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Hematologic examination and total protein values of sea turtles of species Caretta caretta (Linnaeus, 1758), in captivity, from Praia do Forte, Mata de São João - Bahia | Hemograma e determinação da proteína plasmática total de tartarugas marinhas da espécie Caretta caretta (Linnaeus, 1758), criadas em cativeiro, Praia do Forte, Município de Mata de São João - Bahia 全文
2006
Thaís Torres Pires | Gonzalo Rostan | José Eugênio Guimarães
With the purpose in obtaining measurable parameters of hematologic examination and total protein test values of eight sea turtles of species Caretta caretta in captivity, 5mL of blood were collected from dorsal cervical sinus using heparin as anticoagulant. The results showed average amounts of erythrocytes of 275.000/µl (±28.030,59), packed cell volume of 33,12% (±2,35), hemoglobin concentration of 8,65 g/dl (±0,80), while the erythrocytic indexes were 725 fl (± 131,99) for mean corpuscular volume (MCV), 198,18 pg (± 38,66) for mean corpuscular hemoglobin (MCH) and 26,10% (± 1,21) for mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC). The leukocyte response showed an average of WBC counting of 3.656/µl (±963,04), and the average numbers relating to the leukocyte count were 59,38% (±16.27) for heterophils, 10,38% (±6,32) for eosinophils, 0,13% (±0.35) for basophils, 29,25% (±17,12) for lymphocytes and 0,88% (±2,10) for monocytes, being those absolute values of 2.156,87/µl (±703,49); 366,88/µl (±216,44); 2,50/µl (±7,07); 1.110,94/µl (±783,61) e 19,06/µl (± 42,34), respectively. The average amount of trombocytes found equaled 10.968,13/µl (±3.109,19) and the total protein finding of an average 6,5 g/dl (±0,83). Of all variables analyzed, the erythrocytes count, the mean corpuscular volume, the mean corpuscular hemoglobin and all leukocyte counts presented different values for the relevant species when compared to published literature. | Com objetivo de obter valores dos parâmetros do hemograma e de proteína plasmática total, de tartarugas marinhas da espécie Caretta caretta criadas em cativeiro, foram coletados cinco mililitros de sangue através de venopunção do seio venoso cervical dorsal de oito animais daquela espécie, utilizando como anticoagulante a heparina de sódio. Os achados hematológicos mostraram valores médios de eritrócitos de 275.000/µl (±28.030,59), volume globular de 33,12% (±2,35), concentração de hemoglobina de 8,65 g/dl (±0,80), enquanto que os índices hematimétricos encontrados foram de 725 fl (± 131,99) para volume globular médio (VGM), 198,18 pg (± 38,66) para hemoglobina globular média (HGM) e de 26,10% (± 1,21) para concentração de hemoglobina globular média (CHGM). No leucograma a média do número total de leucócitos foi de 3.656/µl (±963,04), e os valores médios relativos da contagem diferencial de leucócitos foram de 59,38% (±16.27) para heterófilos, 10,38% (±6,32) para eosinófilos, 0,13% (±0.35) para basófilos, 29,25% (±17,12) para linfócitos e 0,88% (±2,10) para monócitos, sendo os valores absolutos de 2.156,87/µl (±703,49); 366,88/µl (±216,44); 2,50/µl (±7,07); 1.110,94/µl (±783,61) e 19,06/µl (± 42,34), respectivamente. O valor médio de trombócitos encontrado foi igual a 10.968,13/µl (±3.109,19) e a determinação de proteína total teve uma média de 6,5 g/dl (±0,83). Das variáveis analisadas, a contagem de eritrócitos, o volume globular médio, a hemoglobina globular média e as contagens total e diferencial de leucócitos apresentaram valores diferentes para a espécie em questão, quando comparadas com a literatura consultada.
显示更多 [+] 显示较少 [-]Microcolony detection of Mycobacterium Bovis in Middlebrook 7H11 thin layer culture | Comparação entre a técnica de cultivo em camada delgada de ágar Middlebrook 7H11 e meio de Stonebrink para isolamento de Mycobacterium Bovis em amostras de campo 全文
2006
André Guaragna Marcondes | Maria de Lourdes M. Shikama | Sílvio Arruda Vasconcellos | Nílson Roberti Benites | Zenaide Maria de Morais | Eliana Roxo | Ricardo Augusto Dias | Sylvia Luisa Pincherle Cardoso Leão | Sônia Regina Pinheiro
The aim of this article is to evaluate the efficiency of the cultivation technique in thin layer of Middlebrook 7H11 (TL7H11) for isolating Mycobactererium bovis from suggestive lesions of tuberculosis in cattle and to compare the results with traditional methods of cultivation. At the first step it was used M. bovis AN5 and M. tubercuolosis H37Rv standard strain. The both performance were compared between the cultivation in TL7H11 and in the Stonebrink and Petragnani media. The strains presented visible growing in TL7H11 at the third day of cultivation, while the Stonebrink and Petragnani there were growing just at the 14 day. At the 13 day of cultivation it was possible to differentiate both strains by their colony morphological characteristics. The second step was to cultivate 62 clinicals samples in TL7H11 and Stonebrink for tentative isolation of M. bovis. The isolated samples were detected in TL7H11 until 21 days of cultivation whereas none samples weregrown in Stonebrink tubes. The median time of growing in TL7H11 was 19,0 days against 49,0 days of Stonebrink (p=0,014). | O presente trabalho teve por objetivo avaliar a eficiência da técnica de cultivo em camada delgada de ágar Middlebrook 7H11 (TL7H11) no isolamento de Mycobacterium bovis de lesões sugestivas de tuberculose em bovinos, comparando seus resultados com os métodos tradicionais de cultivo. Numa primeira fase foram utilizadas estirpes padrão de M. bovis AN5 e M. tuberculosis H37Rv mantidas em laboratório, para comparação de desempenho entre o cultivo em TL7H11 e nos meios de Stonebrik e Petragnani. Ambas estirpes apresentaram crescimento visível em TL7H11 no terceiro dia de cultivo enquanto que nos meios de Stonebrink e Petragnani só houve crescimento a partir do 14º dia. Aos 13 dias de cultivo em TL7H11 foi possível diferenciar as duas estirpes pelas características morfológicas das colônias. Numa segunda fase, 62 amostras de campo foram cultivadas em TL7H11 e Stonebrink para isolamento de M. bovis. As amostras isoladas foram detectadas pelo TL7H11 até os 21 dias de cultivo contra nenhum crescimento dos tubos de Stonebrink. O tempo médio de crescimento no TL7H11 foi de 19,0 dias contra 49,0 dias do meio de Stonebrink (p = 0,014).
显示更多 [+] 显示较少 [-]In vitro control of prostaglandin F2a synthesis in bovine endometrium | Controle da síntese de prostaglandina F2± no endométrio bovino in vitro 全文
2006
Claudia Maria Bertan | Pauline Martins da Cunha | Claudio Alvarenga de Oliveira | Anneliese de Souza Traldi | Mario Binelli
Synthesis of endometrial prostaglandin F2± (PGF2±) results from a complex cascade of highly coordinated intracellular events. Production of PGF2± can be stimulated by mellitin and 12, 13 phorbol dibutyrate (PDBu). Objective of the present study was to verify whether basal or stimulated synthesis of PGF2± was dependent on de novo protein synthesis. In Experiment 1, endometrial explants from cyclic, non-lactating cross-bred beef cows (n=2) on day 15 of the estrous cycle were incubated in quadruplicate in culture KHB culture medium or medium supplemented with 10-6M PDBu, 10-6M melittin or 10-5M melittin. Medium samples were collected immediately and 60 minutes after treatment administration and concentration of PGF2± in medium were measured by radioimmunoassay. Concentrations of PGF2± in medium were higher (P<0.06) after treatment with PDBu in comparison with control and melittin. In Experiment 2, endometrial explants from cyclic, non-lactating cross-bred beef cows (n=4) on day 17 of the estrous cycle were incubated in quadruplicate in medium supplemented with 0, 50, 100 or 200mg cyclohexamide (CHX) and 0 or 100ng/ml PDBu, in a 4 x 2 factorial arrangement. Medium samples were collected immediately and 60 minutes after administration of treatments and concentrations of PGF2± measured by radioimmunoassay. Endometrial integrity was was evaluated by histology. Treatment with PDBu stimulated production of PGF2± (P<0.01), regardless of concentration of CHX used. The CHX did not affect production of PGF2±, either in the presence or absence of PDBu. Histological integrity of explants was preserved. It was concluded that both basal and PDBu-stimulated PGF2± production are not dependent on new protein sythesis. | A síntese de prostaglandina F2± (PGF2±) endometrial, resulta de uma complexa cascata de eventos intracelulares que ocorrem de maneira altamente coordenada. A síntese de PGF2± pode ser estimulada na presença da melitina e do forbol 12,13 dibutirato (PDBu). O objetivo do presente estudo foi verificar se a produção basal e a estimulação aguda de PGF2± são dependentes da síntese de proteínas. No experimento 1, explantes obtidos de fêmeas bovinas (n=2), cíclicas, não lactantes, no dia 15 do ciclo estral foram incubados em quadruplicata, com meio de cultivo (KHB) ou KHB suplementado com PDBu 10-6M, melitina 10-6M ou melitina 10-5M. Amostras do meio foram coletadas 0 e 60 minutos após os tratamentos e as concentrações de PGF2± foram mensuradas por radioimunoensaio. Com 60 minutos após os tratamentos houve aumento das concentrações médias de PGF2± (P<0,06) em resposta ao tratamento com PDBu comparado ao grupo KHB e melitina. No experimento 2, explantes endometriais de fêmeas bovinas (n=4), não gestantes, no 17° dia do ciclo estral, pesando de 80 a 100mg foram incubados em KHB suplementado com 0, 50, 100 ou 200mg/mL de CHX e 0 ou 100ng/mL de PDBu em um arranjo fatorial 2 x 4, em quadruplicata. Amostras do meio foram coletadas 0 e 60 minutos após os tratamentos e as concentrações de PGF2± foram mensuradas por radioimunoensaio. A integridade dos explantes endometriais tratados com CHX foi avaliada por cortes histológicos. Foi observado aumento na produção de PGF2± em resposta ao tratamento com PDBu (P<0,01), entretanto, não houve diferenças na produção de PGF2± pelos tecidos tratados com diferentes concentrações de CHX, associadas ou não ao PDBu. A integridade histológica dos explantes foi preservada. Conclui-se que a produção basal e a estimulação aguda da síntese de PGF2± não são dependentes da síntese de novas proteínas.
显示更多 [+] 显示较少 [-]Detection of Leptospira pomona in bovine semen by fluorescent capillary eletrophoresis | Detecção de Leptospira pomona em sêmen bovino por eletroforese capilar fluorescente 全文
2006
Francisca Elda Ferreira Dias | Sérgio Morais Aoki | Lígia Garcia Mesquita | Caris Maroni Nunes | José Fernando Garcia
This study was performed in order to evaluate the detection limit of PCR with fluorescent capillary electrophoresis for Leptospira pomona diagnosis in bovine semen. Negative bovine semen samples were artificially contaminated with Leptospira pomona (10(0) to 10(7) bacteria/ml) and DNA was extracted by phenol/chloroform protocol. DNA fragments visualization was done by three electrophoresis methods: under UV light in 2% agarose gel, silver staining 8% polyacrylamide gel and fluorescent capillary electrophoresis. The detection limit of capillary electrophoresis for Leptospira pomona was 10²bacteria/ml. Under UV light, in 2% agarose gel, the detection limit was of 10(4) bacteria/ml while for silver stained 8% polyacrylamide gel it was 10² bacteria/ml. PCR with fluorescent capillary electrophoresis is an efficient and rapid diagnostic test for DNA detection of Leptospira in bovine semen and this can be an important tool for herd and semen sanitary control in artificial insemination centers. | Este estudo pretendeu avaliar o limiar de detecção da técnica de PCR aliada à eletroforese capilar para diagnóstico da Leptospira pomona em sêmen bovino. Doses inseminantes livres de patógenos foram contaminadas experimentalmente com Leptospira pomona em escalas que variavam de 10(0) a 10(7) bactérias/ml e submetidas à extração de DNA pelo método de fenol/clorofórmio. Após a reação de PCR, a visualização dos fragmentos foi realizada em três tipos de eletroforese: agarose 2% sob luz UV, acrilamida 8% corado com prata e eletroforese capilar fluorescente. A detecção de DNA de Leptospira pomona em sêmen bovino através de eletroforese capilar fluorescente foi possível a partir de concentração de 10² bactérias/ml. Nos métodos de eletroforese em agarose 2%, observou-se limite de detecção de 10(4) bactérias/ml e em gel de poliacrilamida 8% o limite de detecção foi de 10² bactérias/ml. A eletroforese capilar demonstrou ser uma alternativa eficaz e rápida na detecção de DNA de Leptospira em sêmen bovino podendo ser uma valiosa ferramenta para controle de qualidade do sêmen produzido em centrais de inseminação artificial dada a facilidade de automação desse processo.
显示更多 [+] 显示较少 [-]Anomalia congênita em vasos da base do coração de um potro | Congenit anomaly in vessels of base in a foal heart 全文
2006
Gisele Fabrino Machado | Cinthia Graziela Candioto | Roberto Carvalhal | Rosemeri de Oliveira Vasconcelos | Edson Francisco do Espírito Santo | Daniela Boaventura de Oliveira
Anomalias congênitas do coração e de grandes vasos estão entre as mais comuns encontradas em animais, porém são raras em eqüinos. Este relato descreve uma anomalia cardíaca que apresenta confluência entre a parede da aorta e do tronco pulmonar, ramificação da veia cava caudal no átrio esquerdo com presença de válvula e conseqüentemente posição errônea do coração na cavidade torácica de um potro da raça Quarto-de-Milha encontrado morto após o nascimento. O diagnóstico foi realizado pela associação dos achados macroscópicos durante a necrópsia e o exame histopatológico realizados no Curso de Medicina Veterinária- UNESP-Araçatuba. | Congenital anomalies of heart and large vessels are among more common found in animals, however rare in horses. This survey describes a cardiac anomaly that presents confluence between aorta wall and lung trunk, ramification of caudal cava vein in left atrium with presence of valve and consequently erroneous position of heart in thoracic cavity of one foal found dead after birth. The diagnostic was carried out for macroscopic finds association during the necropsy and histopathologic exams carried out at School of Veterinary Medicine - Unesp Araçatuba.
显示更多 [+] 显示较少 [-]Macrófagos lácteos de búfalas hígidas: avaliações da fagocitose, espraiamento e liberação de H2O2 | Milk macrophages from healthy female buffaloes: evaluation of phagocytosis test, spreading and hydrogen peroxide release assays 全文
2006
Alice Maria Melville Paiva Della Libera | Eduardo Harry Birgel | Sandra Satiko Kitamura | Andrea Mello Franco Rosenfeld | Ênio Mori | Cristina de Oliveira Massoco-Salles Gomes | Wanderley Pereira de Araújo
O presente estudo teve por objetivo avaliar funcionalmente os macrófagos lácteos "nonelicited" presentes por meio de testes de fagocitose, espraiamento e liberação de peróxido de hidrogênio. Foram colhidas 56 amostras de leite de 15 búfalas hígidas e mensuradas a contagem de células somáticas total e diferencial, a viabilidade celular, os testes de fagocitose, de espraiamento e a liberação de peróxido de hidrogênio. Dessas variáveis obteve-se respectivamente média de 14.500 cél/mL de leite; com mediana de 4,33% de linfócitos e médias e desvios padrão de 50,77% + 18,28 de células da série monócito/macrófago e 32,13% + 19,27 de polimorfonucleares. A viabilidade das células na suspensão foi 66,8% +15,8 e os índices de fagocitose e espraiamento foram 30,1% + 16,9 e 58,5% +13,3. Não houve diferença entre a liberação de H2O2 espontânea e induzida por PMA. Concluiu-se que os macrófagos presentes no leite de búfalas hígidas e espraiaram significativamente, além de apresentarem correlação com outro marcador de ativação celular, no caso, a liberação de peróxido de hidrogênio; mais da metade dos macrófagos aderidos fagocitaram partículas de zymosan; os fagócitos mantêm sua capacidade de liberar peróxido de hidrogênio, espontaneamente ou não, em grau máximo, com uma significativa variação entre amostras. | The objective of the present study was to evaluate the functioning of nonelicited dairy macrophages present in phagocytosis, spreading and hydrogen peroxide release tests. Fifty-six samples of milk were collected from 15 healthy buffaloes. Total and differential somatic cell counts, cell viability, and indexes of phagocytosis, spreading and hydrogen peroxide release were assessed. The following values were obtained: mean of 14,500 cells/mL of milk, with median equal to 4.33% of lymphocytes; mean and standard deviation equal to 50.77% + 18.28 of monocytes / macrophages and 32.13% + 19.27 polymorphouclear cells. Mean viability of cells in suspension was 66.8% +15.8; phagocytosis and spreading indexes were equal to 30.1% + 16.9 and 58.5% +13.3, respectively. There was no difference between the spontaneous release of H2O2 and the one induced by PMA. It was concluded that nonelicited macrophages present in the milk of healthy buffaloes were significantly capable to spread and phagocyte. Phagocytes presented the ability to release hydrogen peroxide either spontaneously or not, in a maximum level and with a significant variation between samples.
显示更多 [+] 显示较少 [-]Experimental chronic granulomatous inflammatory process in fish: a morphological, ultrastructural and immunocytochemical study | Processo inflamatório crônico granulomatoso experimental em peixes: um estudo morfológico, ultraestrutural e imunohistoquímico 全文
2006
Eliana Reiko Matushima | Adhemar Longatto Filho | Cristina Takami Kanamura | Idércio Luiz Sinhorini
The purpose of the present study was to evaluate the chronic granulomatous inflammatory process experimentally induced in Oreochromis niloticus by the inoculation of BCG and to clarify aspects of the inflammatory reaction in fish for a better understanding of the phylogeny of the process. Results obtained by light microscopy and ultrastructural analysis showed the participation of macrophages, thrombocytes, lymphocytes, eosinophils, plasma cells and foreign type giant cells in the inflammatory process. Besides these cell types, a granulomatous reaction mainly consisting of epithelioid cells was also observed ultrastructurally. These epithelioid cells developed desmosomes throughout the experiment, and also began to express receptors for cytokeratin. Both findings are immunocytochemically characteristic of epithelial cells. Pigment cells (melanomacrophages) could also be seen surrounding all the granulomatoid formation in a crescent fashion and participating in the chronic granulomatous inflammatory reaction. | O objetivo do presente estudo foi avaliar o processo inflamatório crônico granulomatoso induzido experimentalmente em Oreochromis niloticus através da inoculação de BCG e elucidar aspectos da reação inflamatória em peixes para uma melhor compreensão da filogenia do processo. Os resultados obtidos por microscopia de luz comum e ultra-estrutural demonstraram a participação de macrófagos, trombócitos, linfócitos, eosinófilos, células plasmáticas e células gigante tipo corpo estranho no processo inflamatório. Além desses tipos celulares, uma reação granulomatosa constituída predominantemente de células epitelióides também foram observadas ultraestruturalmente. Essas células epitelióides desenvolveram desmossomos ao longo do experimento, e também passaram a expressar receptores para citoqueratina, características estas de células epiteliais. Células pigmentares (melanomacrófagos), envolvendo de maneira crescente toda a formação granulomatóide e, participando ativamente da reação inflamatória crônica granulomatosa.
显示更多 [+] 显示较少 [-]Efeitos do incremento da fibra em detergente neutro na dieta de suínos sobre a morfologia dos órgãos digestivos e não digestivos | Effects of increasing neutral detergent fiber in swine diets on the morphology of digestive and non-digestive organs 全文
2006
Jacinta Diva Ferrugem Gomes | Romualdo Shigueo Fukushima | Soraia Marques Putrino | Carlos Grossklaus | Gustavo Júlio Melo Monteiro de Lima
Objetivou-se avaliar os efeitos da inclusão na ração de 0 ou 8% de fibra em detergente neutro proveniente de feno de gramínea sobre a morfologia dos órgãos digestivos e não digestivos de suínos nas fases de creche e de crescimento-terminação. Foram utilizados suínos mestiços alimentados à vontade com rações isoprotéicas e isoenergéticas, em experimento inteiramente casualizado. Ao final de cada período, os animais foram abatidos e eviscerados. Observou-se que a ração fibrosa promoveu, na creche, aumento do peso do estômago vazio, do intestino grosso e do ceco cheio (expressos em percentual do peso vivo dos animais). Nos animais da fase de crescimento-terminação, registrou-se aumento do peso do trato gastrointestinal cheio e do estômago vazio. O aumento do peso de alguns órgãos digestivos sugere possível adaptação morfológica à presença de ração fibrosa. | This work was targeted to evaluate the effects of including 0 or 8% of neutral detergent fiber from grass hay on the morphology of digestive and non-digestive organs of swine receiving starting or growing-finishing diets. It was employed cross-bred animals fed isoproteic and isoenergetic ad libitum rations in a completely randomized experimental design. At the end of each period, animals were slaughtered and eviscerated. It was detected that the fibrous ration increased the weight of empty stomach, large intestine and filled cecum (as a percentage of live weight) of starting animals. In the growing-finishing animals fibrous ration increased the weights of filled gastrointestinal tract and empty stomach. Higher weights of some digestive organs suggest a possible morphological adaptation to high fiber diets.
显示更多 [+] 显示较少 [-]Dorsal metacarpal disease: incidence and predisposing factors | Periostite metacarpiana dorsal: incidência e fatores pré-disponentes 全文
2006
Flávio Gomes de Oliveira | Karin Erica Brass | Flávio Desessards De La Corte | José Henrique Souza da Silva | Carlos Antonio Mondino Silva
Forty two 2-year-old thoroughbreds were examined clinically at intervals of 15 days during their training for the first race to determine the incidence and the predisposing factors of dorsal metacarpal disease. During the first year 25 horses were followed during 2 months and in the second year the follow up was done for 4 months in 17 . Horses' data like gender, average speed, speed exercise work and trainer were also collected. Dorsal metacarpal disease was diagnosed in 28% and 70,6% of the 2 year-old thoroughbreds in the first and second year of the study, respectively. Total incidence was 45%. The incidence and average speed was not affected by gender. The average speed achieved by affected and none affected horses remained between 16 and 18m/s. On 500 and 700m speed exercise, the average speed of affected horses was higher than of none affected ones (p<0,05). Ten out of 19 horses showed dorsal metacarpal disease signs at the distance of 700m. There was significant difference between trainers regarding the incidence of dorsal metacarpal disease and average speed of their horses. 2-year-olds under care of trainers whose horses had the highest incidence o dorsal metacarpal disease also were the fastest one's. Therefore, fast speed associated with longer distances (700m) and trainer are factors that predispose young horses to dorsal metacarpal disease. | Quarenta e dois potros Puro Sangue de Corrida, de 2 anos de idade, foram acompanhados clinicamente a cada 15 dias, durante o treinamento para sua primeira corrida, para determinar a incidência e possíveis fatores pré-disponentes da periostite metacarpiana dorsal. Durante dois meses no primeiro ano (n=25) e quatro meses (n=17) no segundo ano em que foi realizado o acompanhamento dos potros eles foram submetidos a exames físicos para a identificação de sinais clínicos de periostite metacarpiana dorsal. Dados como sexo, velocidade média, distância dos exercícios de velocidade e treinador foram tabulados. No primeiro ano 28% dos potros manifestaram periostite metacarpiana dorsal e no segundo ano este índice foi de 70,6%. Considerando-se todo o período de estudo a incidência foi de 45%. Não houve diferença entre os sexos na manifestação de periostite metacarpiana e velocidade média alcançada. A velocidade média desenvolvida pelos potros que permaneceram sadios e dos que apresentaram periostite metacarpiana se manteve entre 16 e 18 m/s. Nos 500 e 700m a velocidade média dos animais com periostite metacarpiana foi maior (p<0,05). A periostite metacarpiana se manifestou em 10 de 19 potros na distância de 700 m. Houve diferença na incidência de periostite metacarpiana e velocidade média atingida pelos potros de acordo com o treinador. Os potros treinados pelos treinadores que apresentaram maior incidência de periostite metacarpiana foram os mais rápidos. Portanto, fatores que favoreceram a manifestação de periostite metacarpiana foram velocidade média elevada sobre distâncias maiores como os 700m e regime de treinamento preconizado pelos diferentes treinadores.
显示更多 [+] 显示较少 [-]Toxicity test and cryopreservation of sheep isolated preantral follicles using glycerol, ethylen glycol, dimethil sulfoxyde and propanediol | Teste de toxicidade e criopreservação de folículos pré-antrais ovinos isolados utilizando Glicerol, Etilenoglicol, Dimetilsulfóxido e Propanodiol 全文
2006
Regiane Rodrigues dos Santos | Ana Paula Ribeiro Rodrigues | Sônia Helena Furtado Costa | Maria Helena Tavares Matos | José Roberto Viana Silva | Juliana Jales de Hollanda Celestino | Fabricio Sousa Martins | Marcia Viviane Alves Saraiva | Mônica Aline Parente Melo | José Ricardo de Figueiredo
The aim of this study was to evaluate isolated sheep preantral follicles (PF) after exposure and cryopreservation using glycerol (GLI), ethylene glycol (EG), propanediol (PROH) or dimethyl sulfoxide (DMSO) at 1.5 and 3.0 M. Each ovarian pair from 5 mixed breed adult sheeps was obtained at a local slaughterhouse and submited to follicular isolation. From the obtained suspension, one aliquot was immediately analysed with trypan blue. The remaining suspension was divided in 16 aliquots of 0.9 mL, suspended in (v/v) in MEM+ with EG, DMSO, GLI or PROH at 1.5 or 3.0 M to the toxicity test and cryopreservation. After the end of each treatment, the follicular viability was analysed and the PF were classified as viable if not dyed or not viable if dyed with trypan blue. The analysis of the results showed that after the toxicity test and cryopreservation, using all cryoprotectants and at both concentrations, the percentage of viable PF was significantly reduced when compared to the control. At the toxicity test, when the cryoprotectants were compared at the same concentrations, the lowest percentage of viable preantral follicles was obtained when 3.0 M PROH (38,9%) was used, being, more toxic when compared to the others cryoprotectants. After cryopreservation, significantly higher percentual of viable PF was observed when the EG and DMSO were used. In conclusion, sheep PF can be cryopreserved successfully using DMSO and EG at 1.5 and 3.0 M. | O objetivo deste estudo foi avaliar folículos pré-antrais (FOPA) ovinos isolados após sua exposição e criopreservação utilizando glicerol (GLI), etilenoglicol (EG), propanodiol (PROH) ou dimetilsulfóxido (DMSO) a 1,5 e 3,0 M. Cada par ovariano de 5 ovelhas sem raça definida foi coletado em abatedouro local e submetido ao isolamento folicular. Da suspensão obtida, uma alíquota foi imediatamente destinada à análise da viabilidade folicular com o auxílio do corante vital azul de trypan. O restante da suspensão foi dividida em 16 alíquotas de 0,9 mL, suspensas (v/v) em MEM+ com EG, DMSO, GLI ou PROH a 1,5 ou 3,0 M, para teste de toxicidade e criopreservação. Após o término de cada tratamento, a viabilidade folicular foi analisada e os FOPA considerados viáveis se não corados ou não viáveis, quando corados. A análise dos dados mostrou que após o teste de toxicidade e criopreservação, em todos os crioprotetores e em ambas as concentrações, a percentagem de FOPA viáveis foi significativamente reduzida quando comparada ao controle. No teste de toxicidade, quando os crioprotetores foram comparados entre si nas mesmas concentrações, foram observadas percentagens significativamente menores de FOPA viáveis no PROH 3,0 M (38,9%), apresentando-se, portanto, mais tóxico quando comparado aos demais crioprotetores. Após criopreservação, obteve-se percentagens significativamente maiores de folículos pré-antrais viáveis quando o EG e o DMSO foram utilizados. Em conclusão, FOPA ovinos isolados podem ser criopreservados com sucesso utilizando-se DMSO e EG a 1,5 e 3,0 M.
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