OPTIMIZACIÓN DE LOS PARÁMETROS DE CRECIMIENTO DE Schizochytrium sp. PARA LA PRODUCCIÓN DE UN ANTÍGENO RECOMBINANTE

"Las microalgas heterótrofas han sido utilizadas en la producción de proteínas recombinantes debido a su facilidad de manipulación y la adaptabilidad de las técnicas de ingeniería genética. Las vacunas recombinantes son una opción para el tratamiento de enfermedades en animales, plantas y seres humanos. En este sentido, la microalga Schizochytrium sp. ha sido empleada en la expresión transitoria de antígenos recombinantes con el sistema Algevir. A nivel industrial, Schizochytrium sp. sólo es utilizada para la producción de PUFA, especialmente DHA, utilizando la deficiencia de nitrógeno en el medio de cultivo para generar un cambio metabólico que disminuye la producción de biomasa y mejora la acumulación de lípidos. Interesantemente, la suplementación con fuentes de amino nitrógeno, como el glutamato de sodio (GMS), reduce la producción de lípidos al eludir agotamiento del nitrógeno por sobrecompensación de nutrientes. Por esto, el objetivo de este trabajo fue el optimizar la producción de biomasa y de proteína total y recombinante en Schizochytrium sp. utilizando la sobrecompensación de nitrógeno con GMS y determinar el efecto de la suplementación durante la transformación transitoria con el sistema Algevir, para la expresión del antígeno recombinante ToxA. En este sentido, se diseñó el medio de cultivo ASWm y se evaluó el impacto del GMS en la producción de biomasa, proteína y lípidos, así como en las tasas de consumo de carbohidratos y nitrógeno, en cuatro niveles de suplementación en relación con la concentración de glucosa (Glu:GMS, 20:0, 20:10, 20:15, 20:20). El rendimiento máximo se obtuvo con la proporción de Glu:GMS 20:15, la biomasa total incrementó 1.65 veces a las 48 horas y 2.2 veces a las 72 horas respecto al tratamiento sin GMS, respectivamente. La concentración de proteína total fue de 22.09 g PT/g BS a las 48 horas y los lípidos totales disminuyeron 37% (p < 0.05) respecto al cultivo sin suplementación. Posteriormente, se utilizó la proporción Glu:GMS 20:15 durante la transformación con el sistema Algevir. En este caso, se logró detectar la presencia de ToxA en los extractos proteicos de Schizochytrium sp. Los rendimientos para ToxA recombinante a las 36 y 48 horas post-inducción fueron de 319.02 y 374.70 µg ToxA/g BS, respectivamente; siendo significativamente mayor (p < 0.05) con el medio ASWm respecto al YPD comercial..."