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Co-cultivo de zigotos e embriões de duas células de camundongos (Mus musculus domesticus) em suspensão de células epiteliais de ovidutos de camundongos e bovinos nos meios CZB sem glicose, TCM199 e Ménézo B2 Texto completo
1999
Liliam Mara Trerrisan Tavares | Mayra Elena Ortiz D'Avila Assumpção | Fernando Ferreira | Alecsandra Sobreira Lima | Marco Roberto Bourg Mello | José Antonio Visintin
Co-cultivo de zigotos e embriões de duas células de camundongos (Mus musculus domesticus) em suspensão de células epiteliais de ovidutos de camundongos e bovinos nos meios CZB sem glicose, TCM199 e Ménézo B2 Texto completo
1999
Liliam Mara Trerrisan Tavares | Mayra Elena Ortiz D'Avila Assumpção | Fernando Ferreira | Alecsandra Sobreira Lima | Marco Roberto Bourg Mello | José Antonio Visintin
Zigotos e embriões de 2 células de camundongos F1 (C57/DBA) foram cultivados (controle) e co-cultivados em suspensões de células epiteliais de ovidutos de camundongos (MOEC) e de bovinos (BOEC) até o estádio de blastocistos nos meios CZB, TCM199 e Ménézo B2. Os zigotos que atingiram os estádios de blastocistos expandido e eclodido no CZB foram 44 (38,26%) para o controle, 2 (1,89%) para as MOEC e 8 (6,72%) para as BOEC, sendo que o controle apresentou-se estatisticamente diferente (p<=0,05) em relação às MOEC e às BOEC. Os zigotos cultivados e co-cultivados nos meios TCM199 e B2 não clivaram além de 2 células. Os embriões de 2 células que desenvolveram até blastocistos no CZB foram 46 (43,80%) para o controle, 45 (38,79%) para as MOEC e 37 (29,60%) para as BOEC, sendo que o controle apresentou-se estatisticamente diferente (p<=0,05) em relação às BOEC. No TCM199, o total de blastocistos foi de 52 (48,15%) para o controle, 68 (39,08%) para as MOEC e 64 (48,49%) para as BOEC, não havendo diferença estatística (p>;0,05) entre os três grupos. No B2, o total de blastocistos foi de 28 (24,78%) para o controle, 34 (28,10%) para as MOEC e 25 (23,81%) para as BOEC, não havendo diferença estatística (p>;0,05) entre os três grupos. Concluiu-se que o bloqueio dos zigotos nos meios TCM199 e B2 pode estar relacionado à presença da glicose e que o oviduto não é espécie-específico quanto a sua capacidade em promover o desenvolvimento de embriões de camundongos.
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1999
TAVARES, Liliam Mara Trerrisan(USP Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Reprodução Animal) | ASSUMPÇÃO, Mayra Elena Ortiz DAvila(USP Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Reprodução Animal) | FERREIRA, Fernando(USP Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Medicina Veterinária Preventiva e Saúde Animal) | LIMA, Alecsandra Sobreira(USP Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Reprodução Animal) | MELLO, Marco Roberto Bourg(USP Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Reprodução Animal) | VISINTIN, José Antonio(USP Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Reprodução Animal)
Zigotos e embriões de 2 células de camundongos F1 (C57/DBA) foram cultivados (controle) e co-cultivados em suspensões de células epiteliais de ovidutos de camundongos (MOEC) e de bovinos (BOEC) até o estádio de blastocistos nos meios CZB, TCM199 e Ménézo B2. Os zigotos que atingiram os estádios de blastocistos expandido e eclodido no CZB foram 44 (38,26%) para o controle, 2 (1,89%) para as MOEC e 8 (6,72%) para as BOEC, sendo que o controle apresentou-se estatisticamente diferente (p<=0,05) em relação às MOEC e às BOEC. Os zigotos cultivados e co-cultivados nos meios TCM199 e B2 não clivaram além de 2 células. Os embriões de 2 células que desenvolveram até blastocistos no CZB foram 46 (43,80%) para o controle, 45 (38,79%) para as MOEC e 37 (29,60%) para as BOEC, sendo que o controle apresentou-se estatisticamente diferente (p<=0,05) em relação às BOEC. No TCM199, o total de blastocistos foi de 52 (48,15%) para o controle, 68 (39,08%) para as MOEC e 64 (48,49%) para as BOEC, não havendo diferença estatística (p>0,05) entre os três grupos. No B2, o total de blastocistos foi de 28 (24,78%) para o controle, 34 (28,10%) para as MOEC e 25 (23,81%) para as BOEC, não havendo diferença estatística (p>0,05) entre os três grupos. Concluiu-se que o bloqueio dos zigotos nos meios TCM199 e B2 pode estar relacionado à presença da glicose e que o oviduto não é espécie-específico quanto a sua capacidade em promover o desenvolvimento de embriões de camundongos. | Mouse embryos were cultured and co-cultured in mouse (MOEC) and bovine (BOEC) oviduct epithelial cells suspension. Embryos were co-cultured from one cell and two-cell stage to blastocyst stage. Cell culture (MOEC and BOEC) was made at a 100 µl drop under oil. Embryos were recovered 24-26 hours in the case of zygotes and 46-48 hours in the case of 2 cell embryos after hCG injection. Total embryos were randomly split into 3 groups: control (cultured), MOEC and BOEC (co-cultured) with CZB, TCM199 and B2 mediums. In CZB group, 44 zygotes (38.26%) from the control achieved blastocyst stage (expanded or hatched), being statistically different (p<=0.05) from MOEC (1.89%) and BOEC (6.72%). Co-culture with zygotes in TCM199 and B2 didnt pass 2 cell block. Two cell embryos cultured in CZB achieved blastocyst stage at a rate of 43.80% for the control, 38.79% for MOEC and 29.60% for BOEC group. Statistical difference (p<=0.05) appears from the control with BOEC groups. In TCM 199 medium, total of blastocyst were 48.15% for the control, 39.08% for MOEC and 48.49% for the BOEC groups, having no statistical difference among groups. This study allowed concluding that zygote block in TCM199 and B2 medium may be related to the presence of glucose. And that mouse embryos development is not species-specific.
Mostrar más [+] Menos [-]Viabilidade in vitro do espermatozóide canino congelado em diluidor tris-frutose-ácido cítrico com etileno glicol Texto completo
1999
Camila Infantosi Vannucchi | Silvia Edelweiss Crusco dos Santos | José Antonio Visintin
Viabilidade in vitro do espermatozóide canino congelado em diluidor tris-frutose-ácido cítrico com etileno glicol Texto completo
1999
Camila Infantosi Vannucchi | Silvia Edelweiss Crusco dos Santos | José Antonio Visintin
A utilização de sêmen congelado tornou-se extremamente comum na prática da inseminação artificial em cães, estimulando a pesquisa de métodos de congelação e diluidores. Neste estudo foram avaliadas as propriedades criopreservativas do etileno glicol na concentração final de 5%, utilizado em 3 diferentes protocolos de congelação. No Método I, uma parte de sêmen foi adicionada a duas partes de tris-frutose-ácido cítrico, contendo 7,5% de etileno glicol e congelado sem prévia refrigeração. No Método II, uma parte de sêmen foi adicionada a duas partes de tris-frutose-ácido cítrico contendo 7,5% de etileno glicol e resfrigerado até 5ºC por 1 hora antes da congelação. No Método III, uma parte de sêmen foi adicionada a uma parte de tris-frutose-ácido cítrico sem etileno glicol e refrigerado até 5ºC por 1 hora, sendo em seguida adicionada uma parte de tris-frutose-ácido cítrico, previamente refrigerado até 5ºC, contendo 15% de etileno glicol, mantido a 5ºC por mais 1 hora e congelado. Para a congelação em cada método, o sêmen foi envasado em palhetas plásticas de 0,5 ml, colocadas em vapor de nitrogênio a 5 cm da coluna líquida por 20 minutos, mergulhadas no nitrogênio líquido e armazenadas. Todas as amostras foram descongeladas em banho-maria a 37ºC durante 30 segundos e imediatamente avaliadas. O Método III não apresentou decréscimo significante da motilidade retilínea progressiva após a descongelação e apresentou os melhores resultados para o vigor espermático, comparando-se aos demais métodos. Entretanto, os 3 métodos não apresentaram diferença significativa com relação aos defeitos espermáticos pós-descongelação. Os tipos de defeitos mais freqüentemente encontrados foram cabeça solta normal, cauda dobrada, fortemente dobrada e fortemente enrolada. Foi possível concluir que o tempo de equilíbrio maior no diluidor tris-frutose-ácido cítrico seguido pela diluição em etileno glicol antes da congelação parece produzir para os espermatozóides de cães a melhor motilidade retilínea progressiva e vigor após a descongelação.
Mostrar más [+] Menos [-]In vitro viability of canine spermatozoa frozen in tris-fructose-citric acid extender with ethylene glycol Texto completo
1999
VANNUCCHI, Camila Infantosi(Universidade de São Paulo Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Reprodução Animal) | SANTOS, Silvia Edelweiss Crusco dos(Universidade de São Paulo Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Reprodução Animal) | VISINTIN, José Antonio(Universidade de São Paulo Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Reprodução Animal)
The use of frozen semen has become increasingly popular in canine artificial insemination, stimulating research to improve freezing methods and extenders. In this study, was compared the final concentration of 5% ethylene glycol used in 3 equilibration protocols. In Method I, one part of semen was added to two parts of tris-fructose-citric acid with 7.5% ethylene glycol (Extender 2) and frozen without cooling. In Method II, one part of semen was added to two parts of tris-fructose-citric acid with 7.5% ethylene glycol (Extender 2) and cooled at 5ºC for 1 hour before freezing. In Method III, one part of semen was added to one part of tris-fructose-citric without ethylene glycol (Extender 1) and cooled at 5ºC for 1 hour. Just after this period, one part of 5ºC cooled tris-fructose-citric acid containing 15% ethylene glycol (Extender 3) was added to the previous extended semen, maintained at 5ºC for one additional hour and frozen. For freezing in each procedure semen was packaged in 0.5 ml plastic straws and placed for 20 minutes in vapor 5 cm above liquid nitrogen and then lowered into the liquid nitrogen and stored. All samples were thawed by immersion for 30 sec in a 37ºC water bath and immediately evaluated. Progressive motility was best after Method III (63%), which was not different from fresh semen (94%) but was better (p< 0.05) than after Method II (25%) or Method I (6%). Forward velocity was again best after Method III (2.9) comparable to fresh semen (4.6) and Method II (2.5), but better (p< 0.05) than Method I (1.7). Morphological abnormalities were lowest after Method III, but were not significantly different from Methods II or I. Most common abnormalities were detached heads and bent, hairpin and coiled tails. It was concluded that slow, step-wise equilibration in tris-fructose-citrate extender followed by extender with ethylene glycol before freezing seems to produce the best progressive motility and forward velocity in frozen-thawed canine spermatozoa. | A utilização de sêmen congelado tornou-se extremamente comum na prática da inseminação artificial em cães, estimulando a pesquisa de métodos de congelação e diluidores. Neste estudo foram avaliadas as propriedades criopreservativas do etileno glicol na concentração final de 5%, utilizado em 3 diferentes protocolos de congelação. No Método I, uma parte de sêmen foi adicionada a duas partes de tris-frutose-ácido cítrico, contendo 7,5% de etileno glicol e congelado sem prévia refrigeração. No Método II, uma parte de sêmen foi adicionada a duas partes de tris-frutose-ácido cítrico contendo 7,5% de etileno glicol e resfrigerado até 5ºC por 1 hora antes da congelação. No Método III, uma parte de sêmen foi adicionada a uma parte de tris-frutose-ácido cítrico sem etileno glicol e refrigerado até 5ºC por 1 hora, sendo em seguida adicionada uma parte de tris-frutose-ácido cítrico, previamente refrigerado até 5ºC, contendo 15% de etileno glicol, mantido a 5ºC por mais 1 hora e congelado. Para a congelação em cada método, o sêmen foi envasado em palhetas plásticas de 0,5 ml, colocadas em vapor de nitrogênio a 5 cm da coluna líquida por 20 minutos, mergulhadas no nitrogênio líquido e armazenadas. Todas as amostras foram descongeladas em banho-maria a 37ºC durante 30 segundos e imediatamente avaliadas. O Método III não apresentou decréscimo significante da motilidade retilínea progressiva após a descongelação e apresentou os melhores resultados para o vigor espermático, comparando-se aos demais métodos. Entretanto, os 3 métodos não apresentaram diferença significativa com relação aos defeitos espermáticos pós-descongelação. Os tipos de defeitos mais freqüentemente encontrados foram cabeça solta normal, cauda dobrada, fortemente dobrada e fortemente enrolada. Foi possível concluir que o tempo de equilíbrio maior no diluidor tris-frutose-ácido cítrico seguido pela diluição em etileno glicol antes da congelação parece produzir para os espermatozóides de cães a melhor motilidade retilínea progressiva e vigor após a descongelação.
Mostrar más [+] Menos [-]Tumor de células da granulosa com metástases numa gata Texto completo
1999
Márcia Regina Giacóia | Paulo César Maiorka | Clair Motos Oliveira | Idércio Luiz Sinhorini | Maria Lúcia Zaidan Dagli
Tumor de células da granulosa com metástases numa gata Texto completo
1999
Márcia Regina Giacóia | Paulo César Maiorka | Clair Motos Oliveira | Idércio Luiz Sinhorini | Maria Lúcia Zaidan Dagli
As características clínicas, macroscópicas e microscópicas de um tumor de células da granulosa no ovário de uma gata de 2 anos de idade são descritas neste trabalho. Essa neoplasia é rara em gatos, principalmente devido à idade apresentada pelo animal. O diagnóstico foi feito clinicamente através de exame ultra-sonográfico. O tumor, uma massa cística na região do ovário esquerdo, metastatizou para o epíploo e para os pulmões. As células tumorais expressaram vimentina e arranjavam-se num padrão sarcomatoso e difuso, sustentado por fino estroma fibrovascular. A presença de sinais clínicos, como perda de pêlos e repetição de estros, é indicativa de síndrome paraneoplásica ortoendócrina, devido à excessiva estimulação estrogênica. A existência desse tipo de tumor deve ser considerada no diagnóstico diferencial de distúrbios comportamentais em gatas.
Mostrar más [+] Menos [-]Granulosa cell tumour with metastasis in a cat Texto completo
1999
GIACÓIA, Márcia Regina(Universidade de São Paulo Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Patologia) | MAIORKA, Paulo César(Universidade de São Paulo Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Patologia) | OLIVEIRA, Clair Motos(Universidade de São Paulo Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Reprodução Animal) | SINHORINI, Idércio Luiz(Universidade de São Paulo Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Patologia) | DAGLI, Maria Lúcia Zaidan(Universidade de São Paulo Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Patologia)
The clinical, gross and microscopical features of a granulosa cell tumour in the ovary of a 2-year-old cat are described. This is a rare tumour in cats, moreover because of the animal&#146;s age. It was diagnosed clinically by ultrasound examination. The tumour, a cystic mass in the region of the left ovary, metastasized to the epiplon and lungs. Tumour cells expressed vimentin and were arranged in a diffuse sarcomatous pattern, supported by a fine fibrovascular stroma. The presence of hair loss and repeated oestrus as clinical signs are indicative of orthoendocrine paraneoplastic syndrome, due to excessive oestrogen stimulation. This tumour should be considered in the differential diagnosis of behavioural disturbances in female cats. | As características clínicas, macroscópicas e microscópicas de um tumor de células da granulosa no ovário de uma gata de 2 anos de idade são descritas neste trabalho. Essa neoplasia é rara em gatos, principalmente devido à idade apresentada pelo animal. O diagnóstico foi feito clinicamente através de exame ultra-sonográfico. O tumor, uma massa cística na região do ovário esquerdo, metastatizou para o epíploo e para os pulmões. As células tumorais expressaram vimentina e arranjavam-se num padrão sarcomatoso e difuso, sustentado por fino estroma fibrovascular. A presença de sinais clínicos, como perda de pêlos e repetição de estros, é indicativa de síndrome paraneoplásica ortoendócrina, devido à excessiva estimulação estrogênica. A existência desse tipo de tumor deve ser considerada no diagnóstico diferencial de distúrbios comportamentais em gatas.
Mostrar más [+] Menos [-]Pré-diluição e congelação de sêmen suíno em água de coco in natura, após três diferentes pré-tratamentos de incubação Texto completo
1999
Edna Kotzias-Bandeira | Dagmar Waberski | Karl Fritz Weitzw | Márcia Brayner Paes Barreto
Pré-diluição e congelação de sêmen suíno em água de coco in natura, após três diferentes pré-tratamentos de incubação Texto completo
1999
Edna Kotzias-Bandeira | Dagmar Waberski | Karl Fritz Weitzw | Márcia Brayner Paes Barreto
Foram utilizados vinte e quatro ejaculados de cinco diferentes cachaços na congelação de sêmen suíno, sendo doze deles pré-diluídos em água de coco in natura e em Merck I, utilizando a lactose como diluidor de refrigeração e de congelação (experimento A) e doze pré-diluídos apenas com Merck I. Após três diferentes pré-tratamentos, a água de coco in natura foi utilizada como diluidor de refrigeração e de congelação, sendo a lactose utilizada como controle (experimento B). Seguiu-se a metodologia convencional de congelação de sêmen desta espécie -Tierärztliche Hochschule Hannover (grupo 1A-1B) e um novo processo com longo período de equilíbrio (grupos 2A-2B e 3A-3B). A qualidade do sêmen descongelado foi avaliada pela motilidade subjetiva (SMOT), motilidade computadorizada (CMOT) e morfologia das células com borda apical normal (NAR), após fixação em formol citrato. As porcentagens de espermatozóides com NAR foram 65% (grupo 1A), 71% (grupo 2A) e 75% (grupo 3A) para o sêmen pré-diluído em água de coco e 60% (grupo 1A), 68% (grupo 2A) e 68% (grupo 3A) para aquele pré-diluído com Merck I (experimento A); e 56% (grupo 1B), 68% (grupo 2B) e 73% (grupo 3B) para o sêmen congelado em água de coco e 60% (grupo 1B), 68% (grupo 2B e 3B) para o sêmen congelado em lactose (experimento B). Não havendo, portanto, diferença estatística entre os dois pré-diluentes e os dois diluentes de refrigeração e de congelação (p<0,05). Concluiu-se, portanto, que 1) os pré-tratamentos com longo período de equilíbrio têm melhor efeito na proteção do acrossoma do espermatozóide suíno e para manter a motilidade espermática e 2) a água de coco como pré-diluente e diluente para refrigeração e de congelação é semelhante ao Merck I (experimento A) e a lactose (experimento B), sendo portanto indicado para pré-diluir e congelar sêmen suíno.
Mostrar más [+] Menos [-]Pré-diluição e congelação de sêmen suíno em água de coco in natura, após três diferentes pré-tratamentos de incubação Texto completo
1999
KOTZIAS-BANDEIRA, Edna(Tierärztliche Hochschule Hannover Escola Superior de Medicina Veterinária de Hannover) | WABERSKI, Dagmar(Tierärztliche Hochschule Hannover Escola Superior de Medicina Veterinária de Hannover) | WEITZE, Karl Fritz(Tierärztliche Hochschule Hannover Escola Superior de Medicina Veterinária de Hannover) | BARRETO, Márcia Brayner Paes(Universidade Federal Rural de Pernambuco)
Foram utilizados vinte e quatro ejaculados de cinco diferentes cachaços na congelação de sêmen suíno, sendo doze deles pré-diluídos em água de coco in natura e em Merck I, utilizando a lactose como diluidor de refrigeração e de congelação (experimento A) e doze pré-diluídos apenas com Merck I. Após três diferentes pré-tratamentos, a água de coco in natura foi utilizada como diluidor de refrigeração e de congelação, sendo a lactose utilizada como controle (experimento B). Seguiu-se a metodologia convencional de congelação de sêmen desta espécie -Tierärztliche Hochschule Hannover (grupo 1A-1B) e um novo processo com longo período de equilíbrio (grupos 2A-2B e 3A-3B). A qualidade do sêmen descongelado foi avaliada pela motilidade subjetiva (SMOT), motilidade computadorizada (CMOT) e morfologia das células com borda apical normal (NAR), após fixação em formol citrato. As porcentagens de espermatozóides com NAR foram 65% (grupo 1A), 71% (grupo 2A) e 75% (grupo 3A) para o sêmen pré-diluído em água de coco e 60% (grupo 1A), 68% (grupo 2A) e 68% (grupo 3A) para aquele pré-diluído com Merck I (experimento A); e 56% (grupo 1B), 68% (grupo 2B) e 73% (grupo 3B) para o sêmen congelado em água de coco e 60% (grupo 1B), 68% (grupo 2B e 3B) para o sêmen congelado em lactose (experimento B). Não havendo, portanto, diferença estatística entre os dois pré-diluentes e os dois diluentes de refrigeração e de congelação (p<0,05). Concluiu-se, portanto, que 1) os pré-tratamentos com longo período de equilíbrio têm melhor efeito na proteção do acrossoma do espermatozóide suíno e para manter a motilidade espermática e 2) a água de coco como pré-diluente e diluente para refrigeração e de congelação é semelhante ao Merck I (experimento A) e a lactose (experimento B), sendo portanto indicado para pré-diluir e congelar sêmen suíno. | Twenty-four ejaculates were collected from five boars for the conventional freezing procedure at the Veterinary School of Hannover (group 1A-1B) and for an extended holding time procedure (group 2A-2B and 3A-3B). The semen were prediluted in two different diluents, coconut water in natura and Merck I medium before freezing (experiment A) and prediluted only with Merck I, but cooling and freezing with coconut water in natura or lactose (experiment B). The semen were arranged into three groups according to the different holding periods before freezing, group 1A-1B (sperm-rich phase, preserved for 4 hours by 15°C), group 2A-2B (sperm-rich phase, preserved for 16 hours by 18°C) and group 3A-3B (total semen, preserved for 16 hours by 18ºC). The quality of the thawed boar spermatozoa was evaluated by subjective motility (SMOT), computerassisted motility (Cell Motion Analyser, Strömberg-Mica - CMOT) and morphology of acrosomal ridges (NAR) after fixation in formol citrate. The acrosomal integrity (NAR) was 65% (group 1A), 71% (group 2A) and 75% (group 3A) for semen prediluted with coconut water and 60% (group 1A), 68% (group 2A) and 68% (group 3A) for semen prediluted with Merck I medium, respectively (experiment A); and 56% (group 1B), 68% (group 2B) and 73% (group 3B) for semen freezing with coconut water diluent, and 60% group 1B), 68% (group 2B and 3B) for semen freezing with lactose (experiment B). Thus, did not differ significantly (p<0.05) between both pre-diluents and both freezing diluents. However, the post thaw motility by both SMOT and CMOT and the acrosome integrity (NAR) were significantly higher (p<0.05) in the semen preserved for extended holding time (group 2A-2B and 3A-3B) than those for short time (group 1A-1B). It is concluded that the extended holding time has a better effect to protect acrosome of boar spermatozoa and also maintain sperm motility. Therefore, preserving boar semen for longer period before freezing is indicated for subsequent research on in vitro research with boar semen. And because the results using coconut prediluent and diluent were similar to that using Merck I medium (experiment A) and using lactose (experiment B), it is also indicated to use coconut for diluent and for freezing boar semen.
Mostrar más [+] Menos [-]Características reprodutivas de onças-pintadas (Panthera onca) machos, mantidos em cativeiro Texto completo
1999
Ronaldo Gonçalves Morato | Marcelo Alcindo Barros de Vaz Guimarães | Fernando Ferreira | Ieda Terezinha do Nascimento Verreschi | Renato Campanarut Barnabe
Características reprodutivas de onças-pintadas (Panthera onca) machos, mantidos em cativeiro Texto completo
1999
Ronaldo Gonçalves Morato | Marcelo Alcindo Barros de Vaz Guimarães | Fernando Ferreira | Ieda Terezinha do Nascimento Verreschi | Renato Campanarut Barnabe
Quatro onças pintadas (Panthera onca), machos, adultos, mantidos no Zoológico de São Paulo (SP-Brasil), foram submetidos a avaliação seminal, quantificação hormonal e biometria testicular a cada dois meses pelo período de um ano. As amostras de sêmen foram obtidas por eletroejaculação e analisadas quanto ao pH, volume total, motilidade (0-100%), vigor (0-5), espermatozóides totais e morfologia. Amostras de sangue foram obtidas pela punção da veia cefálica imediatamente antes da eletroejaculação e o plasma foi estocado a -20ºC até a realização do radioimunoensaio para quantificação de testosterona. Comprimento e largura dos testículos direito e esquerdo foram obtidos com auxílio de paquímetro e os valores obtidos foram combinados para a obtenção de volume testicular. As amostras de sêmen mostraram elevado índice de espermatozóides morfologicamente anormais (média = 51%), baixos índice de motilidade (50,6%) e vigor (2,2). Não foi encontrada correlação entre as características seminais, níveis plasmáticos de testosterona e volume testicular (Teste de Correlação de Spearman). Não foi detectado efeito da estação durante o ano para qualidade espermática, testosterona sérica e volume testicular (p>;0,05, Teste de Friedman). Os resultados sugerem que as onças pintadas mantidas em cativeiro não são sazonais e que a colheita e avaliação espermática podem ser realizadas em qualquer período do ano sem que haja perda na qualidade espermática. No entanto, as causas de elevado índice de espermatozóides morfologicamente anormais, encontrados neste estudo, devem ser investigadas.
Mostrar más [+] Menos [-]Reproductive characteristics of captive male jaguars (Panthera onca) Texto completo
1999
MORATO, Ronaldo Gonçalves(Universidade de São Paulo Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Reprodução Animal,Instituto Brasileiro de Meio Ambiente CENAP Pró-Carnívoros) | GUIMARÃES, Marcelo Alcindo Barros de Vaz(Universidade de São Paulo Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Reprodução Animal,Associação Fundação Parque Zoológico de São Paulo) | FERREIRA, Fernando(Universidade de São Paulo Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Medicina Veterinária Preventiva e Saúde Animal) | VERRESCHI, Ieda Terezinha do Nascimento(Universidade Federal de São Paulo Escola Paulista de Medicina Unidade Endócrina) | BARNABE, Renato Campanarut(Universidade de São Paulo Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Reprodução Animal)
Ejaculate traits, testicular volume and plasma testosterone levels were determined once every two months for one year in 4 adult male jaguars (Panthera onca) housed at the São Paulo Zoo, SP, Brazil. Semen samples was collected by electroejaculation and analyzed for pH, total volume, motility (0-100%), status (0-5), total spermatozoa count and morphology. Blood samples was obtained by cephalic venipuncture immediately before the onset of electroejaculation and stored at -20ºC until assay of testosterone by RIA. Using a calliper, the length and width of each testis was measured and the values were combined to determine the testicular volume. Semen analyses demonstrated a high percentage of structurally abnormal sperm (mean = 51%) and low rates of motility (50.6%) and status (2.2). No correlation was found between semen traits, plasma testosterone and testicular volume (Spearmans test). No season variation was detected throughout the year for semen traits, plasma testosterone and testicular volume (p>0.05, Friedmans test). The results of this study suggest that the captive jaguars in Brazil are not seasonal, and that semen collections can be performed throughout the year without a perturbation in overall ejaculate quality. However, underlying causes of high percentages of structurally abnormal sperm, found in captive jaguars, need to be investigated mainly to improve semen quality. | Quatro onças pintadas (Panthera onca), machos, adultos, mantidos no Zoológico de São Paulo (SP-Brasil), foram submetidos a avaliação seminal, quantificação hormonal e biometria testicular a cada dois meses pelo período de um ano. As amostras de sêmen foram obtidas por eletroejaculação e analisadas quanto ao pH, volume total, motilidade (0-100%), vigor (0-5), espermatozóides totais e morfologia. Amostras de sangue foram obtidas pela punção da veia cefálica imediatamente antes da eletroejaculação e o plasma foi estocado a -20ºC até a realização do radioimunoensaio para quantificação de testosterona. Comprimento e largura dos testículos direito e esquerdo foram obtidos com auxílio de paquímetro e os valores obtidos foram combinados para a obtenção de volume testicular. As amostras de sêmen mostraram elevado índice de espermatozóides morfologicamente anormais (média = 51%), baixos índice de motilidade (50,6%) e vigor (2,2). Não foi encontrada correlação entre as características seminais, níveis plasmáticos de testosterona e volume testicular (Teste de Correlação de Spearman). Não foi detectado efeito da estação durante o ano para qualidade espermática, testosterona sérica e volume testicular (p>0,05, Teste de Friedman). Os resultados sugerem que as onças pintadas mantidas em cativeiro não são sazonais e que a colheita e avaliação espermática podem ser realizadas em qualquer período do ano sem que haja perda na qualidade espermática. No entanto, as causas de elevado índice de espermatozóides morfologicamente anormais, encontrados neste estudo, devem ser investigadas.
Mostrar más [+] Menos [-]Estudo da ocorrência de salmonelas em ingredientes, rações e suabes de pó colhidos em uma fábrica industrial de ração Texto completo
1999
Ricardo Albuquerque | Nair Massako Katayama Ito | Claudio Issamu Miyaji
Estudo da ocorrência de salmonelas em ingredientes, rações e suabes de pó colhidos em uma fábrica industrial de ração Texto completo
1999
Ricardo Albuquerque | Nair Massako Katayama Ito | Claudio Issamu Miyaji
Durante um ano de colheita em uma fábrica comercial de ração, foram examinadas para a presença de Salmonella spp. 136 amostras de ingredientes de rações, 43 amostras de rações prontas e 110 amostras de suabes de pó. Apenas com o uso dos suabes é que não se conseguiu o isolamento. Entre os ingredientes examinados, encontrou-se salmonela em 19,85% das amostras, sendo que os subprodutos de origem animal foram mais fortemente contaminados, tendo propiciado 50% de percentual de isolamento; para os derivados lácteos, obtiveram-se 7,5%; e para outras matérias-primas, 12,5%. Foi obtido 4,65% de positividade para as rações examinadas.
Mostrar más [+] Menos [-]Estudo da ocorrência de salmonelas em ingredientes, rações e suabes de pó colhidos em uma fábrica industrial de ração Texto completo
1999
ALBUQUERQUE, Ricardo(USP Faculade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamneto de Nutrição e Produção Animal) | ITO, Nair Massako Katayama(Spave - Consultoria em Produção e Saúde Animal Ltda) | MIYAJI, Claudio Issamu(Spave - Consultoria em Produção e Saúde Animal Ltda)
Durante um ano de colheita em uma fábrica comercial de ração, foram examinadas para a presença de Salmonella spp. 136 amostras de ingredientes de rações, 43 amostras de rações prontas e 110 amostras de suabes de pó. Apenas com o uso dos suabes é que não se conseguiu o isolamento. Entre os ingredientes examinados, encontrou-se salmonela em 19,85% das amostras, sendo que os subprodutos de origem animal foram mais fortemente contaminados, tendo propiciado 50% de percentual de isolamento; para os derivados lácteos, obtiveram-se 7,5%; e para outras matérias-primas, 12,5%. Foi obtido 4,65% de positividade para as rações examinadas. | This research was carried out to detect salmonela in feedstuffs (136 samples), feeds (43) and dust swabs (110) from a feed mill. Salmonela was not detected in dust swabs samples. For feedstuffs, 19.85% were positive, with highest values observed from animal by-products (50%), dairy by-products (7.5%), 12.5% for other feedstuffs and 4.65% for complete feeds.
Mostrar más [+] Menos [-]Influência de diferentes diluentes e temperaturas de refrigeração sobre a qualidade de sêmen suíno Texto completo
1999
Edna Kotzias-Bandeira
Influência de diferentes diluentes e temperaturas de refrigeração sobre a qualidade de sêmen suíno Texto completo
1999
Edna Kotzias-Bandeira
Foram colhidos seis ejaculados de seis diferentes cachaços e diluídos com Androhep e Merck III, utilizando-se diferentes temperaturas de refrigeração. Após avaliação (aparência, volume, concentração, motilidade e morfologia), o ejaculado foi fracionado em porções de 100 ml (2 bilhões/ml) e diluído na proporção 1 + 1. As porções de sêmen foram resfriadas lenta (32ºC ;Þ; 20ºC ;Þ; 17ºC ;Þ; 5ºC) ou rapidamente (32ºC ;Þ; 5ºC) durante 2, 24 ou 48 horas. Após cada intervalo de refrigeração, 5 ml de sêmen foram incubados a +38ºC e avaliados quanto à aparência, volume, concentração, motilidade e morfologia4. A refrigeração das diferentes porções foi medida por um termômetro eletrônico (Therm Typ 2280-8, Fa. Minitüb - from -200,0 until + 600,0ºC) introduzindo-se o eletrodo no sêmen. A refrigeração lenta mostrou maior motilidade e NAR (p<0,05) do que a rápida. Não houve diferença significativa (p<0,05) entre os diluentes Androhep e BTS, mas o diluente Merck III teve influência inferior sobre a qualidade do sêmen de suíno.
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1999
KOTZIAS-BANDEIRA, Edna(Tierärztliche Hochschule Hannover)
Foram colhidos seis ejaculados de seis diferentes cachaços e diluídos com Androhep e Merck III, utilizando-se diferentes temperaturas de refrigeração. Após avaliação (aparência, volume, concentração, motilidade e morfologia), o ejaculado foi fracionado em porções de 100 ml (2 bilhões/ml) e diluído na proporção 1 + 1. As porções de sêmen foram resfriadas lenta (32ºC <FONT FACE="Symbol">Þ</FONT> 20ºC <FONT FACE="Symbol">Þ</FONT> 17ºC <FONT FACE="Symbol">Þ</FONT> 5ºC) ou rapidamente (32ºC <FONT FACE="Symbol">Þ</FONT> 5ºC) durante 2, 24 ou 48 horas. Após cada intervalo de refrigeração, 5 ml de sêmen foram incubados a +38ºC e avaliados quanto à aparência, volume, concentração, motilidade e morfologia4. A refrigeração das diferentes porções foi medida por um termômetro eletrônico (Therm Typ 2280-8, Fa. Minitüb - from -200,0 until + 600,0ºC) introduzindo-se o eletrodo no sêmen. A refrigeração lenta mostrou maior motilidade e NAR (p<0,05) do que a rápida. Não houve diferença significativa (p<0,05) entre os diluentes Androhep e BTS, mas o diluente Merck III teve influência inferior sobre a qualidade do sêmen de suíno. | Six ejaculates were collected from six different boars for dilution with Androhep, BTS and Merck III and cooling in different temperatures. After examination (appearance, volume, motility, concentration and morphology of acrosomal ridges [NAR]) the semen was in 100 ml fragmented (2 bi./ml) and dilutes (1+1). The fractions were slowly (32ºC <FONT FACE="Symbol">Þ</FONT> 20ºC <FONT FACE="Symbol">Þ</FONT> 17ºC <FONT FACE="Symbol">Þ</FONT> 5ºC) or rapidly (32ºC <FONT FACE="Symbol">Þ</FONT> 5ºC) cooling for 2, 24 or 48 hours. After this period 5 ml semen were for 30 min by 38ºC incubated and examined. The cooling of the different fractions was measured in the semen with an electronic thermometer (Therm Typ 2280-8, Fa. Minitüb - from -200,0 until +600.0ºC). The slow cooling showed a visible motility increase (p<0.05) and acrome integrity (NAR) than the rapid cooling. There was no significant difference (p<0.05) between Androhep and BTS dilute, but the Merck III dilute has a bad influence on the quality of boar semen.
Mostrar más [+] Menos [-]Influência da secreção prostática autóloga sobre a viabilidade de espermatozóides caninos no pós-descongelamento Texto completo
1999
Berenice de Ávila Rodrigues | Ana Valéria Doná | José Luiz Rodrigues
Influência da secreção prostática autóloga sobre a viabilidade de espermatozóides caninos no pós-descongelamento Texto completo
1999
Berenice de Ávila Rodrigues | Ana Valéria Doná | José Luiz Rodrigues
Investigou-se o efeito da secreção prostática autóloga na motilidade pós-descongelamento, na integridade de acrossomo e na adesão intercelular de espermatozóides criopreservados em diluidores com TRIS-gema de ovo e com TRIS-BSA. O experimento mostrou que a adição de secreção prostática promoveu um efeito benéfico sobre a manutenção da integridade dos acrossomos. Não foram observadas alterações com referência à motilidade e à exposição dos espermatozóides frente à secreção prostática, também não levou a uma redução significativa da adesão interespermática. No entanto, após 60 minutos de incubação a 37ºC, a presença da fração prostática parece ter favorecido a dissociação espermática dos ejaculados diluídos com TRIS-BSA 0,25% (60% das amostras). Ao final do período de observação, foram verificadas diferentes percentagens de sobrevivência espermática nas amostras diluídas com TRIS-gema de ovo (40% das amostras), com TRIS-BSA 0,25% (80% das amostras), com TRIS-BSA 0,50% (40% das amostras) e com TRIS-BSA 1,00% (50% das amostras).
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1999
RODRIGUES, Berenice de Ávila(Clínica Veterinária do Vale) | DONÁ, Ana Valéria | RODRIGUES, José Luiz(UFRGS Faculdade de Veterinária Laboratório de Biotécnicas de Reprodução)
Investigou-se o efeito da secreção prostática autóloga na motilidade pós-descongelamento, na integridade de acrossomo e na adesão intercelular de espermatozóides criopreservados em diluidores com TRIS-gema de ovo e com TRIS-BSA. O experimento mostrou que a adição de secreção prostática promoveu um efeito benéfico sobre a manutenção da integridade dos acrossomos. Não foram observadas alterações com referência à motilidade e à exposição dos espermatozóides frente à secreção prostática, também não levou a uma redução significativa da adesão interespermática. No entanto, após 60 minutos de incubação a 37ºC, a presença da fração prostática parece ter favorecido a dissociação espermática dos ejaculados diluídos com TRIS-BSA 0,25% (60% das amostras). Ao final do período de observação, foram verificadas diferentes percentagens de sobrevivência espermática nas amostras diluídas com TRIS-gema de ovo (40% das amostras), com TRIS-BSA 0,25% (80% das amostras), com TRIS-BSA 0,50% (40% das amostras) e com TRIS-BSA 1,00% (50% das amostras). | Effects of homologous prostatic secretion on post-thaw motility, membrane integrity and agglutination of cryopreserved canine spermatozoa diluted in TRIS-egg-yolk and in TRIS-BSA semen extenders were investigated. The study demonstrates that the addition of prostatic secretion resulted in beneficial effect on the acrosome integrity of the spermatozoa. There werent changes regarding sperm motility rate, and exposure of spermatozoa to prostatic secretion didnt lead to a significant reduction on sperm agglutination. However, after incubation for 60 minutes at 37ºC, the addition seemed showing better sperm dissociation in TRIS-BSA 0.25% (60% of the samples). At this time, sperm survival in extenders was observed at different rates: in TRIS-egg-yolk diluent (40% of the samples), in TRIS-BSA 0.25% diluent (80% of the samples), in TRIS-BSA 0.50% diluent (40% of the samples), and in TRIS-BSA 1.00% diluent (50% of the samples).
Mostrar más [+] Menos [-]Aspectos morfológicos e citoquímicos dos glóbulos sangüíneos de Caiman crocodilus yacare (Daudin, 1802) (Reptilia, Crocodilia) Texto completo
1999
Weber Leal de Moura | Eliana Reiko Matushima | Luiz Waldemar Oliveira | Mizue Imoto Egami
Aspectos morfológicos e citoquímicos dos glóbulos sangüíneos de Caiman crocodilus yacare (Daudin, 1802) (Reptilia, Crocodilia) Texto completo
1999
Weber Leal de Moura | Eliana Reiko Matushima | Luiz Waldemar Oliveira | Mizue Imoto Egami
Foram utilizados 10 jacarés Caiman crocodilus yacare, colhendo-se 5 ml do sangue periférico de cada animal. A análise morfológica foi realizada após coloração por Leishman. Para estudo citoquímico, empregaram-se os métodos do PAS, do Sudan black B, da o-toluidina e do azul de bromofenol. Foram identificados 7 tipos celulares: eritrócitos, trombócitos, heterófilos, eosinófilos, basófilos, linfócitos e monócitos azurófilos. Os eritrócitos nucleados apresentam formato elíptico com atividade mitótica e positividade citoplasmática para o azul de bromofenol. Os trombócitos são de formato elíptico, com citoplasma abundante nos pólos, contendo grânulos de glicogênio e núcleo com sulcos profundos. Heterófilos, grosseiramente esféricos, mostram núcleo esférico excêntrico e citoplasma repleto de grânulos corados em salmão, de formato fusiforme, em baqueta, oval ou esférico. A citoquímica nestas células revelou a presença de glicogênio, grânulos citoplasmáticos positivos para azul de bromofenol e parcialmente sudanófilos e positivos para mieloperoxidase. Eosinófilos mostram-se esféricos com núcleo lenticular excêntrico e citoplasma com grânulos esféricos ou ovais róseos positivos para Sudan e mieloperoxidase, porém fracamente para o azul de bromofenol. Basófilos apresentam formato esférico, de tamanho menor em relação aos demais granulócitos, núcleo esférico central e citoplasma com poucos grânulos fortemente basófilos. Linfócitos mostram-se polimórficos com núcleo de formato irregular, citoplasma escasso com projeções e grânulos azurófilos. Monócito azurófilo, de formato esférico, núcleo excêntrico e citoplasma basófilo contendo grânulos azurófilos abundantes.
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1999
MOURA, Weber Leal de(Universidade Federal de São Paulo Escola Paulista de Medicina Departamento de Morfologia) | MATUSHIMA, Eliana Reiko(Universidade de São Paulo Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Patologia) | OLIVEIRA, Luiz Waldemar(Universidade Federal de São Paulo Escola Paulista de Medicina Departamento de Morfologia) | EGAMI, Mizue Imoto(Universidade Federal de São Paulo Escola Paulista de Medicina Departamento de Morfologia)
Foram utilizados 10 jacarés Caiman crocodilus yacare, colhendo-se 5 ml do sangue periférico de cada animal. A análise morfológica foi realizada após coloração por Leishman. Para estudo citoquímico, empregaram-se os métodos do PAS, do Sudan black B, da o-toluidina e do azul de bromofenol. Foram identificados 7 tipos celulares: eritrócitos, trombócitos, heterófilos, eosinófilos, basófilos, linfócitos e monócitos azurófilos. Os eritrócitos nucleados apresentam formato elíptico com atividade mitótica e positividade citoplasmática para o azul de bromofenol. Os trombócitos são de formato elíptico, com citoplasma abundante nos pólos, contendo grânulos de glicogênio e núcleo com sulcos profundos. Heterófilos, grosseiramente esféricos, mostram núcleo esférico excêntrico e citoplasma repleto de grânulos corados em salmão, de formato fusiforme, em baqueta, oval ou esférico. A citoquímica nestas células revelou a presença de glicogênio, grânulos citoplasmáticos positivos para azul de bromofenol e parcialmente sudanófilos e positivos para mieloperoxidase. Eosinófilos mostram-se esféricos com núcleo lenticular excêntrico e citoplasma com grânulos esféricos ou ovais róseos positivos para Sudan e mieloperoxidase, porém fracamente para o azul de bromofenol. Basófilos apresentam formato esférico, de tamanho menor em relação aos demais granulócitos, núcleo esférico central e citoplasma com poucos grânulos fortemente basófilos. Linfócitos mostram-se polimórficos com núcleo de formato irregular, citoplasma escasso com projeções e grânulos azurófilos. Monócito azurófilo, de formato esférico, núcleo excêntrico e citoplasma basófilo contendo grânulos azurófilos abundantes. | Samples of peripheral blood were collected from 10 healthy Caiman crocodilus yacare and stained with Leishman, for morphological analysis, or submitted to the following cytochemical methods: PAS, Sudan black B, o-toluidine and mercury bromophenol blue. Seven types of cells were identified: erythrocytes, thrombocytes, heterophils, eosinophils, basophils, lymphocytes and azurofilic monocytes. Erythrocytes were elliptical and positive for bromophenol blue. Some mitotic figures were noted. Spindle-shaped thrombocytes showed large nucleus with striking indentation. The cytoplasm was attenuated at one or both poles into knob-like projections containing glycogen. Heterophils revealed round eccentric nuclei and cytoplasm containing glycogen and many polymorphic granules. These granules showed partial positive reaction for Sudan and activity for myeloperoxidase. Eosinophils showed eccentrically located lenticular-shaped nuclei and numerous round granules stained positive with myeloperoxidase and Sudan. Basophils revealed a round central nuclei and cytoplasm with few basophilic round granules. Lymphocytes appeared as polygonal or irregular cells with thin cytoplasm forming bleb-like protrusions. Azurophilic monocytes were round with eccentrically located nuclei and basophilic cytoplasm containing numerous azurophilic granules.
Mostrar más [+] Menos [-]Efeitos da administração de ração contendo leite de cabra alimentada com sementes de Crotalaria spectabilis a ratos em crescimento Texto completo
1999
Rosane Maria Trindade de Medeiros | Silvana Lima Górniak | José Luis Guerra
Efeitos da administração de ração contendo leite de cabra alimentada com sementes de Crotalaria spectabilis a ratos em crescimento Texto completo
1999
Rosane Maria Trindade de Medeiros | Silvana Lima Górniak | José Luis Guerra
Sementes de Crotalaria spectabilis, as quais contêm o alcalóide pirrolizidínico (AP), monocrotalina (MCT), foram moídas e administradas junto com a ração a uma cabra em lactação. O leite dessa cabra foi liofilizado e oferecido na ração por 8 semanas a ratos para determinar se a MCT ou seus metabólitos poderiam estar sendo significantemente eliminados no leite. Os ratos provenientes do grupo experimental apresentaram aumento significante (p<0,05) nos níveis séricos de ALT, AST, GGT e LDH e menor ganho de peso (p<0,05) que os ratos do grupo controle. As lesões mais significativas observadas nos animais que ingeriram a ração experimental foram pneumonia intersticial moderada e degeneração vacuolar e ocasionalmente necrose dos hepatócitos de região periportal. Os resultados deste estudo indicam que o AP e/ou seus metabólitos podem ser eliminados no leite.
Mostrar más [+] Menos [-]Effects of milk from goat fed Crotalaria spectabilis seeds on growing rats Texto completo
1999
MEDEIROS, Rosane Maria Trindade de(Universidade Federal da Paraíba Centro de Saúde e Tecnologia Rural Departamento de Clínicas Veterinárias) | GÓRNIAK, Silvana Lima(Universidade de São Paulo Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Centro de Pesquisa em Toxicologia Veterinária (CEPTOX)) | GUERRA, José Luis(Universidade de São Paulo Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Departamento de Patologia)
Seeds of Crotalaria spectabilis, containing the pyrrolizidine alkaloid (PA) monocrotaline (MCT), were fed to a lactating dairy goat. Milk from this goat was fed to rats for 8 weeks to determine whether MCT or its toxic metabolites are transferred into the goat&#146;s milk. Rats from the experimental group showed significantly higher (p<0.05) serum levels of ALT, AST, GGT and LDH and less weight gains (p<0.05) than control rats. The most significant lesions in rats consuming the experimental ration were mild to moderate interstitial pneumonia and a vacuolar degeneration and occasionally necrosis of periportal hepatocytes. The results of this study indicate that the PA and/or its metabolites are eliminated in milk. | Sementes de Crotalaria spectabilis, as quais contêm o alcalóide pirrolizidínico (AP), monocrotalina (MCT), foram moídas e administradas junto com a ração a uma cabra em lactação. O leite dessa cabra foi liofilizado e oferecido na ração por 8 semanas a ratos para determinar se a MCT ou seus metabólitos poderiam estar sendo significantemente eliminados no leite. Os ratos provenientes do grupo experimental apresentaram aumento significante (p<0,05) nos níveis séricos de ALT, AST, GGT e LDH e menor ganho de peso (p<0,05) que os ratos do grupo controle. As lesões mais significativas observadas nos animais que ingeriram a ração experimental foram pneumonia intersticial moderada e degeneração vacuolar e ocasionalmente necrose dos hepatócitos de região periportal. Os resultados deste estudo indicam que o AP e/ou seus metabólitos podem ser eliminados no leite.
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