O objetivo do presente estudo foi avaliar se a composição proteica de plasma seminal, verificada por eletroforese bidimensional (2DE), pode interferir na congelabilidade do sêmen de touros, e se existe a possibilidade de predizer tal característica em touros doadores de sêmen. Amostras de 20 touros (diferentes raças) com mínimo de três anos de histórico de produção em Central de Coleta de sêmen foram coletadas. Todos os touros tinham de 2 a 7 anos de idade. A congelabilidade do sêmen foi calculada por no de ejaculados aprovados pós-descongelação / no de ejaculados submetidos à congelação (depois do crivo do padrão de qualidade da empresa para aprovar o ejaculado para ser submetido a congelação). Os touros foram divididos em três grupos: ALTA (=>80% aproveitamento de ejaculados encaminhados à congelação); MÉDIA (>60 a 79% ejaculados aprovados) e BAIXA (=<59% ejaculados aprovados). Sessenta e oito corridas de géis 2DE foram avaliadas nas amostras de plasma seminal, que detectaram 225 spots com quantidade de proteína diferente entre as mesmas (VION). Pela estatística utilizada, comparando-se a congelabilidade do sêmen com quantidade de proteína detectada de cada spot (VION), constatou-se que 2 spots apresentaram-se com quantidade significativa de proteína diferente entre os dois grupos de congelabilidade do sêmen, considerando spots que foram detectados em mais de 75% das amostras corridas. Os touros taurinos apresentaram perfil proteico mais homogêneo quando comparado com os zebuínos, considerando número e frequência de spots. Tais resultados demonstram um potencial para uso da proteômica como ferramenta preditiva da congelabilidade do sêmen de touros, porém com necessidade de maiores estudos, principalmente para melhor compreensão de interações proteicas entre membrana espermática, plasma seminal e diluidores de sêmen utilizados, já que podem interferir no fenótipo proteico avaliado e na congelabilidade do sêmen, seja de forma positiva ou negativa. | The present study was undertaken the protein composition in 2D-electrophoretic pattern (2DE) of the seminal plasma (SP) can interfere in the semen bull freezability, and if we can use that for predicting semen bull freezability. Samples were obtained of 20 bulls (different breeds) with a minimum of 3 years history semen production in commercial semen collection Center. All animals ranged between 2 - 7 years of age. The semen freezability was calculated by # of thawed and approved ejaculates / # of ejaculates submitted to cryopreservation (after semen evaluation and approved to submitted to freeze). The bulls were divided in 3 groups: HIGH (=>80% ejaculates approved); MEDIUM (>60% and <79% ejaculates approved); LOW (=<59% ejaculates approved); the pattern and criteria were the same used in the routine of the commercial semen Center. 68 gels were carried through by 2DE of SP samples indicated 225 detected spots with protein different amount (VION) comparing. Comparing bull´s semen freezability and VION of each spot found difference among 2 spots from High and Low, even considering just spots with % of detection frequency bigger than 75%. The taurine bulls demonstrated more homogeneous profile when comparing with zebu bulls, considering number and frequency of appearance of spots. The results showed that proteomics can be a useful tool to predict the semen freezability, but we´ll need to study better the interactions between sperm membrane, seminal plasma and extender to comprehend better which proteome phenotype interfere positive or negatively in the semen freezability.

Considered as one of the main agents of the tripanossomiases, Trypanosoma evansi causes a disease generically know as "surra", with wide geographic occurence. This work has the aim to study the electrophoretic profile of the acute phase proteins of goats, experimentally infected with T. evansi. Ten crossbread female goats, around 4 months of age, clinically healthy and serum negative for the presence of antibodies anti-T. evansi (IFAT) were used. The animals were divided in two groups: six were inoculated (G1) intravenously with 2,38 x 10(6) tripomastigotes of T. evansi and four were kept as non-infected controls. The blood for serum was collected daily until the 14 days after inoculation (DAI), weekly up to the 98th DAI and every two weeks up to the 364th DAI. The serum proteins were separacted by sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDSPAGE). Twenty-one proteins were found in the serum of the goats, eight were nominally identified; phosphorylase, transferrin, albumin, antitrypsin, acid glicoprotein, haptoglobin, hemoglobin, and light chain immunoglobulin. | Considerado como um dos principais agentes das tripanossomíases, Trypanosoma evansi causa uma doença genericamente conhecida como "surra" e de ampla distribuição geográfica. Esse trabalho teve como objetivo principal estudar o perfil eletroforético das proteínas de fase aguda de caprinos experimentalmente infectados com este hematozoário. Para tal, foram utilizadas dez fêmeas caprinas, com vários graus de mestiçagem, com idade aproximada de 4 meses, clinicamente sadias e sorologicamente negativas para a presença de anticorpos anti-T. evansi (Reação de Imunofluorescência Indireta - RIFI). Os animais foram divididos em dois grupos: grupo 1 (G1): seis animais inoculados via intravenosa com 2,38 x 10(6) tripomastigotas de T. evansi e grupo 2 (G2): quatro animais utilizados como testemunhos. O sangue para a obtenção do soro foi obtido diariamente até o 14º dia após a inoculação (DAI), semanalmente até o 98º DAI e quinzenalmente até o 364º DAI. O fracionamento das proteínas foi obtido por em gel de poliacrilamida contendo duodecil sulfato de sódio (SDS- PAGE). Vinte e uma proteínas foram encontradas nos soros caprinos. Destas, oito foram nominalmente identificadas; fosforilase, transferrina, albumina, antitripsina, glicoproteína ácida, haptoglobina, hemoglobina e imunoglobulina de cadeia leve.

O efeito da qualidade e da quantidade de diferentes fontes de proteína na dieta utilizada por ratos adultos foi determinado através de parâmetros biológicos e bioquímicos. Ratos albinos da linhagem Wistar, com 275 dias de idade, foram submetidos a dietas isocalóricas contendo três diferentes níveis de caseína (1%, 3% e 5%), arroz (3%, 5% e 7%), feijão (5%, 7% e 9%) e mistura de arroz-feijão (3%, 6% e 8%) e comparados a um grupo controle cuja fonte protéica foi a caseína a 28%, durante o período experimental de 28 dias. A estimativa da porcentagem mínima de proteína para manutenção do peso corporal se mostrou dependente da qualidade protéica e igual a 4,9%; 9,7%; 7,3% e 4,5g%, respectivamente para arroz, feijão, arroz-feijão e caseína. Os parâmetros bioquímicos avaliados (proteína, albumina plasmática e proteína hepática) mostraram-se pouco sensíveis às variações protéicas da dieta. A magnitude das mudanças observadas sugere uma adaptação metabólica aos níveis inadequados de proteína e a possibilidade de atenuar as conseqüências da inferioridade qualitativa da proteína com um aumento da sua quantidade na dieta. Reafirma, também, que a extensão com que a qualidade da proteína na dieta afeta sua necessidade depende do estágio de desenvolvimento fisiológico do animal. | The effect of the quality and quantity of dietary protein on its utilization and on requirement by adult rats was studied by means of biological and biochemical parameters. Wistar adult rats were fed, "ad libitum", isocaloric diets containing various levels of casein (1%, 3%, 5%), rice (3%, 6%, 7%), bean (5%, 7%, 9%) and a rice and bean mixture (3%, 6%, 8%) throughout the 28 days period, and were compared to a casein control group (28%). The dietary protein levels to maintain body weight for adult rats were 4.1 g%; 9.7 g%; 7.3 g% and 4.5 g% for rice, bean, rice-bean mixture and casein, respectively. Biochemical parameters (plasma protein, albumin and liver protein) were not a sensitive indicator of protein intake. The magnitude of the changes observed shows a metabolic adaptation to protein restriction and possibility to overcome the poor protein quality by increasing the dietary protein quantity. The extent to which protein quality affects protein utilization depends on the stage of the animal physiological development.

Os requisitos mínimos de proteína para manutenção do peso e nitrogênio corporal de ratos em crescimento foram determinados, avaliando-se a utilização protéica de diferentes fontes vegetais em relação à caseína. O grau de comprometimento metabólico, nestas condições, foi avaliado através da análise de albumina e proteína total plasmáticas e de proteína hepática. Ratos albinos recém-desmamados, de ambos os sexos, foram submetidos a diferentes dietas experimentais (arroz a 3%, 5% e 7%; feijão a 6%, 8% e 10%; arroz-feijão a 4%, 6% e 8%; e caseína a 3%, 5% e 7%) e controles (caseína a 28% e aprotéica), durante 28 dias (50 dias de idade). A estimativa da porcentagem mínima de proteína se mostrou dependente da qualidade protéica e igual a 3,6; 7,4; 4,9; e 3,7%, respectivamente, para o arroz, o feijão, o arroz-feijão e a caseína. Os parâmetros bioquímicos avaliados mostraram redução significativa com níveis inadequados de proteína, além de adaptação metabólica à restrição protéica, sugerindo a possibilidade de se atenuar as conseqüências da deficiência qualitativa da proteína com um aumento da quantidade na dieta. | The protein minimum requirement for maintenance of body weight and nitrogen from growing rats was determined by protein utilization of some vegetable sources in relation to casein and by evaluation of some biochemical indicators (plasma protein and albumin, liver protein). Weanling Wistar rats were fed on experimental diets (3%, 5% or 7% rice; 6%, 8% or 10% bean; 4%, 6% or 8% rice-and-bean) and control diets (3%, 5%, 7% or 28% casein and free protein diet) during 28 days (50 days of age). The estimated minimal requirements of protein seems to be dependent on protein quality and were 3.6%; 7.4%; 4.9% and 3.7% respectively to rice, bean, rice-and-bean and casein. The biochemical parameters were significantly reduced in experimental groups when compared to casein 7% and 28% controls. The results obtained could suggest a metabolic adaptation to protein restriction and a possibility to overcome the poor protein quality by increasing the dietary protein quantity.

The ruminal suspended nylon bags technique was used to study the degradability of crude protein and disintegration of minosin of Leucaena leucocephala in water buffaloes. The experimental desing was in a 4 x 4 Latin square, with variable levels of crude protein (8.8, 10,5, 12,5, and 14.9% of dry matter). The diets did not cause significant differences on the ruminal degradation of crude protein of Leucaena (P &gt; 0.01), that ranged from 30.92 to 71.70% in, respectively, 3 or 48 hours of ruminal exposition. There was observed a clow ruminal protein degradation and a strong desingration of mimosin on the samples of Leucaena exposed in nylon bags to the rumen of water buffaloes | <p>A técnica de sacos de náilon suspensos no rúmen foi utilizada para estudar a degradabilidade da proteína bruta e do desdobramento da mimosina da Leucaena leucocephala em búfalos submetidos a um experimento em quadrado latino (4 x 4) com diferentes níveis de proteína bruta na ração (8,7; 10,5; 12,5 c 14,9% na MS). As rações não promoveram diferenças significativas (P &gt; 0,01) na degradabilidade ruminal da proteína bruta da leucaena, que variou entre 30,92% e 71,70% em 3 e 48 horas de suspensão no rúmen, respectivamente. Houve uma lenta degradação ruminal da proteína e um acentuado desdobramento da mimosina nas amostras de leucaena colocadas dentro dos sacos de náilon no rúmen de búfalos.</p>

Foram investigadas as células dendríticas (CD) na pele normal de cinco bezerros das raças Nelore, cinco da raça Holandesa Preta e Branca e cinco animais mestiços por meio da imunomarcação pela proteína S-100. Os animais mestiços foram infestados experimentalmente com 100 larvas de primeiro estádio de Dermatobia hominis e deles foram colhidas biópsias de pele parasitada às 24, 48, 72 e 168 horas após a infestação. Biópsias de pele destes animais, colhidas antes da infestação, foram utilizadas como controle. A imunomarcação das CDs foi feita empregando-se anticorpos de coelhos antiproteína S-100 e a técnica da avidina-biotina-peroxidase. Além das CDs, melanócitos, nervos e células endoteliais apresentaram imunomarcação pela proteína S-100. As DCs foram observadas exclusivamente na derme superficial, próximas à camada basal, tanto nos animais infestados como nos não-infestados. Não se detectou diferença significativa no número de CDs que pudesse ser atribuída à raça dos animais. Nos animais parasitados por D. hominis, as CDs apresentavam-se mais intensamente coradas e com os prolongamentos mais espessos do que nos controles não-parasitados. Além disso, nos animais parasitados observou-se um decréscimo significativo no número de CDs a partir de 24 horas após a infestação. | S-100 dendritic cells immunolabeling were investigated in uninfested skin biopsies from five Nelores, five Holstein-Friesian and five crossbreed (Holstein-Friesian x Nelores) calves. The group of crossbreed animal was experimentally infested with 100 first-instar larvae of Dermatobia hominis and biopsies were obtained 24, 48, 72 and 168 hours after infestation. Samples obtained prior to infestation from these animals were used as control. Rabbit anti-protein S-100 antibody and the avidin-biotin-peroxidase method were used for immunolabeling. Melanocytes, nerves and endothelial cells and dermal dendritic cells (DC) were positive to protein S-100. DCs were exclusively detected in the superficial dermis close to the basal layer of both normal and parasitized animals. There was no significant difference in DC numbers that might be attributed to breed. In parasitized animals the DC had thicker and deeply stained dendritic processes compared to normal animals. Statistically significant decreases in the DC number occurred after infestation.

<p>Bovine tuberculosis, persists in several countries as a threat to health of the herds despite the efforts given to the control and eradication of the disease. In order to detect immunogenic proteins with a potential to be used in a bovine tuberculosis diagnosis test, serum samples obtained from reactors and no reactors to intradermal tuberculin test, were evaluated for reactivity to <em>Mycobacterium bovis </em>antigens from a bacilli originated in Goiás – Brazil. The proteins immunogenicity from <em>M. bovis </em>was obtained by Western blot according to the molecular weight profile. The majority of the PPD positive bovine (67.92%) recognized a protein with 26kDa, suggesting the use of this protein in a serological test for bovine tuberculosis.</p> | <p>A tuberculose bovina persiste em vários países como ameaça à saúde dos rebanhos apesar dos esforços dispensados ao controle e erradicação da doença. O objetivo deste trabalho foi elucidar quais seriam as proteínas mais imunogênicas e, portanto, com potencial de serem utilizadas em novos testes de diagnóstico bovino da tuberculose. Amostras de soro obtidas de animais reatores e não reatores ao teste de tuberculinização intradérmica foram avaliados quanto ao reconhecimento de antígenos proteicos de <em>Mycobacterium bovis</em>, isolado de bovino no Estado de Goiás. A imunogenicidade das proteínas de <em>M. bovis </em>foi obtida por meio da técnica de Western blot. A maioria dos bovinos PPD positivos (67,92%) reconheceu o antígeno de 26kDa, sugerindo o seu uso potencial no desenvolvimento de um ensaio sorológico para a tuberculose bovina.</p>