Preantral follicles from 41 Nelore breed cows were described quantitative and ultrastructurally in the study. In the average, 35,539.20 preantral follicles were mechanically isolated (Tissue Copper) per animal. Follicles were processed for transmission electron microscopy. Primordial follicles presented an oocyte surrounded by a flattened granulosa cell layer, with some granulosa cells showing cuboidal shape. Other development stages were classified as primary follicles, with a granulosa cell layer around the oocyte and secondary stages, with oocyte surrounded by two or more cuboidal granulosa cell layer. Primordial follicles showed an evident oocyte, with the nucleus located at an eccentric cytoplasm position and a well-defined nucleolus, with condensed chromatin areas. Organelles were centered at the peri-nuclear area, showing mostly round shaped mitochondria. Follicles under development showed an increasing number of organelles and elongated mitochondria. Adherence zones, coated pits and endocitose vesicles maintained the oocyte-granulosa cell interfaces. The zona pellucida (ZP) appeared in primary follicles, showed small microvilos and many vesicles, which permeated into the ZP. Secondary follicles presented clusters of cortical granules associated to Golgi complexes. In conclusion, the mechanical method provide a sufficient amount of preantral follicles from Nelore breed cows and, due to ultrastructural similarity with follicles from other breed, it is possible to use same protocols of culture, since the oocyte meiotic maturation is kept intact. | Folículos pré-antrais de 41 vacas da raça Nelore foram quantitativa e ultraestruturalmente descritos neste estudo. Uma média de 35.539,20 folículos pré-antrais foram isolados mecanicamente ("Tissue Chopper") por animal. Os folículos foram processados para microscopia eletrônica de transmissão. Os folículos primordiais apresentaram um oócito rodeado por uma camada de células granulosas (CGs) achatadas, com algumas tendendo à forma cuboidal. As demais fases de desenvolvimento foram classificadas como folículos primários, com uma camada de CGs cuboidais, e secundários, com mais de duas camadas de CGs cuboidais. Os folículos primordiais apresentaram oócito evidente, com núcleo excêntrico e nucléolo bem definido, cercado por regiões de cromatina condensada. As organelas ao redor do núcleo eram, predominantemente, mitocôndrias arredondadas. Folículos em desenvolvimento apresentavam organelas mais dispersas e numerosas, com mitocôndrias alongadas. As comunicações entre o oócito e as CGs mantinham-se por zonas de aderência, "coated pits" e vesículas de endocitose. A zona pelúcida (ZP) começava a aparecer em folículos primários, mostrando microvilos pequenos e vesículas penetrando na ZP. Os folículos secundários apresentavam aglomerados de grânulos corticais em associação a complexos de Golgi. Concluímos que o método mecânico de isolamento fornece quantidades suficientes de folículos pré-antrais de ovários de vacas da raça Nelore e, pela semelhança ultraestrutural com os folículos de outras raças, é possível a utilização dos mesmos protocolos de cultivo que vêm sendo estudados, desde que possibilitem a maturação meiótica dos oócitos.

Leptospirosis is a waterborne disease and, therefore, stands out for the possibility of environmental contamination, the cross transmission between domestic and wild animals and humans. Opossum species are important reservoirs of this disease making them potential pathogen spreaders. Aiming to verify the presence of Leptospira spp. and the antibodies against Leptospira spp. in the Campus of São Paulo State University, in Jaboticabal, São Paulo, Brazil, freeliving wild life opossum (Didelphis albiventris) were captured for blood and urine sampling. Serological analysis was performed Microscopic Agglutination Test (MAT). Aliquots of urine were seeded in media Ellinghausen-McCullough- Johnson-Harris (EMJH) and Fletcher without antibiotics. The samples in which there was growth of leptospires were forwarded to the Leptospirosis Laboratory of the Institute of Pathobiology in the National Institute of Agricultural Technology, Buenos Aires, Argentina and were genotyped using Multiple Locus Variable number tandem repeat Analysis (MLVA). Of the 15 analyzed animals, nine (60.0%) were reactant to Patoc serovar. The pathogenic specie Leptospira borgpetersenii was isolated and identified in three Didelphis albiventris. The isolation findings of pathogenic specie Leptopsira borgpetersenii in the urine culture of three Didelphis albiventris in a university campus are a major discovery in the area of preventive veterinary medicine and public health and open a discussion about the important role of free-living wild animals as reservoirs of this agent to domestic animals and humans, a condition that serves as a warning for the improvement of health practices. | A leptospirose é uma zoonose de veiculação hídrica e, portanto, se destaca pela possibilidade de contaminação ambiental, o que facilita a transmissão cruzada entre animais domésticos, selvagens e humanos. Espécies de gambás são importantes reservatórios dessa enfermidade, tornando-os potenciais disseminadores do agente. Com o objetivo de verificar a presença de Leptospira spp. e de anticorpos contra Leptospira spp. no Campus da Universidade Estadual Paulista, em Jaboticabal, foram capturados gambás (Didelphis albiventris) de vida livre para a colheita de amostras de sangue e de urina. As análises sorológicas foram efetuadas pela técnica de Soroaglutinação Microscópica (SAM). Alíquotas de urina foram semeadas nos meios Ellinghausen-McCullough-Johnson-Harris (EMJH) e Fletcher sem antibióticos. As amostras que apresentaram crescimento de espiroquetas foram levadas ao Laboratório de Leptospirose do Instituto de Patobiologia, no Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria, Buenos Aires, Argentina e foram genotipadas com a técnica de Múltiplos Locus de Números Variáveis de Repetição em Tandem (MLVA). Dos 15 animais examinados pela SAM, nove (60,0%) foram reagentes à sorovariedade Patoc. Foi isolada e identificada a espécie patogênica Leptospira bosrpetersenii de três Didelphis albiventris. Os achados de isolamento da espécie patogênica Leptospira borgpetersenii na cultura de urina de três Didelphis albiventris são um grande descobrimento para as áreas da medicina veterinária preventiva e da saúde pública e reforçam a discussão sobre o importante papel dos animais selvagens de vida livre como reservatórios desse agente para animais domésticos e seres humanos, situação que serve de alerta para melhorias nas práticas sanitárias.

In this research we analyzed the presence of Bovine viral diarrhea virus in young bovines. We performed a serological study and viral isolament in 220 bovines from different counties. The serum-neutralization assay detected 123 (56%) positive bovines to BVDV and showed that 82% of the samples had SNT up to 512 and 18 %, more than 512. It was collected the buffy coats from these bovines to performed the viral isolament in culture cells and the presence of the virus was confirmed in four healthy bovines and one calves with respiratory symptoms. The five viral isolaments are non-citophatic strains. | Nesta pesquisa analisamos a presença do vírus da Diarréia viral bovina em bovinos jovens através de um estudo sorológico e isolamento viral. A técnica de seroneutralização detectou de um total de 220 bovinos, 123 (56%) animais sorologicamente positivos. A distribuição dos títulos de anticorpos soroneutralizantes(TSN), mostrou que 82% das amostras apresentaram TSN de até 512, enquanto que 18% apresentaram TSN maiores que 512. O isolamento viral a partir da fração leucocitaria desses bovinos, confirmou a presença do vírus em quatro bovinos aparentemente saudáveis e de um bezerro com sintomatologia respiratória. Os cinco isolados virais não apresentaram efeito citopático nos cultivos celulares.

This article reports the genetic divergence of PCV2 after passages in VERO and SK-RST cell lines. Fisher's exact test indicated a trend for positive selection on the cap gene. These results allow insights on the development of PCV2 vaccines and the evolution of the genus Circovirus. | Este artigo relata a divergência genética de PCV2 após passagens em células das linhagens VERO e SK-RST. O teste exato de Fisher indicou tendência para seleção positiva no gene cap. Estes resultados permitem inferências relativas ao desenvolvimento de vacinas contra PCV2 e sobre a evolução do gênero Circovirus.

Rabies virus was isolated from a frugivorous bat, Artibeus lituratus, captured in downtown Rio Claro, SP, Brazil, in 1997. There was not any animal rabies since 1986, and this is the first isolation of rabies virus in a frugivorous bat in Rio Claro. Implications of Public Health were discussed. | O vírus rábico foi isolado de morcego frugívoro Artibeus lituratus, capturado no município de Rio Claro, SP, em bairro residencial, em 1997. Neste município, o último caso de raiva animal ocorreu em 1986, sendo este o primeiro relato do isolamento em morcego frugívoro. As implicações em Saúde Pública foram discutidas.