Hypocretin/orexin is produced exclusively in the dorsal and lateral hypothalamus but its projection is widespread within the brain and plays important roles. In this paper, we review the independent discoveries of the hypocretin/orexin peptides, the neuroanatomy of this system, and the link to the sleep disorder narcolepsy that has led to the idea that this system plays a crucial role in the regulation of sleep and wakefulness.

Ixodes persulcatus Schulze (I. persulcatus) is distributed in Russia and Far East Asia including Japan, and has been implicated as the vector of several human pathogens. In particular, I. persulcatus acts as the only tick vector for human lyme borreliosis in Japan. In order to elucidate the mechanism of transmission of I. persulcatus-borne pathogens, we developed a laboratory colony of I. persulcatus. Ticks were fed on Syrian hamster and engorged ticks that had dropped off the animals were collected and maintained to allow them to molt. Tick rearing was performed in incubator at 20degC with 95% relative humidity and 12-hour light/dark photo-period regimen. We found out that adult females fed for 8+-2 days and had a pre-oviposition period lasting for 7+-2 days. The minimum egg incubation period was 1 month with the hatched larvae feeding for 3+-1 days and molting to nymphs 3-4 months thereafter. Meanwhile, the nymphs fed for 4+-1 days and molted to adult 2-3 months thereafter. For future analysis of gene expression profiles in I. persulcatus, we cloned and sequenced the actin gene (a housekeeping gene), and found that it is 92.7% to 98.6% homologous to the published sequences of related ixodid ticks. This laboratory colony of I. persulcatus will facilitate investigations on the role of tick-derived molecules on the transmission of I. persulcatus-borne pathogens and will be important for identification of potential anti-tick vaccine and acaricide target molecules.

alpha-Hemoglobin stabilizing protein (AHSP) functions as the erythroid-specific molecular chaperon for alpha-globin. AHSP gene expression has been reported to be downregulated in hematopoietic tissues of animals suffering from prion diseases though the mechanism remains to be clarified. Herein, we demonstrate that MELhipod8 cells, a subclone of murine erythroleukemia (MEL) cells, have prion protein (PrPsup(C)) on the cell surface and have highly inducible expression of the AHSP and alpha- and beta-globin genes, resembling the expression pattern of the PrP and AHSP genes in bipotential erythroid- and megakaryocyte-lineage cells followed by erythroid differentiation in normal erythropoiesis. Moreover, MELhipod8 cells exhibit greater effective erythroid differentiation with a population of hemoglobinized normoblast-like cells than that observed for the parental MEL cells. These findings suggest that MELhipod8 cells could provide a mechanism for downregulation of the AHSP gene in prion diseases.

With the aim to evaluate the risk of citrus pulp to induce acute rumen lactic acidosis (ARLA), 15 rumen cannulated cattle didn't adapted to concentrates were randomly allocated in 3 groups: G1- CONTROL - group fed only the basal diet; G2 - SUCROSE animals with ARLA induced by rumen administration of sucrose; G3 CITRUS PULP animals received citrus pulp into rumen (1.65% of BW). Blood and rumen samples were drawn throughout the next 24 h to determine pH, lactic acid concentration and the packet cell volume, blood base excess. Clinical signs were also recorded and food intake followed by the next 7 days. Sucrose caused a systemic and ruminal acidosis and characteristic ARLA signs such as, apathy, dehydration, diarrhea and tachycardia, while citrus pulp gave rise to mild and brief rumen acidosis, reaching the lowest pH (5.35) at the 6th h, without any changing in the blood pH and any typical clinical sign, but temporary reduction in the rumination and excretion of semi liquid feces. Appetite was fully recovered after two and seven days in the pulp and sucrose group, respectively. These results showed that citrus pulp may be used as a feedstuff for cattle with low risk to cause ARLA. | Com o objetivo de avaliar o potencial da polpa cítrica (PC) em provocar acidose láctica ruminal aguda (ALRA), 15 bovinos com peso médio de 160 kg providos de cânula ruminal não-adaptados à dieta contendo concentrado foram alocados aleatoriamente em três grupos: CONTROLE animais receberam apenas a dieta basal; SACAROSE animais receberam sacarose diretamente no rumem a fim de provocar ALRA; POLPA - grupo que recebeu subitamente alta quantidade de PC no rúmen (equivalente a 1,65% do peso corporal). Em vários tempos no decorrer de 24 horas, após administração dos substratos, foram determinados o volume globular, pH, excesso de bases (BE) e lactato total no sangue e pH e concentração de ácido láctico total no conteúdo ruminal. Exame clínico foi realizado no decorrer do 1º dia e o consumo de alimento acompanhado nos próximos sete dias. A administração de sacarose provocou um característico quadro de ALRA com o desenvolvimento de acidose ruminal e sistêmica, apatia, desidratação, diarréia e taquicardia. Por outro lado, a polpa cítrica produziu discreta e temporária acidose ruminal, atingindo na 6ª hora o pH ruminal mais baixo (5,35), sem provocar acidose sistêmica e quadro clínico mais evidente de ALRA, com exceção de uma diminuição temporária na ruminação e eliminação de fezes semilíquidas. A regularização do apetite ocorreu após dois dias no grupo com PC e sete dias no grupo com sacarose. Tais resultados indicam que a polpa cítrica pode ser utilizada na alimentação de bovinos com baixo risco de provocar ALRA.

The monitoration of the consumption of different minerals mixtures was evaluated in 84 crossbred buffaloes distributed in two farms (1 and 2) located in Meso-area of Paraense's Northeast for the evaluation of the cost benefit of each product. The farms presented pastures of the type Brachiaria brizantha, cv. Marandú where the animals were maintained for 14 months. The animals were divided in two lots. The lot 1 of each farm received a commercial product of mineral supplementation recommended for buffalos (Topbúfalo Matsuda®) and the lot 2, the commercial product of conventional mineral supplementation of the property, in which was indicated for the bovine species. In Finance 1, the consumption of the mineral mixture to be tested was inferior to the consumption of the conventional mineral mixture and in Finance 2, the consumption of both lots was similar. The commercial product recommended for buffalos in pasture regime, in both systems, it promoted a better acting in the earnings of weight of the buffalos when compared to commercial products recommended for the bovine species. The medium weight of the hot carcass of the animals that consumed the mineral mixture to be tested was superior the one of the animals that received the conventional mineral mixture. The expense with the mineral supplementation was superior with the conventional products in both farms, with smaller net yields than the supplementation to be tested. Was ended that the productive efficiency of the animals using a recommended supplementation for buffalos in pasture regime overcomes the productive efficiency of buffalos when a supplementation is used recommended for bovine. | O monitoramento do consumo de diferentes misturas minerais foi avaliado em 84 búfalos mestiços distribuídos em duas fazendas (1 e 2) localizadas na Meso-região do Nordeste Paraense para a avaliação do custo benefício de cada produto. As fazendas apresentavam pastagens do tipo Brachiaria brizantha, cv. Marandú onde os animais foram mantidos durante 14 meses. Os animais foram divididos em dois lotes. O lote 1 de cada fazenda recebeu um produto comercial de suplementação mineral recomendado para bubalinos (Topbúfalo Matsuda®) e o lote 2, o produto comercial de suplementação mineral convencional da propriedade, no qual era indicado para a espécie bovina. Na fazenda 1, o consumo da mistura mineral a ser testada foi inferior ao consumo da mistura mineral convencional e na fazenda 2, o consumo de ambos os lotes foi semelhante. O produto comercial recomendado para búfalos em regime de pastagem, em ambos os sistemas, promoveu um melhor desempenho no ganho de peso dos búfalos quando comparado a produtos comerciais recomendados para a espécie bovina. O peso médio da carcaça quente dos animais que consumiram a mistura mineral a ser testada foi superior a dos animais que receberam a mistura mineral convencional. O gasto com a suplementação mineral foi superior com os produtos convencionais em ambas as fazendas, com rendimentos líquidos menores do que a suplementação a ser testada. Conclui-se que a eficiência produtiva dos animais utilizando uma suplementação recomendada para bubalinos em regime de pastagem supera a eficiência produtiva de búfalos quando se utiliza uma suplementação recomendada para bovinos.

This present research work has allowed a statistical modeling for conidial adhesion and the potential fungus Metarhizium anisopliae ability to lesser the mealworm Alphitobius diaperinus control, that is an important pest of poultry production, which causes damage to the birds by the development of injuries in the digestion tract, and yet it serves as vector of many avian pathogens. The study of the host cuticle adhesion is very important, whereas the adhesion process represents a complex event, as it is the first occurrence in the pathogen-host cycle, taking place after fungus deposition on the insect, aiming the penetration phase. Adult insects of A. diaperinus were exposed to three concentrations of the fungus: 1x10³, 1x10(6) e 1x10(9) conidia/mL, for 5, 10 and 15 minutes of exposition to each conidial concentration. In order to verify the ability control of M. anisopliae, the insects were forced to the displacement on the conidial mass growth onto PDA medium for 10 minutes, resulting in a 8,1x10(8) conidia/mL inocullum potential, and the mortality was monitored during 21 days, obtaining 74% of mortality in larvae after 48h and 50% of mortality in adults after 15 days, under fungus exposition. ANOVA has showed that there is influence and interaction between both effects: concentration and time. | Este trabalho permitiu a construção de um modelo estatístico para a adesão de conídios do fungo Metarhizium anisopliae diante de diferentes níveis de concentração e tempo, além de avaliar seu potencial para o controle do cascudinho (Alphitobius diaperinus), importante praga da avicultura, causadora de danos às aves pelos ferimentos no trato digestivo e pela transmissão de várias doenças. O estudo da adesão sobre o tegumento é de grande importância, pois a adesão representa um evento complexo, sendo o primeiro do ciclo das relações patógeno-hospedeiro que ocorre após a deposição do fungo sobre o inseto e visa a preparação do local para a fase de penetração. Insetos adultos do cascudinho foram expostos a três concentrações do fungo: 1x10³, 1x10(6) e 1x10(9) conídios/mL, sendo 5, 10 e 15 minutos de exposição em cada concentração. Para verificar o potencial de controle de M. anisopliae, os insetos foram colocados para caminhar sobre uma massa de conídios crescida em meio BDA por 10 minutos, resultando num potencial de inóculo de 8,1x10(8) conídios/mL, a mortalidade foi avaliada durante 21 dias consecutivos, onde se verificou uma mortalidade de 74% em larvas após 48h, e 50% de mortalidade em adultos após 15 dias de exposição ao fungo. A análise de variância (ANOVA) mostrou que existe influência e interação de ambos os efeitos: concentração e tempo.

The muscular dystrophy of Golden Retriever is a degenerative miopaty caused by the absence of dystrophy and it is genetically homologue of the Duchenne muscular dystrophy in humans, so, these dogs are considerably experimental models for studies on cellular therapy. Their successful depends of the adequate immunosuppression. Cyclosporin A is indicated for that and the monitoring of blood concentration and adverse effects are essential to viabilise the therapy. It was studied GRMD dogs, and normal dogs from the same breed, submitted for therapy with CsA, associated, on GRMD, of cell transplantation. It was evaluated the possible effects of the drug on renal functions. It has been considerate the clinic manifestations, urinalisis, testis of glomerular function and blood concentrations of urea, cretinine, sodium and potassium. In our results we found a discrete increase of blood urea on booth groups; increased levels of urine's cylinders and protein and also increase of urinary density on GRMD group. CsA therapy could make acute lesions on renal tubules, especially on GRMD. These dogs also have different reactions than normal dogs on relation of ions homeostasis and renal function. However, earlier diagnosis and adequate treatment could prevent the development of renal diseases. | A distrofia muscular dos cães Golden Retriever (GRMD), uma miopatia degenerativa causada pela ausência da distrofina, é geneticamente homóloga à distrofia muscular de Duchenne que acomete humanos, portanto, estes cães são considerados modelos experimentais para estudos em terapia celular. Seu sucesso depende da imunossupressão adequada. A ciclosporina A é indicada para tal e a monitorização de suas concentrações sangüíneas e efeitos adversos são essenciais para viabilizar a terapia. Foram estudados cães GRMD e normais da mesma raça, submetidos à terapia com CsA, associada, nos GRMD, ao transplante de células tronco. Foram avaliados os possíveis efeitos do fármaco sobre a função renal, sendo consideradas as manifestações clínicas, urinálise, testes de função glomerular, e concentrações séricas de uréia, creatinina, sódio e potássio. Como resultado houve aumento discreto na uréia sérica de ambos os grupos; cilindrúria e proteinúria e aumento da densidade urinária no grupo dos GRMD. Concluímos que a CsA pode causar lesão aguda de túbulos renais, principalmente em GRMDs; os mesmos também reagem de modo distinto com relação à homeostase de íons e função renal. Entretanto, diagnóstico precoce e tratamento podem prevenir o agravamento das lesões e desenvolvimento de insuficiência renal.

Incubation time induce damages in sperm cells by necrosis and/or apoptosis. The aim of this study was the evaluation of changes in plasma membrane related to apoptosis and necrosis in bovine sperm cells through 2 hours of incubation. Sperm cells were incubated at 5% (v/v) CO2 in air for 0, 30, 60, 90 and 120 minutes. After each period, sperm cells were incubated with fluorescent probes Yo-pro and propidium iodide (PI) to detect change in plasma membrane related to apoptosis and necrosis respectively. Using Yo-pro/PI assay, three different subpopulations of sperm cells were detected by flow cytometry: a) necrotic sperm cells (PI+ and Yo-pro-/+); b) apoptotic sperm cells (Yo-pro+ and PI-) and c) living cells (Yo-pro- and PI-). The percentage of live cells (plasma membrane integrity) significantly decreases over 2 hour of incubation, on the other hand, the percentage of necrotic and apoptotic cells increase during incubation. Changes in plasma membrane integrity were correlated to incubation time. While live cells were negatively correlated with the increase of incubation time, necrosis and apoptosis were positively correlated. It was also observed that necrosis was the main damage in sperm cells in all incubation times. In conclusion, incubation time induces changes in plasma membrane integrity related to necrosis and apoptosis, whether necrosis is present in higher quantity in all incubation times. | O tempo de incubação causa danos nas células espermáticas relacionados a necrose e/ou apoptose. O objetivo deste estudo foi avaliar as mudanças na membrana plasmática relacionadas a apoptose e necrose em espermatozóides bovinos durante 2 horas de incubação. Os espermatozóides foram incubados a 5% (v/v) CO2 em ar por 0, 30, 60, 90 e 120 minutes. Depois de cada periodo, as células espermáticas foram incubadas com as sondas fluorescentes Yo-pro e iodito de propideo (PI) para detectar mudanças na membrana plasmática relacionadas a apoptose e a necrose, respectivamente. Usando Yo-pro/PI assay, três subpopulações diferentes de células espermáticas são detectadas pelo citômetro de fluxo: a) células espermáticas em necrose (PI+ and Yo-pro-/+); b) células espermáticas em apoptose (Yo-pro+ and PI-) e c) células espermáticas vivas (Yo-pro- and PI-). A porcentagem de células vivas (membrana plasmática integra) significativamente diminui durante 2 horas de incubação, por outro lado, a porcentagem de espermatozóides em necrose e apoptose aumentaram durante a incubação. As mudanças na integridade da membrana plasmática foram correlacionadas com o tempo de incubação. Enquanto as células vivas foram correlacionadas negativamente com o aumento do tempo de incubação, necrose e apoptose foram correlacionadas positivamente. Também foi observado que necrose foi o principal dano causado pelo tempo de incubação nas células espermáticas. Conclui-se que o tempo de incubação causa alteração na integridade da membrana plasmática relacionadas a necrose e apoptose nas células espermáticas, sendo que necrose foi observada em maior quantidade em todos os tempos de incubação.

Baccharis coridifolia is one of the most important poisonous plants to cattle in the South of Brazil. The plant provokes necrotic lesions in the lymphoid tissues and in the gastrointestinal tract of cattle. Experimental administration to mice produces most of the lesions seen in the lymphoid tissues of cattle. This study was conducted to search possible differences in the susceptibility of T and B lymphocyte subpopulations. Lymph nodes, spleen, thymus and gut-associated lymphoid tissue (GALT) of cattle and mice experimentally poisoned were evaluated. The results were evaluated based on cell populations affected or remaining in the organs. Immunostaining for B lymphocytes (anti-BLA-36) identified the germinal center of follicles of the lymph node, spleen and GALT in both species. Immunostaining for T lymphocyte (anti-CD3) identified the paracortical area of the germinal centers of the lymph nodes and GALT, the periarteriolar area of the spleen, and the whole thymus both in cattle and mice. Experimentally poisoned cattle and mice shows necrosis of the germinal center of secondary follicles of the lymph nodes, spleen and GALT, where necrotic cells were immunostained for B and less often for T lymphocyte. Necrotic cells in the paracortical region of the lymph node were less often and were immunostained. Necrotic lesions of the thymus were seen only in mice, with positively stained for T lymphocyte. The distribution of the lesions in the lymphoid tissues and the immunostaining in necrotic cells suggested that the active principles of the plant are cytotoxic to B and T cells. | Baccharis coridifolia é uma das mais importantes plantas tóxicas para bovinos no Sul do Brasil. A intoxicação pela planta produz lesões necróticas nos tecidos linfóides e no trato gastrointestinal de bovinos. A administração experimental para camundongos produziu a maioria das lesões que ocorrem nos tecidos linfóides de bovinos. Este estudo foi conduzido para detectar as possíveis diferenças na susceptibilidade das populações de linfócitos T e B. Foram utilizados linfonodos, baço, timo e acúmulos linfóides associados ao intestino de bovinos e camundongos experimentalmente intoxicados pela planta. Os resultados foram avaliados com base na população de células lesadas ou por aquela que permaneceram nos tecidos. Em ambas as espécies, na marcação imunoistoquímica para linfócitos B (anti-BLA-36) predominou a região do centro germinativo dos linfonodos, baço e acúmulos linfóides associados ao intestino. A marcação para linfócitos T (anti-CD3) predominou na região paracortical dos linfonodos, acúmulos linfóides associados ao intestino e região periarteriolar do baço e timo de ambas as espécies. Bovinos e camundongos experimentalmente intoxicados demonstraram acentuada necrose do centro germinativo dos folículos secundários dos linfonodos, baço e intestino, onde as células necrosadas foram marcadas pela imunoistoquímica para linfócitos B e em menor freqüência para linfócitos T. Necrose celular na região paracortical do linfonodo foi discreta e sem marcação imunoistoquímica. Células necróticas no timo foram observadas somente em camundongos, com imunoistoquímica positiva para linfócitos T. A distribuição das lesões nos tecidos linfóides associadas à marcação imunoistoquímica das células necrosadas sugerem que o princípio ativo da planta é citotóxico para células T e B.

Amitraz (AM) and romifidine (RMF), two alpha-2 adrenoceptor agonists, produce sedative effect and decrease spontaneous locomotor activity (SLA) of horses. The behavioral effects and sedation after intravenous injection of RMF (0.06mg/kg) or AM 0.1mg/kg (AM 0.1) or AM 0.4mg/kg (AM 0.4) were compared in horses. RMF caused head ptosis (HP) until 45 min. The lower AM dose induced HP from 45 to 60 minutes and from 120 to 150 minutes, and the higher dose induced HP until 180 minutes. Data concerning changes in SLA were not conclusive. RMF or AM 0.4 caused a greater sedation than AM 0.1 until 20 min. After 20 minutes, the sedation caused by AM 0.4 was greater than that of RMF or AM 0.1. Romifidine caused consistent sedation until 45 minutes. The amitraz emulsion produced a dose-dependent sedation until 180 minutes. Comparing to romifidine, the emulsion of amitraz induced a more substantial sedation. At dosages and dilution applied, amitraz is an effective sedative for horses. | Os agonistas de receptores adrenérgicos do tipo alfa-2 amitraz (AM) e romifidina (RMF) produzem efeito sedativo e reduzem a atividade locomotora espontânea (ALE) em eqüinos. Compararam-se os efeitos sedativos e comportamentais da injeção intravenosa de RMF (0,06mg/kg) ou AM 0,1mg/kg (AM 0,1) ou 0,4mg/kg (AM 0,4) em cavalos. RMF provocou ptose de cabeça (PC) por 45 minutos. O amitraz provocou PC entre 45 e 60 e entre 120 e 150 minutos com a dose menor, e por 180 minutos com a dose maior. Os dados relacionados à ALE não foram conclusivos. RMF ou AM 0,4 causaram sedação mais intensa que AM 0,1 até 20 minutos. Após 20 minutos, a sedação provocada pelo AM 0,4 foi mais intensa que para a RMF ou o AM 0,1. A romifidina causou sedação por 45 minutos. A emulsão de amitraz provocou sedação dose-dependente por 180 minutos. Em relação à romifidina, o amitraz produziu uma sedação mais consistente. Nas doses e na diluição aplicada, o amitraz é eficaz como sedativo para cavalos.