Contraindre les protéines de capside de birnavirus à s'autoassembler en pseudoparticules

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Francés. L'expression des protéines de capside d'un virus non enveloppé aboutit généralement à leur auto-assemblage en pseudoparticules virales dont la géométrie est semblable à celle du virus. Les birnavirus constituent une exception à cette règle. Le virus de la bursite infectieuse aviaire (IBDV) appartient à cette famille de virus. Il est responsable de la maladie de Gumboro et infecte préférentiellement les lymphocytes B immatures de la bourse de Fabricius. Cela entraîne une forte immunodépression chez les jeunes poulets qui survivent à l'infection. Les virions non enveloppés présentent une capside de 60 nm de diamètre ayant une symétrie icosaèdrique T = 13. Ils sont constitués d'une protéine d'attachement VP2, d'une protéine fixant les deux segments d'ARN génomiques bicaténaires VP3 et de la polymérase virale VP1 qui est présente sous forme libre et associée au génome. Les protéines VP2 et VP3 sont générées à partir de la polyprotéine pVP2-VP4-VP3 par clivage effectué par la protéase VP4 [1].En utilisant le système baculovirus/cellules Sf9, nous avons confirmé [2] que l'expression de la polyprotéine pVP2-VP4-VP3 génère essentiellement des tubes rigides de 50-60 nm de diamètre composés de pVP2, précurseur de VP2 et non pas des pseudo-particules virales (figure 1, A). Nous avons cherché à comprendre ce défaut d'assemblage. pVP2 exprimée sans autre constituant viral s'auto-assemble en particules hétérogènes, montrant que cette protéine seule n'est pas suffisante à la définition de la géométrie du virus et des tubes rigides (figure 1, B). En revanche, des pseudo-particules virales sont obtenues quand une séquence exogène (celle de la green fluorescent protein [EGFP]) est fusionnée à l'extrémité carboxy-terminale de VP3 (figure 1, C). Les pseudo-particules virales sont similaires en forme et en taille au virus [3]. Des résultats semblables ont été obtenus lorsque d'autres séquences exogènes ont été substituées à l'EGFP. Dans ces conditions, la maturation de pVP2 générant VP2 et quatre peptides est réalisée. Nous avons montré que ces peptides ayant des tailles de 7 à 46 acides aminés sont associés aux pseudo-particules virales, mais aussi aux virions [4]. Nous concluons de ces expériences que l'assemblage correct de VP3 nécessaire à la génération des pseudo-particules peut être artificiellement induit par l'ajout d'une protéine exogène à la partie C-terminale de la polyprotéine et que la maturation finale de VP2 est contrôlée par le processus d'assemblage. Nos observations montrent qu'il est possible de générer différents types d'assemblage de protéines de capside virale d'un virus nu et elles montrent de fortes similitudes avec des résultats obtenus sur la protéine de capside du virus de l'immunodéficience humaine.