Etude de gènes s'exprimant spécifiquement dans le pétale jeune de colza : application à la création de colza apétale

Francés. Sclerotinia sclerotiorum est un champignon pathogène qui infecte le colza (Brassica napus L.) en colonisant d'abord le pétale. L'ablation génétique du pétale par expression d'une molécule cytotoxique pourrait permettre de lutter contre ce champignon. Pour que la structure de la plante ne soit pas altérée, le gène codant pour cette molécule doit être placé sous le contrôle d'un promoteur spécifique du pétale. Aucun gène décrit dans la littérature n'est exprimé spécifiquement dans le pétale jeune entier. Par soustraction et hybridation différentielle, nous avons mis en évidence une famille de deux gènes, BNP4 et BNP8. Ces gènes sont exprimés fortement dans le pétale mais également plus faiblement dans les étamines. Une expérience d'hybridation in situ a montré que ces gènes étaient exprimés dans les couches épidermiques du pétale. Une analyse de leur région promotrice respective, par délétions et fusions à la séquence codante du gène rapporteur GUS, a permis de montrer que le fragment (− 299, + 24) du gène BNP4 confère une spécificité stricte dans le pétale chez 40% des transformants d'Arabidopsis thaliana obtenus. L'expression GUS est localisée principalement dans l'épiderme. Ces gènes codent une protéine membranaire putative de la membrane plasmique ou du reticulum endoplasmique. Une analyse phylogénique basée sur la séquence d'un fragment de la séquence codante des gènes de colza a montré une forte conservation de la séquence parmi les différentes Brassicacées étudiées. Le profil d'expression de ces gènes est également bien conservé parmi ces espèces. La molécule cytotoxique employée est la barnase. Des stratégies à double composantes par complémentation biochimique de deux peptides inactifs sont actuellement à l'étude dans la levure avant de le mettre en application chez les plantes.