Objetivou-se neste estudo avaliar os efeitos da aplicação de ondas de choque extracorpóreas (ESWT) no terceiro metacarpiano de equinos hígidos através da determinação da elasticidade óssea. Foram utilizados 20 equinos Puro Sangue Inglês, machos e fêmeas, com dois anos de idade, em início de treinamento e selecionados quanto ao estado de higidez. No início do experimento (D0), todos os animais foram submetidos à avaliação da elasticidade óssea do terceiro metacarpiano. Os animais foram divididos em dois grupos (Grupo Controle - GC e Grupo Experimental - GE). A aplicação das ESWT foi realizada no membro torácico direito dos animais do GE, na região coincidente à da avaliação da elasticidade óssea. Foi utilizado aparelho para terapia de ondas extracorpóreas com densidade de fluxo de energia de 0,15mJ/mm² e 2000 pulsos com probe E6R20, com característica do foco da onda de choque de 20 mm. A ESWT foi repetida a cada 21 dias totalizando três sessões (D0, D21 e D42). A análise da determinação da elasticidade óssea foi realizada no D0, D21, D42 e D72. A média da velocidade ultrassonográfica diferiu entre os grupos no D21, D42 e D72, sendo que os animais do GE apresentaram menor densidade mineral óssea após as aplicações das ESWT. Houve igualmente, diferença na massa óssea entre os grupos no D21 e D42, parâmetro onde os animais do GE apresentaram diminuição significativa da massa óssea. O risco de fratura apresentou-se maior nos animais do GE no D21. Concluiu-se que, a ESWT é capaz de promover alteração da densidade mineral óssea. | The porpoise of this study was to evaluate the effects of extracorporeal shock waves in third metacarpus bone from healthy horses by determination of bone elasticity. It were used 20 Thoroughbred horses, male and female, with two years old, on top of training and selected as the state healthy. At the beginning of the experiment (D0), all animals were submitted for evaluation of bone elasticity held in the third metacarpus bone. The animals were divided into two groups (Control Group - CG and Experimental Group - EG). The application of extracorporeal shock wave therapy (ESWT) was performed on the right forelimb of the animals in the experimental group in the same place evaluated for bone elasticity and was used apparatus for extracorporeal therapy of waves with 0.15 mJ/mm² energy flux density and 2000 pulses with E6R20 probe, with focus feature of the shock wave of 20 mm. The ESWT were repeated every 21 days, a total of three sessions (D0, D21 and D42). The analysis of bone elasticity determination was realized at D21, D42 and D72. The average of speed ultrasound differed between groups at D21, D42 and D72, and the animals from EG had lower bone mineral density after applications of ESWT. There was also difference in the analysis of bone mass (Z-Score) between the groups at D21 and D42, which animals from EG showed a significant decrease in bone mass. The risk of fracture was higher in animals from experimental group at D21. It was concluded that ESWT is able to promote change in bone mineral density.

Em dois ensaios experimentais avaliou-se efeito dietético da suplementação de acidificantes sobre o desempenho (ensaio 1) e coeficientes de digestibilidade aparente de nutrientes (ensaio 2) em suínos. No ensaio 1, com duração de 42 dias, 120 leitões desmamados aos 21 dias foram distribuídos em oito blocos experimentais com três leitões por baia, foram aplicados cinco tratamentos, sendo um controle e quatro com a inclusão de acidificantes. No ensaio 2, dez leitões com peso médio inicial de 16,4 kg foram distribuídos em dois blocos experimentais, cada um com cinco repetições, sob dois tratamentos (ração sem acidificante ou com 1,0% de ácido fumárico). No estudo de desempenho, a adição de ácido fumárico nas rações determinou aumentos no consumo de ração nos períodos de 0 aos 15 dias, 0 aos 32 dias e ganho de peso de 0 aos 42 dias, quando comparado ao tratamento controle. No ensaio 2, a adição de 1,0% de ácido fumárico na ração não alterou os coeficientes de digestibilidade aparente da matéria seca e demais componentes químicos das dietas. A ausência de diferenças nos coeficientes de digestibilidade aparente dos nutrientes dietéticos com a inclusão do acidificante, provavelmente deveu-se ao curto período de avaliação. A inclusão de ácido fumárico nas rações de leitões desmamados favoreceu o desempenho dos leitões. | In two experimental assays it was evaluated the diet acidifier supplementation effect on performance (assay 1) and on nutrient apparent digestibility coefficients (assay 2). During 42 days in assay 1, 120 piglets weaned at 21-days years old were allotted in eight experimental block design with three pigs per experimental unit. The treatments were a control and four acidified diets. In assay 2, 10ten piglets with an average weight of 16,4 kg were allotted in two experimental block design receiving two treatments under five replications (control diet without acidifier or supplied with 1,0% fumaric acid). On performance study the fumaric acid inclusion in the diet permitted a feed intake increase from 0 to 15 days, and weight gain from 0 to 32 days and from 0 to 42 days. In assay 2, the diet 1,0% of fumaric acid inclusion did not modified the apparent digestibility coefficients of dry matter and moreover diet chemical compounds. The similar apparent digestibility coefficient of dietetic nutrients with the acidifier inclusion probably occurred due to the short period of evaluation. The fumaric acid inclusion in weaned piglet diets improved performance of piglets.

O objetivo do presente estudo foi avaliar se diferentes formas de cultivo interferem no efeito do óxido nítrico (NO) sobre a maturação e a integridade da membrana plasmática do complexo cumulus-oócito de bovinos. Para tanto, realizou-se cultivo em gotas sob óleo mineral ou em placas de quatro poços com a adição de diferentes concentrações de nitroprussiato de sódio (SNP, doador de óxido nítrico). Não foi observada diferença (P &gt; 0,05) entre as formas de cultivo quando se avaliou a integridade de membrana plasmática e a expansão das células do cumulus (CC). Contudo, os oócitos dos grupos controle e os cultivados na presença de 10-3 M de SNP, ambos cultivados em placa, apresentaram maior porcentagem de membrana íntegra do que os mesmos tratamentos cultivados em óleo mineral (P &lt; 0,05). Observou-se que a adição de 10-3 M de SNP diminuiu o grau de expansão das CC e de integridade da membrana plasmática dos oócitos, tanto no cultivo em gota sob óleo quanto em placa, diferindo dos outros grupos (P &lt; 0,05). Semelhante à expansão, a forma de cultivo não interferiu na extrusão do primeiro corpúsculo polar, sendo que a adição de 10-3 M de SNP inibiu a extrusão em ambos os sistemas (P &lt; 0,05). Houve um efeito dose-resposta na concentração de NO no meio de maturação em ambos os tipos de cultivo (P &lt; 0,05), sendo que esta foi maior no meio de cultivo sob óleo, exceção feita quando se adicionou 10-3 M de SNP, tratamento no qual não houve diferença nos tipos de cultivo empregados. Estes dados mostram que o sistema de cultivo não interferiu na ação do NO na maturação in vitro de COC bovinos, mas interfere na integridade da membrana plasmática do oócito. | The aim of the present study was to evaluate the influence of different forms of in vitro culture on the nitric oxide action in maturation and membrane integrity on bovine cumulus-oocyte complex. No significant effect was observed between different forms of culture (mineral oil vs plate; P &gt; 0.05), as much for membrane integrity as for expansion of the CC. However, it was observed that oocytes of the groups control and 10-3 M of SNP, cultivated in plate, had presented greater percentage of cell with maintenance of membrane integrity than same treatments cultivated in drop. The addition of 10-3 M of SNP showed an inhibitory effect on the expansion and membrane integrity of CC and oocytes in both, culture in drops under oil and plate (P < 0.05). The culture form did not intervene with the extrusion of the first polar corpuscle and the addition of 10-3 M of SNP inhibited this extrusion in the both systems (P < 0.05). There was a dose-response effect on the concentration of NO in the maturation medium in both types of cultivation (P < 0,05), and this was higher in the culture medium under oil, except when added 10-3 M of SNP, treatment in which there was no difference in the types of cultivation employed. (P<0.05). These data demonstrate that the culture system did not intervene with the action of the NO in the maturation in vitro of bovine COC, but intervened with the integrity of the plasmatic membrane of the oocyte.

São inúmeras as dificuldades observadas na depopulação de elevado número de aves e é importante proceder-se à depopulação no interior do próprio aviário por questões de biossegurança do homem em casos de emergência sanitária causada por doenças de aves de elevada transmissibilidade, como a influenza aviária e a doença de Newcastle. Construiu-se o equipamento gerador de espuma para provocar a anóxia física em aves. Verificou-se a eficácia da espuma gerada através do uso de líquido detergente de alta expansão sobre o sacrifício de galinhas, avaliando-se os sinais sensoriais, tempo de morte, letalidade e lesões macro e microscópicas. Duzentas galinhas de postura com 78 semanas de idade foram divididas em dez grupos experimentais e submetidas a diferentes períodos de exposição à espuma, variando de 5min30s minutos a 8min15s minutos. A partir de seis minutos de exposição à espuma 100% das aves foram mortas. A presença de bolhas de espuma na cavidade oral e traqueia foram constatadas em todos os períodos de exposição à espuma, indicando a ocorrência de asfixia física. Congestão nas mucosas da cavidade oral e traqueia foram também observadas em todos os períodos de exposição. No exame histopatológico dos pulmões de todas as aves, observou-se a presença de congestão e hemorragia difusa de moderada intensidade. Nenhuma alteração foi observada na traqueia das aves. A eficácia da espuma como método de depopulação de aves foi constatada neste trabalho, podendo ser recomendada diante da necessidade de atendimento a emergências sanitárias. | There are several difficulties in the control of quick spreading and highly contagious poultry diseases such as avian influenza and Newcastle disease, which require large numbers of poultry to be rapidly killed inside the poultry houses in order to minimize human exposure and disease spreading. We have built and tested an equipment that uses a water-based foam from high expansion fire detergent that induces poultry anoxia measured by sensorial signs, time to death, lethality and macro and microscopically lesions. Two hundred 78-weeks old hens were divided into ten groups and exposed to different times of death according to exposure to water-foam varying from 5min30s minutes to 8min15s minutes. All poultry died after six minutes of water-foam cover. Foam bubbles were observed in oral cavity and trachea of all poultry at each time of exposure to foam, revealing physical asphyxia. Macroscopically, congestion in oral cavity and in trachea mucosa was observed. Histopathology revealed diffuse and moderate hemorrhage in lungs and no lesion in trachea. The efficacy of water-foam procedure for poultry depopulation was demonstrated validating its recommendation in case of emergency.

O peixe eurihalino sul-americano Poecilia vivipara (BLOCH; SNEIDER, 1801), o guppy, é encontrado tanto em estuários quanto em águas de rios, o que sugere uma alta adaptabilidade aos diferentes ambientes de salinidade. Neste trabalho, estudamos a adaptação do epitélio interlamelar, do arco e do rastelo das brânquias dos peixes de estuário de água doce. Os resultados revelam que o epitélio branquial de Poecilia vivipara pode ajustar-se à água doce, diminuindo a proporção volumétrica (PV) de células mucosas do epitélio interlamelar e aumentando a PV de células clorídricas. No entanto, não houve nenhuma evidência de alteração morfológica semelhante na região do rastelo branquial. O epitélio do rastelo branquial parece ser parte de um compartimento diferente que é menos sensível a variações de salinidade. | The south-american euryhaline fish Poecilia vivipara (BLOCH; SNEIDER, 1801), the guppy, is found both in estuary and river waters, which suggests high adaptability to environments of different salinity. In this work we studied the adaptation of the interlamellar, bars and rakers epithelia of the gills of estuary fish to freshwater conditions. The results reveal that the gill epithelia of Poecilia vivipara can adjust itself to freshwater by decreasing the VP of mucous cells of the interlamellar epithelium and increase the volumetric proportion (VP) of chloride cells. However, there was no evidence of similar morphological alteration in the rakers region. The epithelia of the rakers appears to be part of a different compartment that is less sensitive to variation of salinity.

Para avaliar a influência de dietas deficientes em energia sobre o perfil hormonal, metabólico e clínico em bovinos, foram usados 12 garrotes aleatoriamente distribuídos em três grupos com quatro animais para receber por 140 dias, as rações: (G1) adequada, para ganho de peso de 900g/dia (17,7 Mcal/d de ED e 13% de PB); (G2) 80% dos requerimentos de mantença (5,8 Mcal/d de ED e 7% de PB); e (G3) 60% dessas exigências (4,7 Mcal/d de ED e 5% de PB). Nos grupos G2 e G3 houve acentuada diminuição do peso vivo e do consumo de alimentos. O déficit energético provocou redução destacada nos teores sanguíneos de IGF-1 e T3. A perda de peso foi uma direta consequência do menor consumo de alimentos, da qualidade inferior de ração ingerida e da menor atuação de IGF-1 e T3. A mensuração da altura dos animais ao término do experimento apresentou uma diferença no G1 de 59% e 73% maior que G2 e G3, respectivamente. O IGF-1 foi considerado o principal indicador do status energético, pois diminuiu de maneira sensível e rápida sua concentração no decorrer do tempo experimental; este hormônio foi diretamente influenciado pelos teores de T3. | To evaluate the influence of diets with different degrees of energy deficiency on the hormonal profile, and on metabolic and clinical states of steers, 12 steers were randomly distributed in three groups of four animals each. The groups received the following diets for 140 days: (G1) 100% of the maintenance to stimulate to weight gain of 900 gr/day (DE: 17.7 Mcal/d and 13% de CP); (G2) 80% of the maintenance (DE: 5.8 Mcal/d and 7% de CP); (G3) 60% of the same requirements (DE: 4.7 Mcal/d and 5% de CP). In both energy deficiency groups (G2 and G3) there was a decrease in body weight and in feed intake during experimental period. In relation to hormonal profile, the energy deficit caused an acute reduction in plasma levels of IGF-1 and T3. Weight loss was due to lower feed intake, poor quality of diet ingested and also due to low concentrations of IGF-1 and T3. Measuring height of animals at the end of the experiment showed a difference of 59% in G1 and 73% higher than G2 and G3, respectively. IGF-1 was considered the best indicator of the energetic status, because its blood levels reduction was sensible and rapid during the dietary energy deficit; and it was influenced directly by level of T3.

Em fêmeas bovinas, a liberação de prostaglandina F2α (PGF2α) é induzida in vivo pelo estradiol (E2). Acredita-se que o E2 estimule a síntese de proteínas essenciais na produção de PGF2α. Objetivou-se avaliar o efeito do E2 no incremento da concentração de proteínas totais e na modificação da composição proteica em explantes endometriais de fêmeas bovinas tratadas com E2 no 17º dia do ciclo estral. Novilhas cruzadas foram tratadas no 17º dia do ciclo estral, via intravenosa, com 0 mg (Grupo Controle; n = 6) ou 3 mg de E2 (Grupo E2; n = 6) e abatidas duas horas após. Explantes endometriais foram isolados, submetidos à extração de proteínas totais, quantificados e avaliados por Eletroforese Unidimensional em gel de poliacrilamida 10% SDS-PAGE. A concentração de proteínas totais não diferiu entre os grupos, 6296,10 + 439,90 µg/mL para o Grupo Controle e 8426,56 + 1156,00 µg/mL para o Grupo E2 (p = 0,1158). Não houve diferença significativa (p &gt; 0,05) no perfil proteico dos explantes endometriais em géis corados com Coomasie Blue. Em géis corados com Nitrato de Prata verificou-se no Grupo E2 maior porcentagem relativa das bandas referentes ao peso molecular de 75 a 76 kDa (8,40% vs. 4,89%; no Grupo E2 e Controle respectivamente; p &lt; 0,05) e 108 a 110 kDa (6,85% vs. 3,84%; no Grupo E2 e Controle respectivamente; p &lt; 0,05). Observou-se no Grupo E2 menor porcentagem relativa da banda referente ao peso molecular de 90 kDa (5,78% vs. 9,83%; no Grupo E2 e Controle respectivamente; p &lt; 0,05). Conclui-se que o E2 não incrementa a concentração de proteínas no endométrio, entretanto, altera a composição proteica nos explantes endometriais, indicando que o E2 altera a expressão de proteínas específicas. | In bovine females the release of prostaglandin F2&#945; (PGF2&#945;) is induced in vivo by estradiol (E2). It is believed that E2 stimulates the synthesis of essential proteins for the production of PGF2&#945;. This study aimed to evaluate the effect of E2 in increasing the concentration of total protein and modifying the protein composition of endometrial explants from bovine females treated with E2 at the 17th day of estrous cycle. Crossbred heifers were treated at 17th day of estrous cycle intravenously with 0 mg (Control Group; n = 6) or 3 mg of E2 (E2 Group; n = 6) and killed two hours after. Endometrial explants were isolated, subjected to extraction of total protein, quantified and were analyzed by one-dimensional electrophoresis on polyacrylamide gel 10% SDS-PAGE. The concentration of total protein did not differ between groups, 6296.10 + 439.90 µg/mL for the Control Group and 8426.56 + 1156.00 µg/mL for E2 Group (p = 0.1158). There was no significant difference (p &gt; 0.05) in the protein profile of endometrial explants in gels stained with Coomasie Blue. In gels stained with Silver Nitrate it was verified in E2 Group greater relative percentage of the bands referring to the molecular weight of 75 to 76 kDa (8.40% vs. 4.89% in E2 Group and Control respectively; p < 0.05) and 108 to 110 Kda (6.85% vs. 3.84% in E2 Group and Control respectively, p < 0.05). It was observed in E2 Group lower relative percentage of the band referring to the molecular weight of 90 kDa (5.78% vs. 9.83% in E2 Group and control respectively; p < 0.05). We concluded that the E2 does not increase the protein concentration in the endometrium, however, it modifies the proteinic composition in the endometrial explants, indicating that E2 alters the expression of specific proteins.

Foram realizados a quantificação de coliformes totais (CT) e termotolerantes (CTT), isolamento e identificação de coliformes, e pesquisa de Salmonella em 28 amostras de água e 28 de camarão da espécie Litopenaeus vannamei, oriundas de duas fazendas de cultivo localizadas no Estado do Ceará, Brasil. Nenhuma amostra de água apresentou índice de CTT acima do limite de 2.500/100 mL preconizado pela legislação para águas salobras destinadas ao cultivo de organismos para fins de consumo. O Número Mais Provável (NMP/g) de CTT das amostras de camarão variou de &lt;3 a 2,9 x 10(4). A maior frequência de isolamento de coliformes nas amostras de água e camarão foi a da espécie Escherichia coli. Em apenas três (5,35%), das 56 amostras analisadas, foi detectada a presença de Salmonella sorovar Newport e S. Saintpaul. Apesar do baixo índice de CTT e da baixa incidência de salmonela, a presença dessas bactérias entéricas em ambientes de cultivo de peneídeos é preocupante, uma vez que podem provocar infecções em humanos. | Samples of water (n = 28) and Litopenaeus vannamei (n = 28) from two shrimp farms in Ceará state, Brazil were evaluated for total coliforms (TC), total thermotolerant coliforms (TTC), coliform species diversity and Salmonella. No water sample presented TTC levels above the maximum level (2,500 MPN/100 mL) established by regulation for brackish water aquaculture producing seafood for human consumption. The most probable number (MPN) of TTC in shrimp samples ranged from <3 to 2.9 x 10(4) CFU/g. The coliform species most frequently isolated from water and shrimp was Escherichia coli. Only three (5.35%) of the 56 samples tested were positive for Salmonella (Newport and Saintpaul serovars). In spite of the low TTC levels observed, the presence of potentially pathogenic enteric bacteria in shrimp culture is a disquieting finding.

Foi caracterizada a morfologia macroscópica do genital feminino, de seis exemplares adultos de paca (Cuniculus paca), mediante dissecação das cavidades abdominal e pélvica imediatamente após o óbito. Os ovários apresentam forma ovoide, achatados dorso-ventralmente, de coloração amarela esbranquiçada com pequenos pontos avermelhados em sua superfície; têm localização sublombar, caudal aos rins; estão envoltos por uma rasa bolsa ovárica e fixados pelo mesovário; a tuba uterina é um órgão par, de aspecto sinuoso, contínua aos ovários, estando inserida na mesossalpinge e se estendendo até o início de cada corno uterino correspondente. Os cornos uterinos retilíneos fixam-se à parede abdominal pelo mesométrio e se unem pelo ligamento intercornual na altura da entrada da pelve, onde se posicionam dorsalmente à vesícula urinária; duas cevices estão presentes, embora o septo uterino que as separa seja incompleto, caracterizando presença de dois óstios uterinos internos e um único óstio uterino externo, considerando-se este útero como duplo incompleto. A vagina é um órgão tubular que se posiciona ventral ao reto e dorsal à vesícula urinária e à uretra, não se verificou a presença de vestíbulo e a vagina e a uretra não possuem ponto comum de convergência, abrindo-se, cada uma delas, diretamente na região vulvar, que se apresenta plana, com reduzidos lábios vulvares, apenas o clitóris de forma cônica é pouco proeminente e apresenta duas estruturas pontiagudas em sua região distal. Não se verificaram diferenças estatisticamente significativas nas mensurações realizadas nos ovários, tubas uterinas e cornos uterinos, ao se comparar os antímeros direito e esquerdo. | The macroscopic morphology of genital tract of six adult female paca (Cuniculus paca) was studied through dissection of abdominal and pelvic cavities immediately after death. The ovaries have ovoid shape, dorsal-ventrally flattened, whitish yellow color with small red spots on its surface, located in sublombar situation, caudally to the kidneys, surrounded by a shallow bursa and fixed by the mesovarium; the oviduct is a pair of sinuous tubes, continuous with the ovaries, inserted in the mesosalpinx and extending up to the beginning of each correspondent uterine horn. The uterus horns are rectilinear and attached in the abdominal walls by the mesometrium, each horns extends caudally into the pelvic cavity and are linked by intercornual ligament, the ventral surface chiefly contacts the bladder; two cervices are present, although the uterine septum is incomplete, characterizing the presence of two internal uterine ostia and one external uterine ostium, considering this uterus as an incomplete duplex. The vagina is a tubular organ that is positioned ventrally to the rectum and dorsally to the urinary bladder and urethra; urethral duct is placed apart of the vaginal canal, characterizing the absence of the vestibulum; the vulva presents itself planed, with reduced vulvae lips, the clitoris is a conical structure with two prominent pointed structures at its distal region. There were no differences statistically significant in measurements made in the ovaries, oviducts and uterine horns, when comparing the right and left sides.

O presente trabalho objetivou estudar o quadro sintomatológico, algumas variáveis bioquímicas e a resposta ao tratamento com cálcio de bovinos com hipocalcemia induzida experimentalmente. Foram utilizadas 12 novilhas distribuídas nos grupos controle (n = 5) e tratado (n = 7). Foi infundida solução de EDTA a 5% até o animal apresentar sinais clínicos de hipocalcemia, quando então era iniciado o tratamento com solução contendo cálcio, fósforo, magnésio e glicose, na dose de 1 mL/kg/PV, em 30 minutos, enquanto que o grupo controle recebia apenas solução fisiológica na mesma dose. Exame clínico e coleta de amostras sanguíneas foram realizados nos tempos T0 (basal), T1 (Fase I, caracterizada por tremores musculares), T2 (ao final da infusão com EDTA), T3 (ao final do tratamento) e T4 (24 horas após o término do experimento). Todas as novilhas mostraram diminuição temporária da concentração de cálcio total e livre, fósforo, e apresentaram quadro clássico de hipocalcemia. A taquicardia, a hipofonese e a atonia ruminal desapareceram no decorrer do tratamento, sendo observado aumento no cálcio livre e total e fósforo. O medicamento usado no tratamento dos animais foi eficaz na recuperação do quadro clínico de hipocalcemia dentro de 30 minutos, promovendo retorno das principais variáveis do perfil bioquímico aos valores basais. | The present work aims to study the clinical picture, biochemical profile and treatment response in cattle with induced hypocalcaemia. Were utilized 12 heifers randomly distributed in treated (n = 7) and control (n = 5) groups. The induction model was carried on by continuous EDTA infusion into jugular vein until the animals present clinical signs of hypocalcaemia. After that, the treated group received a calcium (Ca) solution enriched with phosphorus, magnesium and glucose with a dose of 1 mL/kg/BW in 30 minutes, meanwhile, the control group was treated with the same dose of physiologic solution. Clinical examination were performed and blood samples were obtained in times T0 (basal time), T1 (beginning of hypocalcaemia); T2 (end of EDTA infusion); T3 (end of treatment) and T4 (24 hours after the induction). All the heifers present temporary blood calcium and phosphorus reduction and demonstrated classical clinical picture of hypocalcaemia. The treated group present full clinical recovery and blood calcium and phosphorus increase. Most evident clinical signs were increasing heart beat, hypophonesis and rumenal atony. Those symptoms were reversed after calcium treatment. The solution used for treatment was efficient on clinical recovery within thirty minutes, promoting the return to basal levels of the most of biochemical's variables.