some of the proteins that form the extracellular matrix of 54 benign and malignant mammary neoplasms in dogs, using histochemical methods: Picrosirius and polarization microscopy for collagenous fibers, Gordon -Sweats's method for reticular fibers and Weigert's fucsine-resorcine method for elastic fibers. A large variability in quantity, distribution and characteristics of the matrix components was observed in the different types of neoplasms. Collagen type I, III and elements of the elastic system had different distribution in benign and malignant neoplasms. The simple Picrossirius method and under polarization enabled visualization of collagen as thick fibers irregularly distributed in the stroma of carcinomas and in a more orderly and regular fashion in benign neoplasms. A smaller amount of thin fibers was observed in an irregular and random disposition in carcinomas and in a regular disposition in benign neoplasms . Under polarization, the fibers present different lengths, were yellowish or reddish and strongly birefringent, what suggested that they were collagen type I and in the middle of these fibers, other ones, pale, greenish and weakly birefringent, some of them thinner, possibly collagen type III were observed. In the stroma of carcinoma, fibers were mostly thick, strongly birefringent, yellowish or reddish, disposed in an irregular and random fashion, mainly in the central areas. In condrometaplasic areas, both in malignant and benign neoplasms, there was a collagen population composed by thin fibers in a parallel disposition, limiting narrow regions where condrocytes were aligned. Around this area, there was a collagen population formed by bundles of thick anastomosed fibers, irregularly disposed in carcinomas and orderly, in a parallel fashion in benign neoplasms. Under polarization demonstrated that this population, among condrocytes, was formed by weakly birefringent fibers, pale and yellowish, what suggested a collagen type II pattern. The use of reticular fibers staining by Gordon & Sweats, enabled a visualization of collagen as thin fibers disposed not only in the dense stromas but also in the loose ones. These fibers presented variable density, but were found mainly around acini and tubules. In relation to the presence elements of the elastic system in benign and malignant tumors, it may be observed that they predominate in the malignant ones, mainly in the pseudocapsule and around acini and tubules. Elements of the elastic system were not observed in the specimens when they were submitted to Weigert's staining without oxidation. When the same material was submitted to Weigert's staining with oxidation , oxytalan fibers were more evidently around acini and tubules, as well as in the pseudocapsule. Elements of the elastic system were in the ECM, both in samples submitted to staining with oxidation and without it and this was similar for benign and malignant tumors. Results of this study emphasize the profound structural changes in collagenous and fibrous components of the extracellular matrix elastic system of mammary neoplasms in dogs. | A finalidade do presente trabalho foi estudar algumas das proteínas fibrilares da matriz extracelular de 54 neoplasias mamárias benignas e malignas na espécie canina, utilizando métodos histoquímicos: Picrosirius associado à polarização para fibras colágenas , método de Gordon - Sweats para fibras reticulares e método de Weigert com e sem oxidação para fibras elásticas. Evidenciou-se na matriz uma grande variabilidade na quantidade, distribuição e características dos componentes matriciais presentes nos diferentes tipos de neoplasias. Detectou-se, assim, colágeno I, III e elementos do sistema elástico, distribuídos diferentemente nas neoplasias benignas e malignas. O método Picrosirius simples e associado à polarização permitiu a visualização do colágeno sob a forma de fibras espessas distribuídas irregularmente no estroma dos carcinomas e de modo mais ordenado e regular nas neoplasias benignas e, fibras mais finas, em menor quantidade, irregularmente e aleatoriamente dispostas nos carcinomas e regularmente nas neoplasias benigna. Sob luz polarizada os feixes de fibras colágenas , apresentaram diferentes comprimentos, avermelhados ou amarelados e fortemente birrefringentes, sugerindo serem colágeno tipo I e, entremeando as fibras, algumas mais finas ,pálidas, esverdeadas e fracamente birrefringentes, presumivelmente colágeno tipo III. Em áreas condrometaplásicas, tanto nos carcinomas como nas neoplasias benignas notou-se que os feixes colágenos apresentavam-se com fibras finas, paralelas, limitando regiões estreitas onde os condrócitos se aninhavam, e, rodeando esta área, feixes de fibras espessas, anastomosadas, dispostas irregularmente nos carcinomas e ordenadamente e paralelas nas neoplasias benignas. Sob luz polarizada, essa população entre condrócitos era formada por fibras pálidas e amareladas, sugerindo padrão tipo II e na faixa circundante, feixes fortemente birrefringentes, sugerindo o padrão do colágeno tipo I.. O uso do método - Gordon & Sweats, permitiu a visualização do colágeno sob a forma de fibras finas, dispostas tanto nos estromas densos como nos frouxos, com densidade variada mas, principalmente , margeando os ácinos e túbulos. Quanto à presença do sistema elástico em tumores benignos e malignos, verificou-se que há predomínio dessas fibras nos malignos, principalmente na pseudocápsula e ao redor de ácinos e túbulos. Elementos do sistema elástico não foram observados em espécimes submetidos à coloração de Weigert sem oxidação. Neste mesmo material, com oxidação, as fibras oxitalâmicas foram mais evidentes principalmente ao redor de ácinos, túbulos e pseudocápsula. Elementos do sistema elástico na (MEC) foram raros, tanto em amostras com e sem oxidação. Isto pode ser observado de maneira semelhante tanto em tumores benignos e malignos. Os resultados deste estudo enfatizam as profundas alterações estruturais dos componentes colagenosos e fibras do sistema elástico na matriz extracelular de neoplasias mamárias da espécie canina.

Twenty-five animals, Murrah, buffaloes fetus, with 5 to 9 months of age (15 females and 10 males) was analyzed by dissection after injected with latex substance. The fetuses were collected in a slaughterhouse and fixed in aqueous formol solution 10%. In the Caudal Vena Cava the following origin tributaries were observed: the common right and left iliac veins and collateral tributaries; the median sacral vein; frenic vein; 1-5 Lumbar veins; the circumflex deep veins of the right and left ileum; 3-4 hepatic veins; right genital vein (testicular or ovarian); adrenal vein and renal right and left veins. | Para o presente trabalho utilizou-se 25 animais, fetos de búfalos da Raça Murrah, com idades variando entre 5 e 9 meses, sendo 15 fêmeas e 10 machos, com vistas à dissecação e sistematização dos vasos em estudo. Os animais foram coletados em abatedouro e fixados em solução aquosa de formol 10%. Obtiveramse para a Veia Cava Caudal os seguintes afluentes de origem: as veias ilíacas comuns direita e esquerda, e seus afluentes colaterais; veia sacral mediana; veias frênicas; veias lombares (1-5); veias circunflexas profunda do ílio direita e esquerda; 3-4 veias hepáticas; veia genital direita (testicular ou ovárica); veias adrenais e veias renais direita e esquerda.

Preantral follicles from 41 Nelore breed cows were described quantitative and ultrastructurally in the study. In the average, 35,539.20 preantral follicles were mechanically isolated (Tissue Copper) per animal. Follicles were processed for transmission electron microscopy. Primordial follicles presented an oocyte surrounded by a flattened granulosa cell layer, with some granulosa cells showing cuboidal shape. Other development stages were classified as primary follicles, with a granulosa cell layer around the oocyte and secondary stages, with oocyte surrounded by two or more cuboidal granulosa cell layer. Primordial follicles showed an evident oocyte, with the nucleus located at an eccentric cytoplasm position and a well-defined nucleolus, with condensed chromatin areas. Organelles were centered at the peri-nuclear area, showing mostly round shaped mitochondria. Follicles under development showed an increasing number of organelles and elongated mitochondria. Adherence zones, coated pits and endocitose vesicles maintained the oocyte-granulosa cell interfaces. The zona pellucida (ZP) appeared in primary follicles, showed small microvilos and many vesicles, which permeated into the ZP. Secondary follicles presented clusters of cortical granules associated to Golgi complexes. In conclusion, the mechanical method provide a sufficient amount of preantral follicles from Nelore breed cows and, due to ultrastructural similarity with follicles from other breed, it is possible to use same protocols of culture, since the oocyte meiotic maturation is kept intact. | Folículos pré-antrais de 41 vacas da raça Nelore foram quantitativa e ultraestruturalmente descritos neste estudo. Uma média de 35.539,20 folículos pré-antrais foram isolados mecanicamente ("Tissue Chopper") por animal. Os folículos foram processados para microscopia eletrônica de transmissão. Os folículos primordiais apresentaram um oócito rodeado por uma camada de células granulosas (CGs) achatadas, com algumas tendendo à forma cuboidal. As demais fases de desenvolvimento foram classificadas como folículos primários, com uma camada de CGs cuboidais, e secundários, com mais de duas camadas de CGs cuboidais. Os folículos primordiais apresentaram oócito evidente, com núcleo excêntrico e nucléolo bem definido, cercado por regiões de cromatina condensada. As organelas ao redor do núcleo eram, predominantemente, mitocôndrias arredondadas. Folículos em desenvolvimento apresentavam organelas mais dispersas e numerosas, com mitocôndrias alongadas. As comunicações entre o oócito e as CGs mantinham-se por zonas de aderência, "coated pits" e vesículas de endocitose. A zona pelúcida (ZP) começava a aparecer em folículos primários, mostrando microvilos pequenos e vesículas penetrando na ZP. Os folículos secundários apresentavam aglomerados de grânulos corticais em associação a complexos de Golgi. Concluímos que o método mecânico de isolamento fornece quantidades suficientes de folículos pré-antrais de ovários de vacas da raça Nelore e, pela semelhança ultraestrutural com os folículos de outras raças, é possível a utilização dos mesmos protocolos de cultivo que vêm sendo estudados, desde que possibilitem a maturação meiótica dos oócitos.

Dairy cows exposition to an adequate environment may lead to a good result in the milk production, for permitting a better use of cooling equipment and reducing the thermal stress in the animals, as well as improving level of productivity. This research work evaluated the effect of environmental dry bulb and black globe temperatures in dairy cows lodged in a freestall building, separated in two groups: the most productive ones with milk yield above 29 kgday-1 and the less productive, with milk yield below 14 kg/day. Results showed the effect of the environmental variables and the temperature and humidity index in the decrease in milk yield. No high correlation was found between the index and the milk yield for both studied groups. | O resultado da exposição de vacas em produção em ambiente adequado, pode ter reflexo na produtividade leiteira, por permitir o uso correto de equipamentos reduzindo o estresse térmico nos animais, e consequentemente, melhorando a produtividade. No presente trabalho avaliou-se o efeito das temperaturas de bulbo seco e de globo negro, na produção de vacas leiteiras alojadas em sistema de freestall, utilizando-se dois grupos de vacas: mais produtivas, com produção acima de 29 kg/dia e menos produtivas, com produção média abaixo de 14 kgdia-1. Os resultados mostraram os efeitos das variáveis ambientais e do índice de temperatura e umidade regional, no declínio da produção de leite. Não houve correlação significativa entre os valores do índice e o declínio na produção de leite, para nenhum dos dois grupos estudados.

Twenty, 2-3-month-old worm free male Holstein calves, were assigned to two groups each containing ten animals. Each group was offered one of two diets: High (HP) and Low (LP) protein with 257 and 91 gkg-1 dry matter respectively, balanced for energy and minerals. After an initial period of 4 weeks on the diets, the calves from each group were subdivided into two groups of four and six calves. A trickle infection of 5,000 Haemonchus placei L3 was given twice a week for nine weeks to the sub group of six calves (I). The remaining four calves from each dietary group were used as non-infected control (C). Four weeks after the last infection, all calves were slaughtered and worm burdens counts. Carried out Biochemical determinations, faecal egg counts and body weights were carried out once a week. The HP group had significantly higher mean adult worm burdens (11,900 ± 7,660) when compared with BP (5,450 ± 7,895). Faecal egg counts were higher in the HP than LP group. Despite higher worm burdens, resilience was increased in the HP calves, with higher packed cell volume values as well as body weight when compared with the LP group. | Vinte bezerros com 2 a 3 meses de idade criados livres de vermes foram divididos em 2 grupos com 10 animais cada alimentados com alta proteína (HP) e baixa proteina (LP) com 257 e 91 g kg-1 de proteína na materia seca respectivamente, devidamente balanceado em energia e minerais. Após 4 semanas submetidos a estas duas dietas cada grupo original foi subdividido em 2 grupos, um contendo 4 animais não infectado (C) e 6 animais infectados (I). O grupo infectado recebeu 5.000 larvas de Haemonchus placei duas vezes por semana por um período de 9 semamas, após 4 semanas da última infecção todos os animais foram sacrificados e realizada a contagem de vermes. Semanalmente foram feitas as pesagens dos animais, número de ovos por grama de fezes e colheita de sangue para determinação do hematócrito, hemoglobina, albumina e proteína total. A contagem de ovos por grama de fezes foi superior no grupo de HP em relação ao grupo de LP, tendo em vista que o número de vermes adultos no grupo HP (11.900 ± 7.660) foi maior que o grupo de LP (5.450 ± 7.895) . Apesar do número superior de vermes encontrado no grupo HP, observou-se valores superiores de hematócrito e peso vivo quando comparado com o grupo de LP (p<0,05), demonstrado que a suplementação protéica possibilita uma melhor resilience em bezerros infectados com Haemonchus placei.

Dermatophytosis is a zoonosis in whose etiology the dermatophyte Microsporum canis is frequently involved. The fungus can be transmitted to man by dogs and cats. In the present study, guinea pigs were experimentally inoculated with M. canis and the course of the lesions was evaluated. Inoculation resulted in lesions in 100% of the animals, with a clinical course consisting of an incubation period, an inflammatory and a phase of lesion resolution. The histopathologic evaluation of the skin biopsies revealed the presence of acanthosis, hyperkeratosis, spongiosis and marked dermal edema. M. canis spores and hyphae were detected in histologic sections stained with periodic acid-Schiff. The combination of the fluorescent dyes FD and EB permitted the adequate visualization of viable and dead fungal cells in skin fragments of guinea pigs inoculated with M. canis and the identification of the morphologic characteristics of the cells. This experimental model represents a valuable instrument for the study of the pathogenesis of dermatophytic infection with respect to the evaluation of the efficacy of antifungal drugs, and may also be used for the study of the immunology of dermatophytoses and of dermatophyte morphogenes | Com frequência o dermatófito Microsporum canis está envolvido na etiologia da dermatofitose, podendo ser transmitido para o homem por cães e gatos. Neste estudo foi procedida inoculação experimental de M. canis em cobaias resultando em lesões em 100 % dos animais e o curso clínico consistiu de período de incubação, fase inflamatória e fase de resolução das lesões. O exame histopatológico de biópsias cutâneas revelou presença de infiltrado neutrofílico e edema; acantose, hiperqueratose e espongiose. Estas lesões tornaram-se menos acentuadas no 30.0 dia pós-inoculação. Esporos e hifas de M. canis foram detectadas em cortes histológicos corados com PAS (Ácido Periódico de Schiff). A combinação dos corantes fluorescentes diacetato de fluoresceína (DF) e brometo de etídio (BE), possibilitou uma adequada visualização das células fúngicas viáveis e não viáveis com evidenciação de seus caracteres morfológicos. Este modelo experimental representa um valioso instrumento para o estudo da patogênese da infecção por dermatófitos, para a avaliação da eficácia de drogas antifúngicas, podendo também ser utilizado em estudos sobre a imunologia das dermatofitoses e na determinação da morfogênese de dermatófitos.

Biocide action of Eucalyptus citriodora, Eucalyptus globulus and Eucalyptus staigeriana were studied against Boophilus microplus tick, aiming the production of an environmentally and ecologically conect and len harmpol acaricide. Essential oil emulsion of three Eucaliptus species were tested in five different concentrations against larvae and engorged female of B. microplus. Oils were submitted to gas chromatograph coupled to mass spectrometer (GC/MS) analysis looking for its composition. Citronelal is the major component of E. citriodora essential oil, being responsible for its acaricide action. The same happens with 1.8-cineole in E. globulus. In E. staigeriana, there are many substances involved in a synergic action against B. microplus. E. citriodora essential oil killed all ticks in an average concentration of 17.5% as compared to E. globulus with 15% and E. staigeriana with 12.5%. E. globulus concentrated emulsion killed all ticks in an average concentration of 9.9% and E. staigeriana in a concentration of 3.9%. Further steps will be pursued to make those essential oils to be tested under field conditions and available to the farmers, since bioacaricides has commercial appeal, allowing B. microplus control in a less aggressive way to the environment. | Realizou-se um estudo sobre a ação biocida de Eucalyptus citriodora, Eucalyptus globulus e Eucalyptus staigeriana no carrapato Boophilus microplus, buscando-se a produção de acaricidas menos agressivos ao meio ambiente. Os óleos essenciais das três espécies e os concentrados emulsionáveis de E. globulus e E. staigeriana foram testados em cinco concentrações diferentes contra larvas e fêmeas ingurgitadas de B. microplus. Os óleos foram submetidos à análise por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG/EM), a fim de se investigar sua composição. O citronelal é o principal componente do óleo de E. citriodora, sendo responsável por sua ação acaricida. O mesmo ocorre com o 1,8-cineol em E. globulus. Em E. staigeriana existem várias substâncias que agem sinergicamente contra B. microplus. O óleo essencial de E. citriodora matou 100% dos carrapatos a uma concentração média de 17,5%, o de E. globulus a 15% e o de E. staigeriana a 12,5%. Os concentrados emulsionáveis de E. globulus mataram 100% dos carrapatos a uma concentração média de 9,9% e o de E. staigeriana a uma concentração de 3,9%. O desenvolvimento de produtos que possam ser testados a campo e comercializados a preços competitivos serão passos a serem seguidos. Os biocarrapaticidas têm um apelo comercial grande, permitindo controlar B. microplus de um modo menos agressivo ao meio ambiente.

In this study, the influence of cytochalasin B on the survival and development after vitrification of oocytes and in vitro produced (IVP) bovine blastocysts was evaluated. In the Experiment I, 956 oocytes were matured for 22h and were immediately vitrified (Vitri treatment) or exposed for 15-20 minutes, to 7.5µg/ml (CB7.5Vitri treatment) or 45µg/ml (CB45Vitri treatment) cytochalasin B solutions, before vitrification. After 30 seconds of exposure to SV1 [400µl TCM-Hepes with 10% fetal serum (SF), 50µl ethylene glycol (EG) and 50µl DMSO], and 20 seconds to SV2 (300µl trehalose 1,0M + 20% SF, 100µl EG and 100µl DMSO) solutions, the oocytes were vitrified in Open Pulled Straws (OPS). The rewarming was performed at 37-38ºC in two steps of 5 minutes each, into 0.3 and 0.15M trehalose solutions, respectively. There was no difference (P>;0.05) in the cleavage and embryo rates between Vitri, Cito7.5Vitri and Cito45Vitri treatments, which were inferior to control group (P;0.05), which were lower than those observed in the Control group (P<0.05). The results show that, independently of dose studied (7.5 or 45mg/ml), cytochalasin B has not a beneficial effect to the vitrification of oocytes and IVP bovine blastocysts. | Foi avaliada a influência da citocalasina B na vitrificação de oócitos e embriões bovinos produzidos in vitro. No Experimento I, 956 oócitos foram maturados por 22h, sendo imediatamente vitrificados (tratamento Vitri) ou expostos por 15 a 20 minutos, à solução com 7,5µg/mL (tratamento CB7,5Vitri) ou 45µg/mL (tratamento CB45Vitri) de citocalasina B, antes da vitrificação. Após 30 segundos de exposição à SV1 [400µl TCM-Hepes com 10% soro fetal (SF), 50µl etilenoglicol (EG) e 50µl DMSO], e 20 segundos à SV2 (300µl trealose 1,0M + 20% SF, 100µl EG e 100µl DMSO), os oócitos foram vitrificados em palhetas estiradas (OPS). O reaquecimento foi realizado a 37-38ºC em duas etapas de 5 minutos cada, em trealose 0,3M e 0,15M. Não houve diferenças (P>;0,05) nos percentuais de clivagem e desenvolvimento embrionário entre os tratamentos Vitri, Cito7,5Vitri e Cito45Vitri, os quais foram inferiores (P;0,05) no percentual de re-expansão e eclosão entre os grupos Vitri e CB45Vitri, os quais foram inferiores (P<0,05) ao grupo controle. Os resultados indicam que, independentemente da dose utilizada, a exposição a citocalasina B não produz efeito benéfico na vitrificação de oócitos ou blastocistos bovinos produzidos in vitro.